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现代微生物学常用微生物培养基的配制（下）

花匠小妙招
2024-12-12 17:26

31.尿素琼脂培养基

尿素20 g/L，NaCl 5 g/L，K₂HPO4 2 g/L，蛋白胨1 g/L，酚红0.012 g/L，琼脂15 g/L，pH 6.8~7.0。JSENB微生物培养原料一站供应。

配制方法：在100 ml蒸馏水或去离子水中，加入除琼脂外的上述所有成分，混合均匀后过滤除菌。将琼脂加入900 ml蒸馏水中加热煮沸，121℃灭菌15 min。冷却至50℃混匀，分装于灭菌的试管或平皿中。

32.RCM 培养基(强化梭菌培养基)(用于厌氧菌培养)

酵母膏3 g/L，牛肉膏10 g/L，蛋白胨10 g/L，可溶性淀粉l g/L，葡萄糖5 g/L，半胱氨酸盐酸盐0.5 g/L，NaCl 3 g/L，NaAc 3 g/L，刃天青3 mg/L，pH 8.5。121℃湿热灭菌30 min。

33.TYA 培养基(用于厌氧菌培养)

葡萄糖40 g/L，牛肉膏2 g/L，酵母膏2 g/L，胰蛋白胨6 g/L，NH4Ac 3 g/L，KH2PO4 0.5 g/L， MgSO4·7H2O 0.2 g/L，FeSO4·7H2O 0.01 g/L,水1000 ml， pH 6.5，121℃湿热灭菌30 min。

34.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)

玉米粉65 g，自来水1000 ml，混匀，煮10 min成糊状，pH自然，121℃灭菌30 min。

35.中性红培养基(用于厌氧菌培养)

葡萄糖40 g/L，胰蛋白胨6 g/L，酵母膏2 g/L，牛肉膏2 g/L，NH4Ac 3 g/L，KH2PO4 5 g/L，中性红0.2 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，FeSO4·7HO 0.01 g/L，水1000 ml，pH 6.2，121℃湿热灭菌30 min。

36.CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)

麦芽汁(6波美度)1000 ml，水1000 ml，CaCO3 10 g，明胶10 g，pH 6.8，121℃灭菌30 min。

37.BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)

A溶液：脱脂乳粉100 g，水500 ml，加入1.6%溴jiafen绿(B.C.G)乙醇溶液1 ml，80℃灭菌20 min。

B溶液：酵母膏10 g，水500 ml，琼脂20 g，pH 6.8，121℃灭菌20 min。

以无菌操作趁热将A、B溶液混合均匀后倒平板。

38.乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)

牛肉膏5 g/L，酵母膏5 g/L，蛋白胨10 g/L，葡萄糖10 g/L，乳糖5 g/L，NaCl 5 g/L，pH6.8。121℃湿热灭菌20 min。

39.乙醇发酵培养基(用于乙醇发酵)

蔗糖100 g/L，MgSO4·7H2O 5 g/L, NH4NO3 5 g/L，20%豆芽汁20 ml。KH2PO4 5 g/L，pH自然。

40.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)

优质蛋白胨0.4 g，NaCl 0.7 g，KCl 0.02 g，NaHCO3 0.01 g， CaCl2 0.02 g， KH2PO4 0.09 g，NaH2PO4 0.48 g，蒸馏水500 ml，无菌兔血清40 ml.

配制方法：除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调pH至7.2，121湿热灭菌20 min，冷却后加入无菌兔血清，制成8%血清溶液，然后分装试管(5~10 ml/管)，56℃水浴灭活1 h后备用。

41.加倍肉汤培养基(用于细菌转导)

牛肉膏6 g/L，蛋白胨20 g/L，NaCl 10 g/L，pH 7.4~7.6。

42.半固体素琼脂(用于细菌转导)

琼脂1 g，水100 ml，121℃湿热灭菌30 min。

43.豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)

豆饼100 g加水5~6 倍，煮出滤汁100 ml，汁内加入KH2PO4 0.1 g，MgSO4 0.05 g，(NH4)2SO4 0.05g，可溶性淀粉2 g，琼脂2~2.5 g，pH 6.0。

44.酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)

