1.
科学家发现苍蝇体内存在一种抗菌活性蛋白,使其能够在恶劣环境中生存下去,这种蛋白质对多种细菌都具有极强的杀伤力。
(1)
科学家首先从苍蝇体内提取到了甲、乙、丙、丁四种单链蛋白质的混合物,其分子大小和电荷的性质情况如图所示
①更换蛋白质混合物的缓冲液时,一般采用法。
②若用凝胶色谱法分离混合物中的蛋白质,移动速度最快的是。
③若用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离混合物中的蛋白质,则蛋白质和形成的电泳带相距最近,其原因是。
(2)
研究发现蛋白甲和蛋白丙都具有一定的抗菌能力,为测定两种蛋白抗菌能力的大小,科学家设计了如下实验步骤:
步骤一:制作无菌平板。
步骤二:利用法将不同种类的致病菌分别接种在平板上,培养数日得到长满致病菌的平板。步骤三:将等量抗菌活性蛋白溶液滴加在平板上,培养一段时间,测定平板上的,结果如下。由实验结果可知,更适于作为广谱抗生素。
两种蛋白对各致病菌的抑菌圈直径(mm)
编号
金黄色葡萄球菌
单增李斯特菌
副溶血性弧菌
伤寒沙门氏菌
大肠埃希氏
蛋白甲
16.2
12.0
14.4
13.1
11.9
蛋白丙
18.2
8.3
11.1
1.0
0
1.
开发新能源是解决全球能源危机的有效途径,利用微生物生产油脂是开发新能源的重要方向。科研人员发现某些酵母菌能将碳水化合物、碳氢化合物和普通油脂在菌体内转化为具有商业价值的脂类。回答下列问题:
(1)
为了获得产油酵母菌种,科研人员将土壤样品制成悬浊液,置于以甘油为唯一碳源的液体培养基中进行选择培养,选择培养的目的是。甘油进入产油酵母菌体内的主要作用是(答出两点)。
(2)
准确移取0.1mL选择培养液,采用法将其接种于固定培养基上培养2~4d,形成分布均匀的菌落。挑取平板上的单菌落置于载玻片上,加热固定后用苏丹III染液染色,再置于显微镜下观察,若酵母菌细胞内出现色的脂肪颗粒,则说明酵母菌细胞中已有脂肪积累。
(3)
为获取菌体内的油脂,科研人员将产油酵母菌置于一定浓度的盐酸中,浸泡24h,沸水浴15~20min,此步骤的目的是。再将得到的液体冷却后加入氯仿,充分振荡后离心,取氯仿层经过处理得到油脂,采用氯仿萃取脂肪的原理是。
2.
研究人员利用鱼类肠道菌株MA35提取纤维素酶,按照“纤维素酶制备→纤维素酶纯化和鉴定→纤维素酶活力检测→纤维素酶酶学性质研究”的思路开展研究。回答下列问题:
(1)
从鱼类肠道中提取菌体后接种到中进行发酵培养,发酵完毕后将菌体与发酵液分离,菌体再加入缓冲液重新悬浮,利用超声波破碎细胞。制备纤维素粗酶液的思路是。
(2)
对获得的纤维素粗酶液用凝胶色谱柱进行洗脱,该方法纯化纤维素酶的原理是。纯化后的纤维素酶使用的方法进行纯度鉴定。
(3)
测定酶活力时,需要以的酶液作为对照组。实验组酶液加入羧甲基纤维素钠溶液,反应30 min后终止反应,以每分钟释放1 mmol所需要的酶量作为1个酶活力单位。设置30~80℃,pH为3.0~10.0的条件进行纤维素酶酶学性质研究,主要目的是。
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