方氏秋海棠水培繁殖方法
技术领域
本发明涉及植物无性繁殖技术领域,具体涉及一种方氏秋海棠水培繁殖方法。
背景技术
方氏秋海棠(Begoniafangii)复叶,叶片革质,叶脉红色,具有较高的观赏价值。目前可采用以蒸馏水或无菌水为培养液,以切割叶片或带叶柄叶片为材料的脱脂棉培养皿内水培繁殖方法,叶片切割处或叶柄生根慢,20~25天,根数少,2~3条,细长;生根后不发芽,即使发芽,发芽时间长,需30~35天,芽数少,仅3~5个,发芽率低,仅30~40%;移栽时,根伸入脱脂棉,容易造成断根,采用泥炭或园土作为栽培基质,土壤易积水或板结,造成根腐烂,且不定根吸水能力弱,光合作用不强,成活率60~70%,繁殖周期长,60~65天。
因此,有必要改善方氏秋海棠的繁殖方法。
发明内容
为解决目前方氏秋海棠水培繁殖发芽率低、成活率低、繁殖周期长等问题,本发明提供一种易生根、易发芽、繁殖周期短的方氏秋海棠水培繁殖方法。
本发明通过下列技术方案实现:一种方氏秋海棠水培繁殖方法,经过下列各步骤:
(1)选取健康生长的成熟叶片,用体积浓度为70%的酒精消毒,剪短叶柄,使每个叶片保留长度0.5~1.0cm的小叶柄或总叶柄;
(2)在无菌培养皿内铺一层0.3~0.5cm厚的脱脂棉,其上再铺一层无菌定性滤纸;将步骤(1)所得叶片平放于无菌定性滤纸上,用下列生根培养液浸湿脱脂棉和滤纸:无菌水+10~30mg/L维生素B1+10~20mg/L生根粉(ABT)溶液或10~30mg/L维生素B1+1mg/LNAA+0.1~0.3mg/LKT,并使无菌定性滤纸表面不积水;在温度为23~25℃、光照强度为3000~5000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述生根培养液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,直至叶柄处长出4~7条不定根;培养液加入后10~11天,且不定根粗壮;
(3)不定根长出后,补充下列不定芽诱导液润湿脱脂棉和滤纸:无菌水+10~20mg/L复合维生素B+2.0mg/L6-BA,在温度为23~25℃、光照强度为3000~5000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述不定芽诱导液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,直至生根处萌发5~10个芽;不定芽诱导液加入后12~14天,萌发5~10个芽,且发芽率达70~80%;
(4)发芽后,同上述操作补充无菌水配制的1/2MS生长培养液继续培养8~10天,直至萌发的芽发育长出小叶;
(5)在遮荫棚中,用含量75%的百菌清可湿性粉剂800~1000倍液,对上述叶片消毒3~5min,清水冲洗一遍,栽种在下列基质中:粗腐殖土:园土或泥炭:珍珠岩=2:1:1,浇透定根水后,在下列条件下管理:温度15℃以上,覆盖透明塑料薄膜保持湿度,向遮荫棚中喷雾增加空气湿度,使空气湿度保持在75~85%,且白天每隔2h喷水一次,3天后揭膜,减少喷水次数至一天4次,使空气湿度保持在65~75%,直至幼叶生长,即得秋海棠苗。成活率达99~100%。
本发明与传统方法比较,具备以下优点及效果:
1、本发明的生根培养液采用维生素B1、生根粉或植物生长调节剂,均有促进生根的作用,生根快,10~11天,根健壮;不定芽诱导液采用复合维生素B溶液+2.0mg/L6-BA,有利于不定芽形成,不定芽数多,萌芽率70~80%;1/2MS生长培养液促进植株生长健壮。
2、改良水培繁殖,脱脂棉上铺一层无菌滤纸,避免了根伸入脱脂棉而造成断根。
3、改良水培繁殖,移栽时,叶片用75%百菌清可湿性粉剂800~1000倍液消毒,栽培基质采用粗腐殖土:园土(或泥炭):珍珠岩2:1:1,既保水透气又富含营养,为保持空气湿度,覆盖透明塑料薄膜,白天每隔2h喷一次水,成活率99~100%。
