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病原物的分离与培养要点.ppt

花匠小妙招
2024-11-26 17:11

五、如何防治？？？？发病规律与流行特点、影响因素化学、物理、生物、农业措施、综合治理等多种手段我们的实验/实习内容预测/预报我们的本次实验内容斜面培养基保存菌种实验结果中包含的主要内容菌落培养状态镜检孢子图？【标本采集】 1）症状典型 2）足够的采集量 3）病症典型，尽量完全 4）避免混杂 5）采集记载完整采样与实验中的注意事项（再次强调）酒精灯酒精升汞无菌水无菌水培养基平板培养基平板培养基平板无菌水废弃物放置升汞回收倒制培养基平板和往培养基平板上移植病组织材料，都必须在酒精灯火焰边进行。所有要与培养基接触的物品都必须经过灭菌处理，以保证培养基不被其它微生物污染。整体安排 1、分组进行（与实验一分组一致） 2、做好观察记录——实验日程安排 3、每组分工明确（考核指标之一） 4、每组至少调查2种病害（各接2皿）本学期主要实践内容植物病害的病原确定一、植物病害研究的特殊性与局限性受季节、天气、地域影响春夏秋冬、雨季、旱季、南北方受植物种类、周围小环境因素影响花卉、观赏树木、果树、蔬菜、粮食作物等植物病害研究的特殊性与局限性同一植物不同部位、不同生育期茎、叶、花、果；营养生长、生殖生长等同病异状辣椒细菌性叶斑病辣椒真菌性叶斑病同状异病附生菌、寄生菌、害虫等复合作用因此，仅靠病组织表面症状的识别，是远远不够的！二、完整的植物病害研究体系第一步：发现病害症状 1、观察病状 2、寻找病症【参考】实验一、植物病害症状观察完整的植物病害研究体系 1、观察病状 2、寻找病症第二步：镜检【操作方法】挑取新鲜病害样本上的少许菌物，用蒸馏水（常用，但易干燥）或乳酚油作浮载剂，制临时玻片镜检。观察其菌丝形态特点。（参考实验二）任务1：详细、准确地描述病症与病状。【叶片真菌观察技巧】小段透明胶带，贴在真菌存在的叶面上，粘下真菌后，将胶带放在载玻片的1滴甘油乳酸中，之后再加1滴甘油乳酸，加盖玻片检视。 ——酌情选用任务2：详细、准确地记录观察结果（菌丝体、孢子、孢子梗、产孢机构等），要求画图。（条件允许的话，可同时拍照存档。）情况一：有明显病症完整的植物病害研究体系第二步：镜检目的1：培养菌丝体，待其产孢后，进一步观察孢子、孢子梗、子实体的特征（进而确定、鉴定病原物）目的: 情况二：无明显病症情况一：有明显病症第三步：病原物的分离与培养【参考】实验七、植物病原菌物的分离和培养目的2：待PDA平板上长出菌丝体、子实体等，进行观察与识别。常用：PDA培养基马铃薯（200g）+葡萄糖（10-15g）+琼脂（20g）+1000ml水常用：PDA培养基（糖分稍少）链霉素为【微生物源杀细菌剂】可有效防治植物细菌病害，例如苹果、梨火疫病、烟草野火病、蓝霉病、白菜软腐病、番茄细菌性斑腐病、黄瓜角斑病、细菌性疫病、芹菜细菌性疫病等加少量的链霉素（防止培养基细菌污染）我们做的是真菌性病害的研究！病、健交界处 75%酒精消毒 20 – 30s 0.1%升汞消毒 10 – 15s 无菌水浸泡3次（清除酒精、升汞）滤纸上拭干（沾拭即可）目的：杀死表面杂菌（细菌、真菌）用镊子夹起，放在培养基表面（整齐放置） 5mm左右的小方块适宜的消毒时间：有足够的时间杀死表面杂菌，但不足以杀死组织内的病原物，而使其单独扩展与健康组织中。病、健交界处 75%酒精消毒 20 – 30s 0.1%升汞消毒 10 – 15s 无菌水浸泡3次（清除酒精、升汞）滤纸上拭干（沾拭即可）目的：杀死表面杂菌（细菌、真菌）用镊子夹起，放在培养基表面（整齐放置） 3-4d，暗培养25 ℃ 3-4d 培养基中心放置菌落的纯化纯化——转皿培养2-3次制作试管斜面PDA培养基，在低温（0-4℃）条件下保存菌种，以供进一步研究使用注意：所有操作均在酒精灯附近操作！！完整的植物病害研究体系第二步：镜检情况二：无明显病症情况一：有明显病症第三步：病原物的分离与培养任务3：纯化菌落，并保存菌种；详细、准确地描述菌落形态特征（正、背面）、镜检绘图（菌丝体、孢子等）完整的植物病害研究体系二、镜检情况二：无明显病症情况一：有明显病症三、病原物的分离与培养确定病原物 ★柯赫氏法则借助工具书，鉴定病原仅靠菌丝体无法鉴别菌物菌物鉴别依据 1、根肿菌：无性态的游动孢子/囊、有性态的休眠孢子/囊 2、卵菌：无性态的游动孢子/囊、有性态的卵孢子 3、接合菌门：无性态的包囊孢子/孢子囊、有性态的接