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真菌病的实验室诊断方法,这5类你都了解吗?

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1、真菌直接镜检

简便、快速,阳性结果可确定真菌感染,但阴性不能排除诊断。取材方法有刮取法、粘贴法和钻孔法。检查常用:①湿片法:标本置于载玻片上,加一滴浮载液,盖上盖玻片,放置片刻或微加热,然后轻压盖玻片,驱逐气泡并将标本压薄,用吸纸吸去周围溢液,置显微镜下检查。先在低倍镜下检查有无菌丝和孢子,然后用高倍镜观察孢子和菌丝的形态、特征、位置、大小和排列等。②染色法:标本涂在载玻片上,空气干燥后,经染色后镜下观察。

2、培养检查

多数真菌在适合的培养基上可生长,可根据观察菌落形态及生理、生物化学、分子生物学等方法确定菌种。有些病原菌如隐球菌,一次培养阳性即可确诊。而条件致病菌如念珠菌、曲霉等则应多次培养阳性,且证实均属同一菌种,再结合临床方可诊断。

3、病理检查

有时培养出来的真菌并不能断定为致病菌,要根据其在组织中的寄生形态及宿主的组织反应来判断,组织内找到真菌可确定诊断,其形态有助于菌种的鉴定。特殊染色较普通的HE染色阳性率高,常用的有PAS染色、嗜银染色。免疫组织化学通过检测真菌的特异性抗原来诊断组织中的病原菌,比组织化学方法更敏感,且具有特异性。

4、荧光检查

许多真菌可产生特殊的荧光,用滤过紫外线,即Wood灯在暗室中照射可见不同的荧光,有诊断意义。

5、其他

包括生理和生物化学鉴定法、免疫学方法、分子生物学方法、动物接种方法等。

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