一种秋葵组合杂交方法与流程
本发明涉及蔬菜杂交育种技术领域，特别涉及一种秋葵组合杂交方法。
背景技术：
秋葵属异花授粉作物，具有明显的杂种优势。常规杂交育种，也称组合育种。通过人工杂交，把分散于不同亲本上的优良性状组合到杂种中，对其后代进行多代培育选择，获得基因型纯合或接近纯合的新品种。但我国的秋葵杂交育种技术不规范，存在若干不足之处：1)种质资源匮乏，遗传基础狭窄，真正适合华南气候和土质的优质品种较少；2)秋葵杂交方法还不完善，杂交操作存在缺点例如去除雄蕊时候由于选用工具不当或操作不规范伤及柱头，致使去雄失败降低了工作效率；3)去雄后没有对母本花朵与外界之间进行很好的隔离，导致外界因素对花柱造成伤害或者提前被其它花粉污染，导致杂种纯度和杂交成荚率降低。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是：提供一种秋葵组合杂交方法，保持杂交种的纯度和优良种性，为秋葵杂交种业的产业化提供技术支撑。
一种秋葵组合杂交方法，包括以下步骤：
(1)育种基地选择：选择东、西、南三面无遮蔽物，地基坚实、平坦，避风向阳，土壤疏松肥沃、无盐和其他污染，水质干净之地；
(2)浸种：用40～55℃的温水浸种让水温在空气自然下降，催芽温度25～28℃，露白节气后播种；
(3)土壤准备：对土壤进行深耕30～40cm，同时施入有机肥，清除硬物；
(4)播种：父本、母本分别选用红秋葵与黄秋葵组合进行栽培，苗具有2叶一心移植，行距50～80cm，株距80～100cm；
(5)父、母本田间配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本种在两行母本之间；
(6)去杂去劣：在苗期和开始杂交前，根据父、母本的典型性，严格拔除制种田内的杂株、劣株、变异株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔离：在去雄前一天，将母本植物上所有已经开放的花和已经结的果摘除，同时对未开放及将要开放的父、母本进行套袋，并在去雄的当天上午摘除当天母本所有新开放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼饱满，微露出黄色花冠或红色花冠的花苞为去雄对象，在天气晴朗的下午两点后进行去雄工作，用75％的酒精对双手和去雄工具镊子进行消毒，然后用手把花萼花瓣掰开并用尖头15cm或弯头15cm的镊子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸纸进行套袋；去雄要彻底，花柱上不残留农药，不得损伤子房和花柱，保持子房外白膜与苞叶的完整；
(9)授粉：在去雄步骤后的第二天上午8:30～9:30进行授粉，用毛刷轻轻沾同一品种的多朵花粉收集于硫酸纸袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱头上使其均匀分布在花柱上，授粉量充足均匀，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸纸袋，标记挂牌；
(10)去除无效花荚：授粉结束后，彻底去除母本株上的所有无效花荚，并在此后12天内每隔3天检查一次，严格去除新出的花荚；
(11)采摘：当秋葵荚全部变褐开裂，种子颜色较深时，进行采摘，采摘圆溜饱满果实，将采收的果实放在太阳下曝晒致果实自然开裂，用机械进行渣、种分离，把收集的秋葵种子份若干次在早上8～11点进行晒干至适合贮存含水率条件，之后进行密闭干燥后置于0℃冷藏。
为提高秋葵的产量、抗性等指标，使其含有较高的vc、多糖、蛋白质及花青素，可通过红秋葵与黄秋葵进行杂交，具体为：所述母本为红星红秋葵，父本为阳春黄秋葵或绿星黄秋葵；或者所述母本为绿星黄秋葵，父本为华宝红秋葵或红星红秋葵。
其中，步骤(9)授粉前进行花粉活力测定。
步骤(11)采摘前，对母本田逐棵逐荚进行拉网式检查，严格去除自交荚。
本发明所述的育种基地田间早、晚各浇一次水，半个月施一次肥。
本发明具有如下有益效果：
1)用合适长度的镊子去除雄蕊，不会伤及柱头，避免花蕾的粘液扯断细弱的花柱，提高去雄成功率和工作效率；
2)去雄前后对父、母本套上透光率好的硫酸纸袋进行父、母本隔离，可有效阻止非父本花粉落于母本柱头上，减少外界对花柱的伤害，提高杂种纯度和杂交成荚率，最大程度上保证花粉的活力，使受精充分，种子饱满度提高，提高了芽率；
3)采用混合花粉进行授粉提高了授粉效率，收集花粉时保留父本花朵，父本植株可收获嫩荚，增加经济效益；
4)种子含油量高，可以用于榨油，打造成一个新的营养健康的黄秋葵植物油，创造经济价值；
5)为杂交育种栽培和父、母本组合配对提供了一套包括母本植株的整理、母本去雄、人工授粉、果实管理和种子采收的杂交育种方法。
具体实施方式
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件(例如参考j.萨姆布鲁克等著，黄培堂等译的《分子克隆实验指南》，第三版，科学出版社)或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
一种秋葵组合杂交方法，包括以下步骤：
