DB12T 1007—2020茄果类蔬菜种苗番茄黄化曲叶病毒检测技术规程.pdf
ICS 65.020.01 B 16 DB12 天 津 市 地 方 标 准 DB12/T 1007—2020 茄果类蔬菜种苗番茄黄化曲叶病毒检测技 术规程 Technical regulation of detection for tomato yellow leaf curl virus carried by seeds and seedlings of solanum fruit vegetables 2020 - 12 - 17 发布 2021 - 01 - 16 实施 天津市市场监督管理委员会 发 布 DB12/T 1007—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 I DB12/T 1007—2020 茄果类蔬菜种苗番茄黄化曲叶病毒检测技术规程 1 范围 本标准规定了茄果类蔬菜种苗番茄黄化曲叶病毒检测的仪器和试剂、检测程序、结果判定、样品和 菌株保存。 本标准适用于农业生产中，茄果类蔬菜种苗番茄黄化曲叶病毒的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修订版）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 番茄黄化曲叶病毒 tomato yeLLow leaf cur l virus （TYLCV） 番茄黄化曲叶病毒属于双生病毒科菜豆金色花叶病毒属病毒，因该属病毒在自然条件下只能由烟粉 虱以持久方式传播，又被称为粉虱传双生病毒，是一类具有孪生颗粒形态的植物DNA病毒，广泛分布于 热带和亚热带地区，在烟草、番茄、南瓜、木薯、棉花等重要经济作物上造成毁灭性危害。番茄黄化曲 叶病毒病基本信息参见附录A。 3.2 种苗传播病害 seedling-borne disease 种苗携带病原菌进行传播的一类植物病害。 4 仪器和试剂 4.1 仪器 高速离心机、灭菌锅、PCR仪、凝胶成像系统、电泳仪、旋涡振荡器、分析天平 （感量1/10000g）。 4.2 试剂 4.2.1 总体要求 除另有规定外，所有试剂均为分析纯试剂，实验用水符合GB/T 6682。 4.2.2 PBS 缓冲液 NaCL 8.10 g、NaH PO 0.18 g、Na HPO 1.97 g、蒸馏水1000 mL，pH 7.4。 2 4 2 4 1 DB12/T 1007—2020 4.2.3 商用植物DNA 提取试剂盒或DNA 提取试剂 DNA提取试剂主要有Lysis缓冲液和乙酸钾缓冲液。 4.2.4 裂解缓冲液 100mM Tris-HCL pH 8.0；50mM EDTA，pH8.0；1%SDS；10μg/mL RNase A。 4.2.5 乙酸钾缓冲液 乙酸钾缓冲液3
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