配制方法：

A液：称取Na2HPO4·7H2O 1.07 g，干酪素4 g，加适量蒸馏水，并加热溶解。

B液：称取KH2PO4 0.36g，加水溶解。

酪素水解液：1 g酪蛋白溶于碱性缓冲液中，加入1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶25 ml加水至100 ml，30℃水解1h。用于配制培养基时，其用量为1000 ml培养基中加入100 ml以上水解液。

A、B液混合后，加入酪素水解液0.3 ml，加琼脂20 g，最后用蒸馏水容至1000 ml。

45.细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型)

Na2HPO4·7H2O 1 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，葡萄糖5 g/L，NaCl 5 g/L，K2HPO4 1 g/L，pH 7.0。115℃湿热灭菌30 min。

46.YEPD 培养基(用于酵母原生质体融合)

酵母粉10 g/L，蛋白胨20 g/L，葡萄糖20 g/L，pH 6.0。115℃湿热灭菌20 min。

47.YEPD 高渗培养基(用于酵母原生质体融合)

用0.6 mol/L的NaCl配制YEPD培养基，3%琼脂。

48.YNB基本培养基(用于酵母原生质体融合)

葡萄糖10 g/L，(NH4)2SO4 1 g/L，K₂HPO4 0.125 g/L，KHPO4 0.875 g/L，KI 0.0001 g/L，MgSO4·7H2O 0.5 g/L，CaCl2·2H2O 0.1 g/L，NaC1 0.1 g/L，微量元素母液1 ml，维生素母液1 ml(母液均按常规配制)，pH 5.8~6.0。

49.YNB高渗基本培养基(用于原生质体融合)

用0.6 mol/L NaCl配制YNB基本培养基。

50.酚红半固体柱状培养基(用于检查氧与菌生长的关系)

蛋白胨1 g/L，葡萄糖10 g/L，玉米浆10 g/L，琼脂7 g/L，pH 7.2。

调好pH后，加入1.6%酚红溶液数滴至培养基为深红色，再分装于大试管中，期装量约为试管高度的1/2，115℃灭菌20min。细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸，使酚红从红色变成黄色，在不同部位生长的细菌，可使培养基的相应部位颜色改变。注意培养时间不要太长，否则酸扩散以至于不能正确判断结果。通过改变琼脂用量配制为固体或半固体培养基。

51.LB 培养基

胰蛋白胨（JS0688）1%(m/v)，酵母浸出粉（JS0685）0.5%(m/v)，NaCl 1%(m/V)。

分别称量胰蛋白胨（JS0688）10 g，酵母浸出粉（JS0685）5 g，NaCl （JS0060）10 g，置于1 L烧杯中。加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加5 mol/L NaOH(约0.2ml)调节pH至7.0。加去离子水将培养基定容至1 L，高温高压灭菌，4℃保存。

52.LB/Amp 培养基

配制好LB培养基后，每升中加入1ml 100 mg/ml的Ampicillin(使培养基中氨苄青霉素的终浓度为100 μg/ml)后均匀混合。4℃保存。JSENB微生物培养原料一站供应。

53.TB培养基

胰蛋白胨1.2%(m/V)，酵母浸出粉2.4%(m/V)，甘油0.4%(V/V)，KH₂PO4 17 mmol/L，K₂HPO4 72 mmol/L。

配制磷酸盐缓冲液(0.17 mol/L KH₂PO4，0.72 mo/L K₂HPO4)100 ml，灭菌备用。称取胰蛋白胨（JS0688）12 g，酵母浸出粉（JS0685）24 g，甘油4 ml置于1 L烧杯中。加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解后，高温高压灭菌。待溶液冷却至60℃以下时，加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液，混合均匀4℃保存。

54.TB/Apm 培养基

TB培养基配制好后，每升加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)。

55.SOB 培养基

胰蛋白胨（JS0688）2%(m/v)，酵母浸出粉（JS0685）0.5%(m/V)，NaC1 0.05%(m/V)，KC1 2.5 mmol/L，MgCl2 10 mmol/L。

