植物的营养液怎制调制？简单点.希望不会太难，本人手工不 爱问知识人
1
植物组培培养基及其配制
培养基好比土壤，
是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。
因此，
在组织
培养基的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。
一、组成培养基的五类成分
目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质
和有机附加物等五类物质组成的。
1。
无机营养物
无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，
大量元素中，
氮源通常
有硝态氮或铵态氮，
但在培养基中用硝态氮的较多，
也有将硝态氮和铵态氮混合
使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子，
在
近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养
基所需的钠和氯化物，
由钙盐、
磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、
锰、
锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即
FeSO4
与
Na2
—
EDTA(
螯合剂
)
的混合。
2。
碳源
培养的植物组织或细胞，
它们的光合作用较弱。
因此，
需要在培养基中附加
一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。
蔗糖除作为培养
基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。
3。
维生素
在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于
B
族维生素，
其中效果最佳的有维生素
B1
、
维生素
B6
、
生物素、
泛酸钙和肌醇等。
4。
有机附加物
包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、
椰子汁及各种氨基酸等。
另外，
琼脂也是最常用的有机附加物，
它主要是作为培
养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。
5。
生长调节物质
常用的生长调节物质大致包括以下三类：
(1)
植物生长素类。如吲哚乙酸
(IAA)
、萘乙酸
(NAA)
、
2
，
4-
二氯苯氧乙酸
(2
，
4-D)
。
(2)
细胞分裂素。如玉米素
(Zt)
、
6-
苄基嘌呤
(6-BA
或
BAP)
和激动素
(Kt)
。
(3)
赤霉素。组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸
(GA3)
。
二、常用培养基配方及其特点
1。
常用培养基配方
组织培养是否成功，
在很大程度上取决于对培养基的选择。
不同培养基有不
同特点，
适合于不同的植物种类和接种材料。
开展组织培养活动时，
应对各种培
养基进行了解和分析，
以便能从中选择使用。
下面介绍组织培养几种常用培养基
的配方见表
9
－
1
。
培养基中的激素种类和数量，
随着不同培养阶段和不同材料而有变化，
因此
各配方中均不列入。
2。
几种常用培养基的特点
(1) MS
培养基。
MS
培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度，
对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。
由于配方中的
离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不致影
响离子间的平衡。
MS
固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖
2
及花药培养，
它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。
这种培养基
中的无机养分的数量和比例比较合适，
足以满足植物细胞在营养上和生理上的需
要。因此，一般情况下，无须再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子
汁等有机附加成分。
与其它培养基的基本成分相比，
MS
培养基中的硝酸盐、钾
和铵的含量高，这是它的明显特点。
(2)B5
培养基。
B5
培养基的主要特点是含有较低的铵，这是因为铵可能对不
少培养物的生长有抑制作用。
经过试验发现，
有些植物的愈伤组织和悬浮培养物
在
MS
培养基上生长得比
B5
培养基上要好，
而另一些植物，
在
B5
培养基上更适
宜。
(3)N6
培养基。
N6
培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养，
在国内
外得到广泛应用。
在组织培养中，经常采用的还有怀特
(While
，
1963)
培养基、尼
许
(Nitsch
，
1951)
培养基等。
它们在基本成分上大同小异。怀特培养基由于无机
盐的数量比较低，更适合木本植物的组织培养。
三、培养液的配制
1。
制备母液
为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量，
应该将培养基中
的各种成分，按原量
10
倍、
100
倍或
1000
倍称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫
做母液。
这样，每次配制培养基时，取其总量的
1/10
、
1/100
、
1/1000
，加以稀
释，即成培养液。
现将培养液中各类物质制备母液的方法说明如下。
(1)
大量元素。大量元素包括硝酸铵等用量较大的几种化合物。制备时，按
表中排列的顺序，以其
10
倍的用量，分别称出并进行溶解，以后按顺序混在一
起，最后加蒸馏水，使其总量达到
1
升，此即大量元素母液。
(2)
微量元素。因用量少，为称量方便和精确起见，应配成
100
倍或
1000
倍
的母液。
配制时，
每种化合物的量加大
100
倍或
1000
倍，
逐次溶解并混在一起，
制成微量元素母液。
(3)
铁盐。
铁盐要单独配制。
由硫酸亚铁
(FeSO4·
7H2O)5。57
克和乙二胺四乙酸
二钠
(Na
—
EDTA)7。
45
克溶于
1
升水中配成。每配
1
升培养基，加铁盐
5
毫升。
(4)
有机物质。
主要指氨基酸和维生素类物质。它们都是分别称量，分别配
成所需的浓度
(0。1
～
1。0
毫克
/
毫升
)
，用时按培养基配方中要求的量分别加入。
(5)
植物激素。最常用的有生长素和细胞分裂素。这类物质使用浓度很低，
一般为
0。01
～
10
毫克
/
升。
可按用量的
100
倍或
1000
倍配制母液，配制时要单
个称量，分别贮藏。
配制植物生长素时，
应先按要求浓度称好药品，
置于小烧杯或容量瓶中，
用
1
～
2
毫升
0。
1N(
克当量浓度
)
氢氧化钠溶解，
再加蒸馏水稀释至所需浓度。
配制细
胞分裂素时，应先用少量
0。
5
或
1N
的盐酸溶解，然后加蒸馏水至所需量。
以上各种混合液
(
母液
)
或单独配制药品，均应放入冰箱中保存，以免变质、
长霉。
至于蔗糖、琼脂等，可按配方中要求，随称随用。
2。
配制培养基的具体操作
①
根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入
同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。
②
将①
中称好的琼脂加蒸馏水
300
～
400
毫升，加热并不断搅拌，直至煮沸溶
解呈透明状，再停止加热。
③
将①
中所取的各种物质
(
包括蔗糖
)
，加入煮好的琼脂中，再加水至
1000
毫
升，搅拌均匀，配成培养基。
④
用
1N
的氢氧化钠或盐酸，滴入③
中的培养基里，每次只滴几滴，滴后搅拌
均匀，并用
pH
试纸测其
pH
值，直到将培养基的
pH
值调到
5。
8
。
⑤
将配好的培养基，用漏斗分装到三角瓶
(
或试管
)
中，并用棉塞塞紧瓶口，
瓶壁写上号码。
瓶中培养基的量约为容量的
1/4
或
1/5
。
培养基的成分比较复杂，
为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉，
可以准备一份配
制培养基的成分单，
将培养基的全部成分和用量填写清楚。
配制时，
按表列内容
顺序，按项按量称取，就不会出现差错。成分单的格式与内容见表
9
－
2
。
3。
培养基的灭菌与保存
培养基配制完毕后，
应立即灭菌。
培养基通常应在高压蒸汽灭菌锅内，
在汽
相
120
℃条件下，灭菌
20
分钟。
如果没有高压蒸汽灭菌锅，也可采用间歇灭菌
法进行灭菌，即将培养基煮沸
10
分钟，
24
小时后再煮沸
20
分钟，如此连续灭
菌三次，即可达到完全灭菌的目的。
经过灭菌的培养基应置于
10
℃下保存，
特别是含有生长调节物质的培养基，
在
4
～
5
℃低温下保存要更好些。
含吲哚乙酸或赤霉素的培养基，要在配制后的
一周内使用完，
其它培养基最多也不应超过一个月。
在多数情况下，
应在消毒后
两周内用完。
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