4、使用本方法繁殖的方氏秋海棠,萌芽率提高40%,成活率提高30%,周期缩短近1倍,在秋海棠保种和生产上具有推广意义。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
(1)2015年6月10日,选取健康生长的成熟叶片,用体积浓度为70%的酒精消毒,剪短叶柄,使每个叶片保留长度0.5~1.0cm的小叶柄或总叶柄;
(2)在无菌培养皿内铺一层0.3~0.5cm厚的脱脂棉,其上再铺一层无菌定性滤纸;将叶片平放于无菌定性滤纸上,用下列生根培养液浸湿脱脂棉和滤纸:无菌水+10mg/L维生素B1+10mg/L生根粉(ABT)溶液,并使无菌定性滤纸表面不积水;在温度为23℃、光照强度为3000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述生根培养液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,2015年6月21日叶柄处长出4~7条粗壮不定根;
(3)6月22日,补充下列不定芽诱导液润湿脱脂棉和滤纸:无菌水+10mg/L复合维生素B+2.0mg/L6-BA,在温度为23℃、光照强度为3000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述不定芽诱导液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,7月4日生根处萌发5~10个芽;发芽率达78%;
(4)7月5日,同上述操作补充无菌水配制的1/2MS生长培养液继续培养10天,7月16日萌发的芽发育长出小叶;
(5)7月17日,在遮荫棚中,用含量75%的百菌清可湿性粉剂800倍液,对上述叶片消毒3~5min,清水冲洗一遍,栽种在下列基质中:粗腐殖土:园土:珍珠岩=2:1:1,浇透定根水后,在下列条件下管理:温度15℃以上,覆盖透明塑料薄膜保持湿度,向遮荫棚中喷雾增加空气湿度,使空气湿度保持在75~85%,且白天每隔2h喷水一次,3天后揭膜,减少喷水次数至一天4次,使空气湿度保持在65~75%,直至幼叶生长,即得秋海棠苗。成活率达100%,繁殖周期36天。
实施例2
(1)选取健康生长的成熟叶片,用体积浓度为70%的酒精消毒,剪短叶柄,使每个叶片保留长度0.5~1.0cm的小叶柄或总叶柄;
(2)在无菌培养皿内铺一层0.3~0.5cm厚的脱脂棉,其上再铺一层无菌定性滤纸;将叶片平放于无菌定性滤纸上,用下列生根培养液浸湿脱脂棉和滤纸:30mg/L维生素B1+1mg/LNAA+0.3mg/LKT,并使无菌定性滤纸表面不积水;在温度为23℃、光照强度为5000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述生根培养液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,叶柄处长出4~7条粗壮不定根;
(3)补充下列不定芽诱导液润湿脱脂棉和滤纸:无菌水+15mg/L复合维生素B+2.0mg/L6-BA,在温度为23℃、光照强度为5000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述不定芽诱导液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,生根处萌发5~10个芽;不定芽诱导液加入后12~14天,萌发5~10个芽,且发芽率达80%;
(4)同上述操作补充无菌水配制的1/2MS生长培养液继续培养8~10天,萌发的芽发育长出小叶;
(5)在遮荫棚中,用含量75%的百菌清可湿性粉剂1000倍液,对上述叶片消毒3~5min,清水冲洗一遍,栽种在下列基质中:粗腐殖土:园土:珍珠岩=2:1:1,浇透定根水后,在下列条件下管理:温度15℃以上,覆盖透明塑料薄膜保持湿度,向遮荫棚中喷雾增加空气湿度,使空气湿度保持在75~85%,且白天每隔2h喷水一次,3天后揭膜,减少喷水次数至一天4次,使空气湿度保持在65~75%,直至幼叶生长,即得秋海棠苗。成活率达100%,繁殖周期33天。
