仁用杏优株花器官抗寒性研究
仁用杏优株花器官抗寒性研究
作 者: 王晓燕导 师: 杨建民；李彦慧
学 校: 河北农业大学
专 业: 森林培育
关键词: 仁用杏 抗寒性 选择 生理生化指标 蛋白质 双向电泳
分类号: S662.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 58次
引 用: 2次
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内容摘要
本试验以抗晚霜仁用杏(Prunus armeniaca×sibirica)优良单株花器官为试材,比较研究了36株抗晚霜仁用杏单株的抗寒性,并以筛选出的最抗寒优株的雌蕊为试材,探索一套适用于仁用杏雌蕊全细胞蛋白质组分离的双向电泳技术,为深入研究仁用杏抗寒机制、筛选抗寒品种以及进一步进行抗性育种奠定基础。研究结果如下:1.在28棵抗寒性‘优一’(Prunus armeniaca×sibirica’youyi’)优株中,‘优株25号’花瓣、雄蕊和雌蕊过冷却点、电导率及SOD的隶属函数平均值均为最大,分别为0.3334、0.3334、0.3027。各优株不同花器官的排名位次不同,而综合排名第一的‘优株25号’,其不同花器官排名位次均居第一。2.在8棵抗寒性‘龙王帽’(Prunus armeniaca×sibirica’longwangmao’)优株中,‘优株31号’花瓣、雄蕊和雌蕊过冷却点、电导率及SOD的隶属函数平均值值均为最大,分别为0.3334、0.3201、0.3334。各优株不同花器官的排名位次不同,‘优株31号’综合排名第一,其不同花器官排名位次均居第一。3.‘优株25号’、‘优株31号’的田间受冻情况均比同园对照轻。‘优株25号’花瓣和雌蕊的受冻率较其对照分别低9.4%、7.8%;‘优株31号’花瓣和雌蕊的受冻率较其对照分别低12.5%、4.9%;优株与对照间有显著差异(P<0.05)。优株受冻后的坐果率也均优于对照,且差异显著(P<0.05)。从花瓣与雌蕊的受冻率看,‘优株25号’和‘优株31号’的受冻率差异均不显著;从受冻后的坐果率看,‘优株25号’受冻后的坐果率高于‘优株31号’,差异显著(P<0.05)。4.优株各个花器官的过冷却点温度均低于同品种对照,差异显著(P<0.05),‘优株25号’更是达到了极显著水平(P<0.01),‘优株25号’花瓣、雄蕊、雌蕊的过冷却点温度均比同品种对照低0.9℃,‘优株31号’花瓣、雄蕊、雌蕊的过冷却点比同品种对照分别低0.5℃、0.7℃、0.7℃。‘优株25号’花瓣、雄蕊、雌蕊的过冷却点温度与‘优株31号’相比分别低了0.7℃、0.4℃、0.5℃,二者花瓣、雄蕊在P<0.01水平上有差异,而雌蕊在P<0.05水平上有差异。5.不同品种花器官的电解质外渗率、MDA含量随温度下降呈不断升高的趋势,可溶性蛋白及SOD酶活性呈先升高后降低的趋势。在不同温度下优株与对照花器官的电解质外渗率、MDA含量均表现为优株小于对照。两个优株花器官的电解质外渗率及MDA含量均表现为‘优株25号’<‘优株31号’。优株的半致死温度均低于对照,且‘优株25号’的半致死温度低于‘优株31号’。结果与电解质外渗率所得结果相符。同品种优株与对照花器官SOD酶活性不同,‘优株25号’花瓣、雄蕊、雌蕊SOD最大值分别出现在-6℃、-3℃、-3℃,对照‘优一’花瓣、雄蕊、雌蕊SOD最大值分别出现在-5℃、-3℃、-3℃。且除-6℃雌蕊的SOD值外,不同低温胁迫下‘优株25号’花器官的SOD值均高于对照。‘优株31号’花瓣、雄蕊、雌蕊SOD最大值分别出现在-5℃、-3℃、-3℃,对照‘龙王帽’花瓣、雄蕊、雌蕊SOD最大值分别出现在-4℃、-3℃、-3℃。除-4℃花瓣与-7℃雄蕊和雌蕊的SOD值外,不同低温胁迫下‘优株31号’花器官的SOD值均高于对照。不同优株花器官SOD酶活性不同,表现为‘优株25号’>‘优株31号’。‘龙王帽’花瓣的可溶性蛋白含量最大值出现在-3℃,其他不同品种花瓣、雄蕊、雌蕊可溶性蛋白含量均在-4℃时达到最大值。低温胁迫下,优株花器官可溶性蛋白的含量均高于对照。‘优株31号’雄蕊、雌蕊在-6℃至-7℃之间的可溶性蛋白含量大于‘优株25号’,其余均表现为‘优株25号’>‘优株31号’。6.建立了适合仁用杏雌蕊蛋白质组学研究的双向电泳体系,即:用TCA/丙酮法与酚提取法相结合的方法提取雌蕊的蛋白质,用常温震荡裂解2h的方法溶解蛋白干粉,之后采用bradford法对提取的蛋白质进行定量,在此基础上,上样量在100ug,上样体积为370ul。第一向等电聚焦采用pH 5-8,17cm的线性IPG胶条进行蛋白质的分离,等电聚焦结束后,经含有DTT和碘乙酰胺的平衡缓冲液Ⅰ、Ⅱ各平衡15min。第二向SDS-PAGE凝胶电泳采用12%的凝胶浓度对蛋白质进行分离。用高分辨率的硝酸银染色,可获得分辨率和重复性均较好的凝胶图谱。
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