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广东兰花病毒病调查和病原检测

花匠小妙招
2024-11-24 18:13

第27卷第3期江西植保Vol.27,No.32004年9月JIANGXIPLANTPROTECTIONSep.,2004

收稿日期：2004－05－05作者简介：梁敏国(1972－)，男，广东阳春人，主要从事城市绿化的研究和管理工作

广东兰花病毒病调查和病原检测梁敏国1，刘光华2（1.深圳市城市绿化管理处，广东深圳518026；2.仲恺农业技术学院植保系，广州广东510225）摘要：本试验主要是采用症状观察和ELISA方法检测兰花病毒。检测材料是从广州兰圃、芳村兰场、华南植物园、深圳苗圃场采集的兰花标本。兰花病株症状类型有花叶、黑褐色坏死斑或斑块；有的叶片在褪绿处变薄，后变灰、干缩、破裂成丝。ELISA检测结果表明墨兰、文心兰、大花惠兰（组培苗）、蝴蝶兰、万代兰和卡特兰等几个品种共22个样本含有病毒，其中含有建兰花叶病毒（CyMV）的有10个品种，含有齿兰环斑病毒（ORSV）的有7个品种，同时含有两种以上病毒的有3个品种6个样本。关键词：兰花、建兰花叶病毒（CyMV）、齿兰环斑病毒（ORSV）、DAC-ELISA中图分类号：S682.31，S436.8文献标识码：A文章编号：1006－4249（2004）03－0097－04兰花病毒病是兰花上的一类重要病害，易传染，寄主范围广，防治困难。目前，世界上已报导的兰花病毒有：建兰花叶病毒、齿兰环斑病毒、建兰轻性花叶病毒、建兰环斑病毒、番茄环斑病毒、万代兰花叶病毒、石斛兰花叶病毒、洋兰斑点病毒和黄瓜花叶病毒等10来种病毒，其中以建兰花叶病毒（CyMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）发生最为普遍。我国报导兰花病毒始于1983年朱本明等从上海的兰花上分离到两种病毒，鉴定为建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒。沈淑琳（1990）对这两种病毒的生物、生化特性进一步系统研究，证实是我国兰花上最主要的病毒。近年来，在我国南方，尤其是广东盆栽兰花，远销国内外，兰花组织培养也开始大面积推广，并有一定的规模。无论盆栽的地生兰或组培的兰花，病毒病的发生均很普遍，近来从国外引进的热带兰病情也普遍而严重。进一步加强兰花病毒病调查、检测和防治研究对兰花的生产有着非常重要的意义。1材料与方法1.1材料兰花品种：共159个样本，21个品种。硬叶吊兰、虎头兰、墨兰、卡特兰、五唇兰、文心兰、蝴蝶兰、万代兰、石斛兰、雷丽兰、毛兰、兜兰、美丽兜兰和硬叶兰，采集于广州植物园的；墨兰、玉兰采集于芳村地区；墨兰、惠兰、秋兰和文心兰采集于广州兰圃；墨兰、大花惠兰和蝴蝶兰采集于深圳苗圃场。1.2方法本试验主要是采用DAC-ELISA方法检测兰花病毒。具体检测方法如下：（1）抗原制备——取5ml0.1MPH＝9.6的碳酸盐缓冲液（内含1%铜试剂），加入病叶研磨而成。（2）操作步骤：加抗原加病毒澄清液，每孔120ul孵育37℃，3小时，倒去冲洗37℃，3小时，倒去加抗体加抗血清，每孔120ul孵育37℃，3小时，倒去冲洗37℃，3小时，倒去加酶标A－蛋白（1/40）每孔120ul