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小麦条锈菌候选效应蛋白Pst

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目录

1 绪论

1.1 小麦条锈病与条锈菌概况

1.1.1 小麦条锈病的危害

1.1.2 小麦条锈菌的生物学特性

1.2 植物的免疫反应

1.2.1 病原相关分子模式触发的免疫(PTI)

1.2.2 效应子触发的免疫(ETI)

1.3 小麦条锈菌效应蛋白的研究进展

1.3.1 效应蛋白的基本特征

1.3.2 质外体效应蛋白

1.3.3 胞质效应蛋白

1.4 本研究的目的意义及研究内容

1.4.1 目的意义

1.4.2 研究内容

1.4.3 技术路线

2 小麦条锈菌候选效应蛋白Pst-LtgD的功能分析

2.1 引言

2.2 实验材料

2.2.1 植物材料

2.2.2 菌株

2.2.3 载体

2.2.4 主要化学与分子生物学试剂

2.2.5 主要实验仪器

2.3 实验方法

2.3.1 生物信息学分析

2.3.2 小麦条锈菌的繁殖与收集

2.3.3 条锈菌不同发育及侵染阶段的表达特征

2.3.4 烟草中的亚细胞定位

2.3.5 小麦原生质体中的亚细胞定位

2.3.6 信号肽分泌功能的验证

2.3.7 抑制INF1诱导的PCD实验

2.3.8 抑制DC3000诱导的PCD实验

2.3.9 抑制胼胝质积累的实验

2.3.10 PTI相关标记基因表达分析

2.3.11 病毒介导的基因沉默实验(BSMV-HIGS)

2.4 实验结果分析

2.4.1 生物信息学分析结果

2.4.2 条锈菌效应蛋白Pst-LtgD的表达特征分析

2.4.3 信号肽分泌功能的验证结果

2.4.4 烟草中的亚细胞定位分析

2.4.5 小麦原生质体中的亚细胞定位分析

2.4.6 抑制INF1诱导的PCD实验结果

2.4.7 抑制DC3000诱导的PCD实验结果

2.4.8 抑制大麦胼胝质积累的实验

2.4.9 PTI相关标记基因表达分析

2.5 讨论

2.6 小结

3 小麦条锈菌候选效应蛋白Pst-LtgD靶标的筛选与鉴定

3.1 引言

3.2 实验材料

3.2.1 植物材料

3.2.2 菌株

3.2.3 载体

3.2.4 主要化学与分子生物学试剂

3.2.5 主要实验仪器

3.3 实验方法

3.3.1 免疫共沉淀质谱筛选互作靶标

3.3.2 生物信息学分析

3.3.3 表达载体pGG-ΔSP-Pst-LtgD-3×Flag的构建

3.3.4 表达载体pTRBO-ΔSP-TaPR1a-GFP的构建

3.3.5 表达载体pTRBO-wNPR1-GFP的构建

3.4 实验结果

3.4.1 免疫共沉淀质谱筛选互作靶标实验结果

3.4.2 互作预测分析

3.4.3 pGG-ΔSP-Pst-LtgD-3×Flag克隆的鉴定

3.4.4 pTRBO-ΔSP-TaPR1a-GFP克隆的鉴定

3.4.5 pTRBO-wNPR1-GFP克隆的鉴定

3.5 讨论

3.6 小结

4 结论与展望

4.1 结论

4.2 创新点

4.3 展望

参考文献

附录A Pst-LtgD序列

附录B 引物序列

附录C 试剂配制

附录D 质粒图谱

附录E 大麦条纹花叶病毒介导的基因沉默实验结果

攻读硕士学位期间科研项目及科研成果

致 谢

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网址: 小麦条锈菌候选效应蛋白Pst https://m.huajiangbk.com/newsview773921.html

所属分类:花卉
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