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半固体培养基的配制与使用说明

半固体培养基,如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~0.7%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。

固体培养基是在培养液中加了琼脂(琼脂,一种凝固剂,在44度以下都呈凝固状)。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。

半固体培养基是在培养液中加入少量的凝固剂(如0.2%~0.5%的琼脂)。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。

三种半固体培养基配方介绍

牛肉膏蛋白胨半固体琼脂

(用于培养细菌,肠道致病菌检验)

成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂3~5g,蒸馏水1000mL,pH7.4±0.2。

制法:将各成分溶解于蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,于20 -25℃条件下以1mol/LNaOH溶液用pH计校正pH 7.4±0.2,分装小试管中,分装至试管高度1/4左右为宜,于0.1MPa灭菌15~20min,直立凝固备用。 

醋/酸铅半固体培养基

(用于硫/化氢试验)

成分:pH7.4的牛肉膏蛋白胨半固体琼脂100mL,硫代硫酸钠0.25g,10%醋/酸铅水溶液lmL。

制法:将牛肉膏蛋白胨半固体琼脂培养基100mL加热溶化,待冷至60℃时加人硫代硫酸钠0.25g,调pH7.2,分装于三角瓶中,0.07MPa灭菌20min后,待冷至55~60°C,加入1mL无菌的10%醋/酸铅水溶液,混匀后,倒入灭菌试管中。

硫酸亚铁半固体培养基

(用于硫/化氢试验)

成分:牛肉膏3g、酵母浸膏3g、蛋白胨10g、硫酸亚铁0. 2g、硫代硫酸钠0.3g、氯化钠5g、琼脂12g,蒸馏水1000mL, pH7.4。

制法:将各成分加热溶解,校正pH,分装试管,0.07MPa高压灭菌20min,取出直立,待其凝固。

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