实施例3
(1)2015年6月26日,选取健康生长的成熟叶片,用体积浓度为70%的酒精消毒,剪短叶柄,使每个叶片保留长度0.5~1.0cm的小叶柄或总叶柄;
(2)在无菌培养皿内铺一层0.3~0.5cm厚的脱脂棉,其上再铺一层无菌定性滤纸;将叶片平放于无菌定性滤纸上,用下列生根培养液浸湿脱脂棉和滤纸:无菌水+30mg/L维生素B1+20mg/L生根粉(ABT)溶液,并使无菌定性滤纸表面不积水;在温度为24℃、光照强度为4000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述生根培养液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,2015年7月8日叶柄处长出4~7条粗壮不定根;
(3)7月9日,补充下列不定芽诱导液润湿脱脂棉和滤纸:无菌水+20mg/L复合维生素B+2.0mg/L6-BA,在温度为24℃、光照强度为4000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述不定芽诱导液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,7月23日生根处萌发5~10个芽;发芽率达80%;
(4)7月24日,同上述操作补充无菌水配制的1/2MS生长培养液继续培养9天,8月2日萌发的芽发育长出小叶;
(5)8月3日,在遮荫棚中,用含量75%的百菌清可湿性粉剂900倍液,对上述叶片消毒3~5min,清水冲洗一遍,栽种在下列基质中:粗腐殖土:泥炭:珍珠岩=2:1:1,浇透定根水后,在下列条件下管理:温度15℃以上,覆盖透明塑料薄膜保持湿度,向遮荫棚中喷雾增加空气湿度,使空气湿度保持在75~85%,且白天每隔2h喷水一次,3天后揭膜,减少喷水次数至一天4次,使空气湿度保持在65~75%,直至幼叶生长,即得秋海棠苗。成活率达100%,繁殖周期38天。
实施例4
(1选取健康生长的成熟叶片,用体积浓度为70%的酒精消毒,剪短叶柄,使每个叶片保留长度0.5~1.0cm的小叶柄或总叶柄;
(2)在无菌培养皿内铺一层0.3~0.5cm厚的脱脂棉,其上再铺一层无菌定性滤纸;将叶片平放于无菌定性滤纸上,用下列生根培养液浸湿脱脂棉和滤纸:10mg/L维生素B1+1mg/LNAA+0.1mg/LKT,并使无菌定性滤纸表面不积水;在温度为25℃、光照强度为5000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述生根培养液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,叶柄处长出4~7条粗壮不定根;
(3)补充下列不定芽诱导液润湿脱脂棉和滤纸:无菌水+20mg/L复合维生素B+2.0mg/L6-BA,在温度为25℃、光照强度为3000~5000lux的条件下进行生根培养,每天光培养10h,暗培养14h,且每2~3天补充一次上述不定芽诱导液,控制培养液积液1mL以内,保持脱脂棉和滤纸湿润,生根处萌发5~10个芽;不定芽诱导液加入后12~14天,萌发5~10个芽,且发芽率达77%;
(4)同上述操作补充无菌水配制的1/2MS生长培养液继续培养8天,萌发的芽发育长出小叶;
(5)在遮荫棚中,用含量75%的百菌清可湿性粉剂1000倍液,对上述叶片消毒3~5min,清水冲洗一遍,栽种在下列基质中:粗腐殖土:泥炭:珍珠岩=2:1:1,浇透定根水后,在下列条件下管理:温度15℃以上,覆盖透明塑料薄膜保持湿度,向遮荫棚中喷雾增加空气湿度,使空气湿度保持在75~85%,且白天每隔2h喷水一次,3天后揭膜,减少喷水次数至一天4次,使空气湿度保持在65~75%,直至幼叶生长,即得秋海棠苗。成活率达100%,繁殖周期32天。
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