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简单的高温抗体固定化,用于快速、简单的基于微流控纸的 ELISA 检测 β'


检测食物中的致敏蛋白是维持食物过敏者健康的必要条件。酶联免疫吸附测定 (ELISA) 是一种检测蛋白质的常用技术。然而,传统的 ELISA 价格昂贵、耗时,并且需要技术专长。在这里,开发了一种基于纸的微流体分析装置 (μPAD) 与夹心 ELISA 技术相结合,用于快速、简单和灵敏地检测 β'-组分蛋白,这是鲑鱼子中的一种主要过敏原。开发的 μPAD-ELISA 采用捕获抗体和酶标记检测抗体。除了 μPAD 之外,还开发了一种固定捕获抗体的技术,该技术通过在 50 °C 的烘箱中将抗体溶液在纸底物上干燥,无需任何化学修饰,可在 5 分钟内完成固定。与在室温下固定的抗体相比,固定化抗体表现出更高的抗原结合能力和对洗涤过程的稳定性。由于该技术允许在 μPAD 中简单快速地制备 ELISA,因此与传统 ELISA 需要约 19 小时相比,目前的 μPAD-ELISA 仅需 15 分钟即可完成分析,包括固定步骤。该 μPAD-ELISA 提供了 1.59 ng mL-1 的良好检测限,并将试剂量减少了约 17-67 倍,从而降低了分析成本。这种采用当前抗体固定的 μPAD-ELISA 方法有望成为检测食品中过敏原蛋白的有效策略。

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