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一种促进云锦杜鹃愈伤组织形成和生根的技术的制作方法

花匠小妙招
2024-12-12 17:25

本发明属于植物扦插繁殖技术领域，具体涉及一种促进云锦杜鹃愈伤组织形成的插穗愈伤处理方法和诱导生根技术。

背景技术：

扦插繁殖不仅可保持母本的优良性状、苗木大小均匀、开花结实早，且对设施条件要求简单、成本低、易推广，目前已被广泛应用于小叶落叶及半常绿类杜鹃（Azalea）的产业化育苗。受遗传因子制约，原产中高山山地的常绿杜鹃亚属（Rhododendron Subgenus Hymenanthes）杜鹃生根困难、成苗率低，在我国主要通过播种育苗。播种繁殖虽然繁殖系数大，但幼苗生长慢、开花周期长，且杜鹃种间自然杂交机率大，难于确保基因纯度。

云锦杜鹃(Rhododendron fortunei)隶属杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃花属(Rhododendron)常绿杜鹃亚属，原产中国长江流域海拔620-2000 m的山脊阳处或林下。为常绿灌木至小乔木，高3-12 m，叶片大、厚革质、深绿色，顶生总状伞形花序有花6-12朵，花粉红色、有香味，4-5月开放。该物种原名“天目杜鹃”，因其花序中的花朵数量多、花朵大，盛开时灿若云锦，故此后人将其更名为“云锦杜鹃”，为一种花、叶及株形具佳并具芳香的优良观赏植物，且生长快、花期长、栽培适应性较强，也是高山杜鹃新品种培育的重要亲本，具有巨大的商业化前景，但迄今鲜见扦插繁殖的报道。因此，有必要建立扦插育苗方法，为云锦杜鹃的产业化提供技术支撑。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是大叶常绿类杜鹃扦插生根困难、生根数量少、成活率低等问题。鉴于上述问题，本发明的目的是通过插穗愈伤技术的研发，促进插穗愈伤组织的形成，解决云锦杜鹃扦插难以生根的技术瓶颈，提供一种生根率高、苗木根系好，操作简便、实用、成本低，可规模化培育云锦杜鹃的扦插繁殖方法，以满足越来越大的市场需求。

本发明的技术方案为：一种促进云锦杜鹃愈伤组织形成和生根的技术，其步骤：(1)苗床铺设：苗床底层由下而上依次添加石块、鹅卵石及粗沙，粗沙上安装地热线，然后添加厚8-10 cm的泥炭、珍珠岩及蛭石混合基质，耙平轻压，浇透水；最后喷洒500倍多菌灵水溶液对基质及周边环境进行消毒；(2)插穗采集：选择树龄25-30年、生长旺盛的成年株作为采穗母株，秋季采集植株冠层带芽苞的顶枝，剪成长12-13 cm的插穗；(3)插穗制作：去除基部叶片，保留顶芽和顶部叶片3-4片，再剪去叶片大小2/3；然后对插穗基部进行双面愈伤处理（关键步骤）；(4)生根诱导：用150 mg·L-1的吲哚丁酸水溶液浸泡插穗，自然风干；(5)扦插与管理：插穗处理后立即扦插到步骤(1)所述的苗床中，株行距8×8 cm，扦插深度为插穗长度的2/3，喷透水；苗床上层搭建弧形塑料棚，棚内安装自动喷雾设施，棚外设置可移动的遮阳网；生根期间采用地热线进行苗床加温，自动间歇喷雾系统补水增湿，棚内气温控制在15.0-20.0℃、相对湿度85.0-95.0%；及时清除苗床落叶，并每隔14 d喷洒杀菌剂1次。

步骤(1)中所述的基质体积比为泥炭+珍珠岩+蛭石=3:1:1。

步骤(2)中所述的插穗采集为10月下旬采集当年生的半木质化至木质化过渡枝。

步骤(3)中所述的双面愈伤处理指用嫁接刀对插穗基部进行两侧对称愈伤，其中一侧愈伤口长而浅，长1.5-2.0 cm，仅达形成层；另一侧短而深，长0.5 cm，深达木质髓部。

步骤(4)中所述的生根诱导指插穗基部2.0-2.5 cm在吲哚丁酸水溶液中浸泡16 h。

步骤(5)中所述的苗床加温设置为20℃，自动间歇喷雾设置为：白天2 min/2 h、晚上2 min/4 h；遮阳设置为晴天遮阳75%、阴天遮阳50%、雨天不遮阳。

