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病原微生物的检验方法都有哪些？

花匠小妙招
2024-11-24 16:48

洛阳市涧西区疾病预防控制中心尤育杰

微生物的种类非常繁多，在自然界中广泛存在，与人类和自然界其他生物共生共存，绝大多数对人类和自然界是有益的，只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病，这部分微生物被称为病原微生物，包括细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等，比如结核分歧杆菌可引起结核病，痢疾杆菌可引起痢疾等。病原微生物的检验主要是检测与临床患者致病性有关的病原性微生物，对感染性疾病进行快速、准确地诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，防止微生物产生耐药性和院内感染的发生。

那么，病原微生物的检验方法都有哪些呢？

细菌检验的方法有哪些？

细菌检验的方法有很多种，主要包括涂片检测、细菌培养、血清学检测、细菌核酸检测以及二代测序等检测方法：

涂片检测：一般可以用血标本、痰、尿液、粪便、脑脊液、胸水、腹水以及局部皮肤分泌物或脓肿的脓液进行涂片染色，然后在显微镜下观察细菌的形态，有些细菌形态较特殊，可以通过涂片的方法进行早期诊断。

细菌培养：细菌培养是诊断细菌感染最可靠的检测手段，一般把细菌放在体外适宜的生长环境中，让其快速生长，通过检测感染源头进行治疗。细菌培养的缺点是不能帮助早期诊断，因为细菌生长需要一定的时间，生长较快的细菌一般需要2-3天，有些细菌生长比较慢，可能需要1周甚至更长时间。

血清学检测：血清学检测是将血液中的血清分离出来，通过检测相应细菌的抗体辅助诊断，比如伤寒杆菌的感染，可以通过检测伤寒杆菌的O抗体和H抗体，辅助诊断是否有伤寒杆菌的感染。血清学抗体会出现假阳性和假阴性，所以相对细菌培养，血清学抗体的检测手段不是非常可靠。

细菌核酸检测：常用的细菌核酸检测主要是聚合酶链反应，通常叫PCR检测，一般会采取细菌比较特殊的序列，通过序列检测诊断是不是细菌感染，PCR可以检测出微小的细菌核酸，具有很高的敏感性。

二代测序方法：即NGS的方法，通过对宏基因组的二代测序，可以检测出细菌的感染。但是，人体本身正常组织当中可能携带一些细菌，比如皮肤、呼吸道、泌尿系统、阴道等，这些部位本身有正常细菌的寄生，如果对这些部位的标本测序，可能出现细菌的污染。所以二代测序通常采用更可靠的无菌体液检测，比如胸水、腹水以及血的检测，检测后还要结合患者的临床表现分析是哪一类细菌感染，以及检测出的细菌是不是致病菌。

病毒检验的方法有哪些？

病毒检验的方法也有很多，有血常规检查、免疫学检查、病毒核酸测定、病理检查、病毒培养等。

最常用的就是查血常规，看淋巴细胞的情况，如果淋巴细胞高就有可能是病毒感染，但是这个方法不够准确。进一步筛查的话可以做免疫学检查，看看有没有病毒的抗原和抗体存在。

如果想要检验结果更加准确，那就需要做病毒的核酸测定，即采用荧光定量RT-PCR方法，或者对病毒感染的组织进行检查，也就是病理检查。当然，最准确的是进行病毒培养，然后再进行检查，一般来说就是细胞培养，不过这个检验方法一般用于科研。

真菌检验的方法有哪些？

真菌检验的方法包括直接镜检、真菌培养、血清学试验、组织病理检查等，最常用的就是真菌的直接镜检。

真菌的直接镜检需要使用酒精清洁创面，收取表面的皮屑、毛发、甲板或者体液组织等，将收取的标本放在玻璃片上，加5%-10%的氢氧化钾液，盖上盖玻片，溶解一会儿，一般5分钟后可以在低倍显微镜下寻找有无菌丝或者孢子，寻找到菌丝或者孢子后可以转为高倍镜进行观察。

支原体和衣原体检验有哪些方法？

衣原体检验可采用酶免法、直接免疫荧光法，核酸检测技术包括DNA探针法、聚合酶链式反应（PCR）、连接酶链式反应（LCR）和细胞培养法等。支原体实验室检测方法有：形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。

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