菊花病毒脱除与检测技术研究
菊花病毒脱除与检测技术研究
【摘要】： 菊花(Chrysanthemum morifolium)是菊科菊属多年生宿根草本植物,是四大鲜切花之首,具有较高的观赏价值及经济价值。但近年来由于病毒的侵染,使菊花整体品质下降,种性严重退化,直接影响我国菊花的推广及创收。因此培育无毒种苗,对菊花的生产及销售具有重要意义。本研究以菊花品种‘神马’、‘白扇’、‘墨菊’为试验材料,主要探讨脱除菊花体内黄瓜花叶病毒(CMV)、菊花B病毒(CVB)、烟草花叶病毒(TMV)、番茄不孕病毒(TAV)4种病毒的脱毒方法,并采用血清学技术及分子生物学技术对不同脱毒方法的脱毒效果进行检测。试验结果如下1)菊花的脱毒方法：主要采用茎尖培养、病毒唑结合茎尖培养以及热处理结合茎尖培养3种方法对菊花体内病毒进行脱毒研究。结果显示,茎尖培养以一次茎尖培养中0.4-0.5mm茎尖的脱毒效果最好；4种病毒的脱毒效果差异极显著,其中TAV的脱毒率最高,为46.2%,TMV的脱毒率最低,为38.6%。病毒唑结合茎尖培养以病毒唑浓度为10mg/L、处理时间为42d、茎尖长度为0.4-0.5mm组合的脱毒效果最好；不同品种的脱毒效果差异显著,其中‘神马’的茎尖脱毒效果最好；4种病毒的脱毒效果差异极显著,其中CMV的脱毒率最高,为48.8%,TMV的脱毒率最低,为41.7%。热处理结合茎尖培养以变温处理60d后剥取0.4-0.5mm的茎尖进行脱毒培养效果最好；不同品种的脱毒效果差异极显著,其中‘神马’的茎尖脱毒效果最好,为78.1%；4种病毒的脱毒率差异也极显著,其中TAV的脱毒率最高,为79.9%,TMV的脱毒率最低,为67.3%。在综合比较茎尖成活率和脱毒率后,3种脱毒方法中热处理结合茎尖培养的脱毒效果最好。2)菊花病毒的检测技术：采用ELISA及RT-PCR技术分别对4种病毒进行检测。结果显示,RT-PCR检测技术的灵敏度高于ELISA检测技术。3种脱毒方法中热处理结合茎尖培养法的脱毒效果最彻底。
【学位授予单位】：北京林业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
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