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【求助】求助植物组织石蜡切片的正确方法

花匠小妙招
2024-12-06 15:44

经验说的再多也未必对你都有效，还是多尝试改进看看吧

有个朋友是病理科的，曾跟他学过人体和动物组织切片技术。组织切片不完整，这是制作石蜡切片标本过程中经常遇到的问题，与很多因素有关。完全避免不完整切片也不可能，只能尽力做好每一个环节步骤。下面就几个较为重要的步骤说一说需要注意事项，希望对你的植物组织切片也有所帮助。
1）固定：固定液的用量通常为材料块的20倍左右，固定时间则根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定，可以从1小时至数天，通常为数小时~24小时。

2）脱水：为了减少组织材料的急剧收缩，应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行。
3）透明：通常组织先经纯酒精和透明剂各半的混合液浸渍1～2小时，再转入纯透明剂中浸渍。透明剂的浸渍时间则要根据植物组织材料块大小及属于囊腔抑或实质组织而定。如果透明时间过短，则透明不彻底，石蜡难于浸入组织；透明时间过长，则组织硬化变脆，就不易切出完整切片，最长为数小时。

4）浸蜡与包埋：用石蜡取代透明剂，使石蜡浸入组织而起支持作用。通常先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1～2小时，再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍3小时左右，浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右的温箱中进行，以利石蜡浸入组织内。

5）切片：切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切片质量，可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度。通常切片厚度为4～7微米，切出一片接一片的蜡带，用毛笔轻托轻放在纸上。
祝后面顺利。