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你可以在中国的ACCC 中国农业微生物菌种保藏管理中心或ATCC 即美国模式培养物集存库(American type culture collection)找到相应的标注菌株,至于培养注意事项,这两个机构都会给你比较权威的信息的,希望对你有帮助
菌种培养需要注意合理配制培养基。严格消毒灭菌处理。使用优质菌种。控制适宜的温度,湿度。至于鉴定注意事项应该是根据所鉴定的内容仔细观察分辨。精益求精。
如何选用培养基及培养细胞注意事项
培养基的选择:
细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了,但却不是最简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。
◆ MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。
◆ 改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。
◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
准备几种培养基,然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验,来选择其中最适合的。
以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。
培养基的 ... 注意事项:
1 注意营养物质的浓度比和C/N比
2 控制pH条件
3 原料来源的选择
4 灭菌处理
无菌操作注意事项:
1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 %
ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每
次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间
污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间
隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可
以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦
拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操
作。
3. 小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打
开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45° 角取用,
尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒
感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程
中,应避免引起aerosol 之产生,小心毒性药品,例如DMSO 及TPA 等,并避免尖锐
针头之伤害等。
5. 定期检测下列项目:
5.1. CO2 钢瓶之CO2 压力
5.2. CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。
5.3. 无菌操作台内之airflow 压力,定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜,预滤网(300
小时/预滤网,3000 小时/HEPA)。
6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750),定期更换水槽的水
圈舍要保温要能防蛇防鼠和其它东西…育雏时光线不要太强…容易产生啄癖!鸡舍不能 潮湿…随时保证干燥!疫苗做马立克,新支二联,法氏囊就好了…备用药嘛。大肠杆菌,感冒,呼吸道病…球虫药必备…紫药水也准备着。发生啄癖能用上…放养场地要防野物…每天投料时观察鸡只健康状况…有病的马上隔离用药…药量要足…按药品说明书添加药物等于没用药!投药要考虑那么多鸡,药少了顶屁用…一般买药更好买兑水用的…省事又方便…平时多给点青菜青草什么的…鸡都格外健康点!疾病多在预防…就病毒性病而言…治疗用药等于白搭。做疫苗才能保证鸡群健康…做疫苗后零散发病的也有…消毒做好点就没啥问题了…
鸡会得的病有很多种:
1、病毒病 新城疫、流感、法氏囊、传支、传喉、鸡痘等
2、细菌病 大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱、葡萄球菌等
3、支原体和曲霉菌病
4、寄生虫病 球虫病、白冠病、组织滴虫病等
5、营养代谢病
6、中毒病等等
在鸡病防治中,治重于防。
金耳菌种应该通过组织分离或者孢子分离获得。也可以通过购买获得。
文竹是很多花友十分喜爱的家庭花卉盆栽之一,所以文竹的养殖 ... ,文竹的家庭养护管理 ... 也是花友们津津乐道的话题。下面就为大家介绍一下文竹的养殖 ... ,文竹的家庭养护管理 ... 。要养好文竹,熟悉其生长习性也是十分关键的。文竹原产于非洲南部。喜温暖、湿润、半阴环境。布耐寒,不耐旱。喜肥沃、疏松、排水良好的砂质壤土。文竹喜阴,多用于室内案头摆设,文竹喜湿、怕旱,忌过湿、水涝,对土壤、水分要求比较严格,掌握适宜的盆土水分是文竹日常养护的一大关键。
