一串红花发育、快繁体系建立及花色基因多态性研究
一串红花发育、快繁体系建立及花色基因多态性研究
【摘要】： 本研究主要是通过对不同花色一串红的花发育过程、组织培养快繁方法和Ss5MaT1基因进行了研究，首次观察一串红的花芽分化和胚胎学有关内容，探讨了影响一串红结实性的原因、最佳组织培养快繁体系，揭示了花色基因Ss5MaT1的多态性， 花发育研究结果表明，一串红的花芽分化是从第4个叶节开始，在第9个叶节时分化结束，花药壁的发育方式为双子叶型，成熟花粉粒为三细胞型，胚囊的发育方式为蓼型，表明一串红结实率低的原因不是由于雄、雌配子体的发育不良所造成。 八种花色的一串红的结实率、落花率及成熟胚珠败育率调查结果表明一串红的平均结实率为15.81%，平均落花率为23.13%，成熟胚珠败育率为84.13%。 一串红组织培养的最佳外植体为带腋芽的茎段，茎段的芽丛诱导的最佳培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+IBA 0.5mg/L，其分化率为71.4%，芽增殖率为140．6%；最佳生根培养基为1/4MS+NAA 0.5mg/L,生根率为91.6%，初步建立了快繁体系。 通过RT-PCR方法获得了八种一串红中Ss5MaT1基因的916bp的cDNA片段，根据获得的cDNA片段设计了4对引物，采用嵌套式PCR的方法，以RT-PCR的产物为模板进行扩增，对扩增产物进行SSCP分析，发现只有一对引物的扩增产物出现了差异带，而其它三对引物无差异带。 基因测序的结果表明：RT-PCR扩增获得的cDNA片段，同源性相当高，只在鲑鱼肉色花和玫瑰红色花两种花色中发现了一个点突变，即玫瑰红色花在744C T，鲑鱼肉色花中的678C T，玫瑰红色花中的点突变导致异亮氨酸（Ile）突变为苏氨酸（Thr），而鲑鱼肉色花中的点突变导致了缬氨酸（Val）突变成丙氨酸（Ala），而其它花色没有发现突变点。 基因克隆测序的结果与PCR-SSCP分析的结果一致，表明PCR-SSCP可以用于花色基因的突变点的检测。
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
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