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玩转移液器，你应该get的技巧都在这了

花匠小妙招
2024-12-05 16:27

当实验室有了精确的移液器和高质量吸头，此时提升移液技术就更为关键了。如果操作不当有时候会严重影响分液精度，导致重大问题和无法再现的结果。如何更好的使用移液器，一起看看吧。

移液枪有两种常见的操作技术：正向移液和反向移液。根据不同的液体选用合适的操作方法，将有助于液体转移的精准操作。手动精密可调移液器，活塞推杆分成两挡，即推出挡和过推挡，通常我们称之为第一挡和第二挡。

01正向移液

适合于水作为溶剂的液体，或者密度接近于水的液体。该种方法也可以称为“吸一打二”。
具体操作方法为：

活塞推到第一挡；将枪头浸入要转移液体中(按照试验目的调整浸入深度)，释放活塞，吸入液体；使吸头离开液体并轻触容器边缘以去除外壁多余液体，将枪头转入接收容器中；按活塞推到第二挡，吹出液体；按枪头推出杆，推掉枪头。

02反向移液

适用于有一定粘度和有泡沫的液体，可避免样品飞溅、起泡或形成气泡。第二挡吸入液体，在第一挡推出液体，液体转移后会有一部分液体残留在枪头中。该种方法也可以称为“吸二打一”。
具体操作方法为：活塞推到第二挡；将枪头浸入要转移液体中(按照试验目的调整浸入深度)，释放活塞，吸入液体；使吸头离开液体并轻触容器边缘以去除外壁多余液体，将枪头转入接收容器中；平稳按下活塞推到第一挡，得到预设移液体积（吸头上会残留一些液体并不应分配至接收容器）；将枪头转移至废液缸，按枪头推出杆，推掉枪头。

在做丁酸梭菌产品稀释时，前三个稀释梯度的液体有一定的粘度，需采用反向移液，后续的稀释梯度可采用正向移液。移液枪使用注意事项：
1操作较精密的试验前，需校枪； 2装配吸头时，不可用移液器反复撞击吸头，应左右轻转旋转上紧吸头； 3枪头要与移液器匹配，枪头吸取液体时，不可有漏液、滴液，不可挂壁； 4正式移取液体前，要润洗枪头； 5吸液时，移液枪垂直吸液； 6枪头内含有未打出的液体时，移液枪要垂直挂在移液器支架上； 7移取过程中如发生“弹枪倒吸”的情况，要清洁、消毒后重新校枪； 8移取过程中，要慢吸慢放； 9使用反向移液时，建议使用加长型枪头； 10不可以用普通移液器做强挥发型液体的转移。科研是个手艺活，养细胞、上流式、抽基因、做 qPCR、跑电泳、测序......每一道工序都很精细，日复一日的训练让你把流式细胞仪、qPCR 仪、测序仪这些精密仪器了解得透透的。但即使是科研老鸟，还是可能会栽在实验室最简单的操作上，那就是移液。移液操作几乎贯穿在所有实验过程中，错误的移液会直接影响实验结果，导致实验失败！不仅费钱费时，还会浪费样品，且很有可能错过率先发布研究成果的机会。面对不同的样本和实验需求，我该怎么选择适合的移液器？怎么正确高效地进行移液操作？有哪些小细节是容易忽略的？

03移液技巧

1设定量程由大到小设定量程。将齿轮转动大于目标量程 1/3 圈，调低至设定的目标量程，每次以相同方向调节各个量程。吸头浸入角度/时间正确浸入角度如下，并且在吸液之后，保持吸头浸入至少 1 秒钟。

2排液技巧三种技巧：沿侧壁（touch off）；在液面上方；浸入液体。 3润洗吸头润洗可以为每次移液提供了相同的接触表面。将样品吸入吸头，然后重新排液至储液槽内或者废弃。

04实验室健康和安全

✔ 定期清洁与保养移液器，保持最佳的力学系统

✔ 改善移液姿势，缓解疲劳

✔ 减少人体各部位的作用力 ● 选择易装载吸头的移液器，减少手腕的承受用力； ● 选择重量较轻的移液器，避免长时间移液手臂酸痛； ● 选择活塞作用力/退吸头力/量程调节操作力轻的移液器，减小拇指负担。

05移液设备的选择

单道移液器：快速简单的精确移液操作。
多道移液器：在与孔板配套使用时，可使重复性操作减少 8 倍或者 12 倍

电动移液器：诸如连续分液之类的高级功能，可实现半自动化操作

电动多道移液器：当使用具有连续分液模式的电动多道移液器时，可减少更多的重复性操作。

间距可调移液器：在孔板、管和其他容器之间传输多个样品时,通过减少至多 98% 的移液步骤加速工作流程。

外置活塞移液器：对于有机溶剂、黏性样品、高温样品等复杂样品，外置活塞移液器可保证移液精度。

06气体活塞式移液器操作重点

由于其原理是空气压强差完成移液的，需要掌握这些移液小窍门。
1）将移液器垂直于液面吸取液体在浸没过程中，尽量将移液器垂直于液面，最好是 90 度。吸液时移液器的倾斜角度越大，吸头中液体的流体静力压越低，吸液体积越大。

2）小体积空气柱可以减少误差通过选择小体积空气柱的移液器和吸头组合来减少误差。与1000 μL 移液器相比，使用 100 μL 移液器移取 100 μL 的体积会更准确。 3）正确的浸没深度在保证不会吸入空气的前提下，吸头应尽量浸没得浅一些。要吸取液体，吸头只应浸入液体数毫米。

4）预润湿使空气柱饱和为了提高准确度，在移液之前，应通过多次吸取和排出液体对移液吸头进行预湿。将吸头至少预湿三次，以平衡空气和液体。根据液体类型和体积，可能需要完成多次预润湿操作。 5）正确吸液和放液应缓慢、均匀地吸液。根据液体类型和体积，应等待 1 至 3 秒，让液体完全吸入吸头。放液时，吸头应紧贴容器壁，以便借助液体的粘附力将吸头完全排空。

07外置活塞式移液器操作重点

在外置活塞式移液系统中，活塞与吸头集成，直接与液体接触。相较于气体活塞式移液器，液体的流动特性以及和吸头表面的润湿特性不会影响移液精准度。因此，这种系统适合于处理具有难以处理的液体和应用。比如处理挥发性、高粘度或高密度的液体、热或冷液体以及危险液体等。另外，外置活塞式移液器由于没有空气柱，移液结果不受移液环境和操作技巧的影响，科研人员可不需任何技巧轻松的完成精准移液。