步骤(5) 中所述的杀菌剂为1000倍的甲基托布津与500倍的多菌灵水溶液交替使用。

本发明的优点在于：（1）前期研究发现云锦杜鹃为愈伤组织生根类型（皮部不生根）。为了提高插穗愈伤组织的形成率及愈伤组织面积，本发明研发出一种新的插穗处理技术：插穗基部两侧对称愈伤处理，一侧愈伤口长而浅、另一侧短而深。该愈伤方法可有效的促进插穗愈伤组织的产生，增加愈伤组织的形成率和愈伤组织面积，从而大幅度的提高生根率，特别是显著增加生根数量、提高扦插苗质量和移栽成活率。（2）前期研究发现基质的组成与理化性状是决定云锦杜鹃插穗愈伤组织形成和生根的关键因子。为了营造最佳的生根环境，本发明对基质组成和配比进行重新研发，发现泥炭+珍珠岩+蛭石=3:1:1体积比的基质可显著提高生根率、生根数量和根长。（3）前期研究发现外源激素可调节云锦杜鹃插穗生理活动、促进愈伤组织形成和根原基的启动。为了有效的调节插穗生理活动，本发明对IBA浓度及浸泡时间进行了优化，发现150 mg·L-1的IBA浸泡插穗基部16 h可显著提高愈伤组织形成率、减少插穗的腐烂，进而提高生根率与生根数量。（4）同时，本发明方法对生根环境的气候因子（光照、温度、湿度等）进行了优化。（5）本发明方法操作简单、技术易行、生根效果好，材料市场化高、来源广、易于获得，是云锦杜鹃规模化快速繁殖的有效方法。

附图说明

图1为本发明插穗双面愈伤处理示意图；

图2为采用本发明方法扦插云锦杜鹃，第180天生根情况。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

一种促进云锦杜鹃愈伤组织形成和生根的技术，包括以下步骤：

1. 苗床铺设：苗床设置于玻璃温室内，采用砖混结构。苗床底部每隔80 cm预留排水孔1个，底层由下而上依次添加石块、鹅卵石、粗沙，以增加苗床的排水和通气性；粗砂上面安装地热线，以增加地温；然后铺设厚8-10 cm的泥炭+珍珠岩+蛭石=3:1:1体积比混合物，耙平轻压、使苗床平整，浇透水；最后喷洒500倍多菌灵水溶液对基质及周边环境进行消毒。

2. 插穗采集：选择树龄25-30年、生长旺盛的成年株作为采穗母株，10月下旬采集当年生半木质化至木质化过渡枝，喷水保湿及时运回室内，选取枝条粗壮直立、无病虫害、无花苞（带芽苞）的小枝，剪成长12-13 cm的插穗。

3. 插穗制作：去除插穗基部叶片，保留顶芽和顶部叶片3-4片，再剪去叶片大小2/3，以减少水分蒸发；然后对插穗基部进行双面愈伤处理：用嫁接刀对插穗基部进行两侧对称愈伤，其中一侧愈伤口长而浅（长1.5-2.0 cm，仅达形成层），另一侧短而深（长0.5 cm，深达木质髓部），以诱导愈伤组织的形成、增加愈伤组织的面积，同时增加插穗对吲哚丁酸的吸收。

4. 生根诱导：用150 mg·L-1的IBA（吲哚丁酸）水溶液浸泡插穗基部（2.0-2.5 cm）16 h，自然风干。

5. 扦插与管理：插穗处理后立即扦插。扦插时先用小竹签引一小孔，以减轻基质对插穗组织的机械损伤；插穗间的株行距为8×8 cm，扦插深度为插穗长度的2/3，扦插后喷透水。为控制苗床的环境温、湿度与光照，苗床上层搭建弧形塑料棚，棚内安装自动喷雾设施，棚外设置可移动的遮阳网。生根期间采用地热线进行苗床加温，地温设置为20℃；自动间歇喷雾系统补水增湿：白天2 min/2 h，晚上2 min/4 h，1个月后逐渐减少喷水次数；棚内气温、光照强度根据天气情况，分别通过塑料棚两侧通风及遮阳网调节（棚内气温控制在15.0-20.0℃，相对湿度85.0-95.0%）；为减少污染，及时清除苗床落叶及腐烂插穗，并每隔14 d用500倍的多菌灵或1000倍的甲基托布津水溶液交替喷雾，以防治病害的发生。

采用该方法扦插繁殖云锦杜鹃，扦插6个月时统计发现其愈伤组织形成率达100.00%、生根率为73.67%、不定根数21.45条、最长不定根长6.33 cm、根幅4.87 cm。

实施例2

与实施例1相比，区别仅在于，“步骤1”所述的扦插基质为泥炭+珍珠岩=3:1体积比的混合物。

采用该方法扦插繁殖云锦杜鹃，扦插6个月时统计发现其愈伤组织形成率达98.33%、生根率为67.50%、不定根数23.19条、最长不定根长5.56 cm、根幅4.26 cm。

实施例3

与前期研究的育苗效果比较：前期采用6种基质、4个IBA浓度的两因素试验表明，24个处理组合中，“纯河沙基质+200 mg·L-1的IBA水溶液浸泡插穗基部（1.5-2.0 cm）16 h”组合的育苗效果最佳，其愈伤组织形成率为96.67%、生根率60.00%、不定根数20.31条、最长不定根长4.00 cm、冠幅3.18 cm。（见：“林业科学”，2015，51 (9)：165-172）

由此可见，相对于现有技术，本发明方法可提高云锦杜鹃扦插育苗的生根率，特别是显著改善根系质量。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其过程，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。