1)配制250 mmol/L KCl溶液。在90 ml的去离子水中溶解1.86 g KC1后，定容至100 ml。

2)配制2 mol/L MgCl2溶液。在90 ml的去离子水中溶解19 g MgCl2后，定容至100 ml，灭菌。

3)称取胰蛋白胨（JS0688）20 g，酵母浸出粉（JS0685）5 g，NaC1 0.5g，置于1 L烧杯中，加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。量取10 ml 250 mmol/L KCl溶液，加入烧杯中。滴加5 mol/L NaOH溶液(约0.2 ml)，调节pH至7.0。加入去离子水将培养基定容至1 L。高温高压灭菌后，4℃保存。

4)使用前加入5 ml 灭菌的2 mol/L MgCl2溶液。

56.SOC培养基

胰蛋白胨（JS0688）2%(m/V)，酵母浸出粉（JS0685）0.5%(m/V)，NaCl （JS0060）0.05%(m/V)，KC1 2.5 mmol/L，MgCl2 10 mmol/L，葡萄糖20 mmol/L。

1)配制1 mol/L 葡萄糖溶液：将18 g葡萄糖溶于90 ml去离子水中，充分溶解后定容至100 ml，用0.22 μm滤膜过滤除菌。

2)向100 ml SOB培养基中加入除菌的1 mol/L葡萄糖溶液2 ml，均匀混合后于4℃保存。

57.2x YT培养基

胰蛋白胨（JS0688）1.6%(m/V)，酵母浸出粉（JS0685）1% (m/V)，NaC1 0.5%(m/V)。

称取胰蛋白胨（JS0688）16 g，酵母浸出粉（JS0685）10 g，NaCl （JS0060）5 g置于1 L烧杯中，加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加1 mol/L KOH，调节pH至7.0。用去离子水将培养基定容至1 L。高温高压后，4℃保存。

58.Φbxbroth培养基

胰蛋白胨（JS0688）2%(m/V)，酵母浸出粉（JS0685）0.5%(m/V)，MgSO4·7H2O 0.5%(m/V)，pH7.5。

59.NZCYM培养基

酵母浸出粉（JS0685）0.5%(m/V)，酪蛋白氨基酸0.1%(m/V)，NZ胺1%(m/V)，NaCl 0.5%(m/V)，MgSO4·7H2O 0.2%(m/V)。

60.NZYM 培养基

除不含Casamino Acid(酪蛋白氨基酸)外，其他成分与NZCYM培养基相同。

61.NZM 培养基

除不含酵母浸出粉（JS0685）外，其他成分与NZYM培养基相同。

62. LB/Amp/X-gal/IPTG平板培养基

胰蛋白胨 1%(m/V)，酵母浸出粉 0.5%(m/V),NaCl 1%(m/V)，氨卡青霉素0.1 mg/ml,IPTG 0.5%(m/V)，X-gal 0.04 mg/ml,琼脂1.5%(m/V)。

1)称取胰蛋白胨（JS0688）10 g，酵母浸出粉（JS0685）5 g，NaCl（JS0060） 10 g，置于1 L烧杯中。加去离子水约800 ml，充分搅拌溶解。滴加5 mol/L NaOH溶液(约0.2 ml)，调节pH至7.0。用去离子水将培养基定容至1 L后，加入15 g琼脂。高温高压灭菌。

2)冷却至60℃左右，加入1 ml氨苄青霉素(100 mg/ml)、1 ml IPTG(24 mg/ml)、2 ml X-gal (20 mg/ml)后均匀混合。

63.TB/Amp/X-gal/IPTG平板培养基

胰蛋白胨1.2%(m/V)，酵母浸出粉2.4%(m/V)，甘油0.4%(m/V)，KH₂PO4 17 mmol/L，K2HPO4 72 mmol/L，氨苄青霉素0.1 mg/ml，IPTG 0.024 mg/ml，X-gal 0.04 mg/ml，琼脂1.5%(m/V)。

1)配制磷酸盐缓冲液(0.17 mol/L KH₂PO4，0.72 mol/L K₂HPO4) 100 ml。

2)称取胰蛋白胨（JS0688）12 g，酵母浸出粉（JS0685）24 g，甘油4 ml，置于1 L烧杯中。加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。去离子水定容至1 L后，加入15 g琼脂。高温高压灭菌。

3)冷却至60℃左右加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液、1 ml氨苄青霉素(100 mg/ml)、1 ml IPTG(24 mg/ml)、2 ml X-gal(20 mg/ml)后均匀混合。