家庭养护要点1 盆土
文竹适合在温暖湿润、富含腐枝、排水良好的土壤中生长。文竹怕烟尘,若遇到有毒气体,则枝叶易发黄。为此,养护时应注意将其放在清洁的环境中。文竹宜肥沃土壤,若长期没有换土加肥,养分供不应求,就会出现枝叶发黄现象。此时,需每周浇一次腐熟的稀薄液肥或复合化肥,并及时浇水、松土,这样不久即可由黄转绿。如施肥过浓或施未腐熟肥料,均易引起“浇根”,导致叶子干枯、脱落。这时,需要倒盆除去肥料,并用清水冲浇土坨,然后换进新的培养土。
2浇水
盆栽文竹如果浇水过多,土壤过于粘重,排水不良,会使文竹的叶间变成焦黄并脱落,生长寿影响。一般需待盆土见干时再浇水,春秋季节应减少浇水,坚持不干不浇水,冬季控制浇水。浇水过多,盆土过湿易引起根部腐烂、叶黄脱落。浇水时应注意水温应尽量与周围温度相近,减少水温不适对根系的 ... 。天气炎热干燥时,要用水喷撒叶面。
3施肥
文竹虽非好肥植物但也不能缺少肥料。盆栽文竹受盆土限制,必须及时补充养分,以满足其生长要求。文竹施肥宜薄宜勤,千万不可施浓肥,否则容易引起枝叶发黄。春夏生长季节,以氮肥为主。可每月施1次腐熟的薄液肥。当植株定型后,要适当控制施肥,以免徒长,影响株型美观。
4光照
文竹栽培切忌烈日暴晒,夏秋炎热季节,应置于荫蔽通风之处。开花期既怕风,又怕雨。此时要注意通风良好,否则会造成落花不能结实。盆栽时,晴天适宜将盆栽置于室外接受阳光,利于其进行光和作用。
5温度
冬季盆栽文竹应保持5℃以上的环境温度,以免受冻。
繁殖 ... 文竹一般采用播种或分株繁殖。播种宜在春天3~4月份进行,播后30~40天即可发芽。正常生长4年即可开花结果。3~5年的文竹可以分株繁殖,但分株繁殖时要用利刃剪掉根茎的连接处,否则植株受损后,恢复生长较慢,形状参差不齐,会影响观赏效果。
竹喜湿、怕旱,忌过湿、水涝,对土壤、水分要求比较严格,掌握适宜的盆土水分是文竹日常养护的一大关键。平时如浇水过多,造成盆上长期过湿或积水,会造成根系生长不良,进而引起烂根。表现为地上部先是枝叶徒长,继而叶梢黄化枝叶渐渐枯黄、落叶,新长出的嫩芽中途枯萎,三年以上的藤本植株则出现大量落花、落籽现象,严重时可导致整株死亡。浇水过少则盆上过干,造成叶黄枯梢,小枝脱落,体态干瘪,同时落蕾落花。固此应始终让盆土处于间干间湿的交替状态,如发现盆上过湿,切莫再继续浇水,应通过松土、换盆、疏通底孔,促使多余的水分迅速散出。
接种以后,应该尽快转入培养室。控制适宜的温度。防治堆积过密造成烧菌。
关于这个问题可以专门写一本书,多数菌种的生产 ... 大同小异,一般生产上都是组织培养法,科研育种上用孢子分离法。只有木耳,银耳以及珍惜菌种羊肚菌较复杂。具体操作可以去新华书店买书来看,都在农业那一块。推荐用书《蘑菇生产全书》杨国良著,河北农大出版
简单说一下组织分离法吧:
一.组织分离
取八成成熟香菇菌柄和菌盖连接处菇肉一块(两倍火柴粗,一半火柴长).升汞消毒.
二. ... 培养基(PDA)
马铃薯——蔗糖——琼脂培养基(PDA): 马铃薯煮汁 1000毫升 蔗糖 20克 琼脂 20克 PH值 5.5~6.0 制法:先将新鲜无病害的马铃薯洗净,去皮后切成小薄片,称200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后过滤,其滤汁为马铃薯煮汁。然后加琼脂和蔗糖煮溶,后补足水分至1000毫升,装管(瓶)灭菌备用。 一般食用菌母种的分离和培养都适合此培养基。2.麦粒培养基: 小麦粒 200克 糖 5克 碳酸钙 15克 水 500毫升 PH值 自然 制法:取小麦200克洗净,置锅中加水500毫升,煮沸20分钟,加入其他成分,煮5分钟,用纱布过滤,水汁分 装至试管的 1/3长度为好。
三.灭菌
按上述培养基装好后就要立即进行灭菌;将其中的杂菌 ... 死,然后才能接入我们所需要的纯菌种,进行培养。 不论是母种分离时用的斜面培养基,还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基,一般都采用热力灭菌法。 高压蒸汽灭菌法:若是斜面试管培养基。应先用牛皮纸扎成捆,标明棉塞为上端部分,然后竖直放入高压锅内,进行灭菌。在1.1公斤/平方厘米压力下维持30分钟,即可达到灭菌目的。开锅取出试管,趁热放成斜面。 灭菌材料如是原种和栽培种,应在1.1公斤/平方厘米压力保持60~90分钟。这样才能达到灭菌目的。达到所规 定的时间后,应停火并逐渐排去蒸汽。待压力表的指针回复零位时,再把消毒锅的螺栓旋开,打开盖子,取出瓶子。停火排汽时必须注意,排汽阀不能一下子放大,只有一点一点开,让压力表慢慢地回复到原位,然后再揭锅盖。如果排汽过猛,锅内压力急速下降,则会造成棉塞脱落和玻璃容器破损。 常压蒸汽灭菌法:如没有具备高压锅,可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下,以 100℃的温度持续6-8小时,以 ... 死培养料中的各种杂菌。
四.接种
在接种箱内将分离出的菇肉接种到灭菌好的培养基上,塞好棉塞.24-27℃弱光培养
整个过程注意不要让杂菌污染,更好在书店买专业书藉参考后再做.
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