(1)育种基地选择：选择东、西、南三面无遮蔽物，地基坚实、平坦，避风向阳，土壤疏松肥沃、无盐和其他污染，水质干净之地；
(2)浸种：用40～55℃的温水浸种让水温在空气自然下降，催芽温度25～28℃，露白节气后播种；
(3)土壤准备：对土壤进行深耕30～40cm，同时施入有机肥，清除硬物；
(4)播种：父本选用阳春黄秋葵，母本选用红星红秋葵组合进行栽培，苗具有2叶一心移植，行距50cm，株距80cm；
(5)父、母本田间配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本种在两行母本之间；
(6)去杂去劣：在苗期和开始杂交前，根据父、母本的典型性，严格拔除制种田内的杂株、劣株、变异株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔离：在去雄前一天，将母本植物上所有已经开放的花和已经结的果摘除，同时对未开放及将要开放的父、母本进行套袋，并在去雄的当天上午摘除当天母本所有新开放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼饱满，微露出黄色花冠或红色花冠的花苞为去雄对象，在天气晴朗的下午两点后进行去雄工作，用75％的酒精对双手和去雄工具镊子进行消毒，然后用手把花萼花瓣掰开并用尖头15cm或弯头15cm的镊子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸纸进行套袋；去雄要彻底，花柱上不残留农药，不得损伤子房和花柱，保持子房外白膜与苞叶的完整；
(9)授粉：在去雄步骤后的第二天上午8:30～9:30进行授粉，先进行花粉活力测定，测定及格后，用毛刷轻轻沾同一品种的多朵花粉收集于硫酸纸袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱头上使其均匀分布在花柱上，授粉量充足均匀，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸纸袋，标记挂牌；
(10)去除无效花荚：授粉结束后，彻底去除母本株上的所有无效花荚，并在此后12天内每隔3天检查一次，严格去除新出的花荚；
(11)采摘：当秋葵荚全部变褐开裂，种子颜色较深时，进行采摘，采摘前对母本田逐棵逐荚进行拉网式检查，严格去除自交荚，采摘圆溜饱满果实，将采收的果实放在太阳下曝晒致果实自然开裂，用机械进行渣、种分离，把收集的秋葵种子份若干次在早上8～11点进行晒干至适合贮存含水率条件，之后进行密闭干燥后置于0℃冷藏。
育种基地田间早、晚各浇一次水，半个月施一次肥。
实施例2
一种秋葵组合杂交方法，包括以下步骤：
(1)育种基地选择：选择东、西、南三面无遮蔽物，地基坚实、平坦，避风向阳，土壤疏松肥沃、无盐和其他污染，水质干净之地；
(2)浸种：用40～55℃的温水浸种让水温在空气自然下降，催芽温度25～28℃，露白节气后播种；
(3)土壤准备：对土壤进行深耕30～40cm，同时施入有机肥，清除硬物；
(4)播种：父本选用绿星黄秋葵，母本选用红星红秋葵组合进行栽培，苗具有2叶一心移植，行距55cm，株距80cm；
(5)父、母本田间配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本种在两行母本之间；
(6)去杂去劣：在苗期和开始杂交前，根据父、母本的典型性，严格拔除制种田内的杂株、劣株、变异株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔离：在去雄前一天，将母本植物上所有已经开放的花和已经结的果摘除，同时对未开放及将要开放的父、母本进行套袋，并在去雄的当天上午摘除当天母本所有新开放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼饱满，微露出黄色花冠或红色花冠的花苞为去雄对象，在天气晴朗的下午两点后进行去雄工作，用75％的酒精对双手和去雄工具镊子进行消毒，然后用手把花萼花瓣掰开并用尖头15cm或弯头15cm的镊子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸纸进行套袋；去雄要彻底，花柱上不残留农药，不得损伤子房和花柱，保持子房外白膜与苞叶的完整；
(9)授粉：在去雄步骤后的第二天上午8:30～9:30进行授粉，先进行花粉活力测定，测定及格后，用毛刷轻轻沾同一品种的多朵花粉收集于硫酸纸袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱头上使其均匀分布在花柱上，授粉量充足均匀，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸纸袋，标记挂牌；
(10)去除无效花荚：授粉结束后，彻底去除母本株上的所有无效花荚，并在此后12天内每隔3天检查一次，严格去除新出的花荚；
(11)采摘：当秋葵荚全部变褐开裂，种子颜色较深时，进行采摘，采摘前对母本田逐棵逐荚进行拉网式检查，严格去除自交荚，采摘圆溜饱满果实，将采收的果实放在太阳下曝晒致果实自然开裂，用机械进行渣、种分离，把收集的秋葵种子份若干次在早上8～11点进行晒干至适合贮存含水率条件，之后进行密闭干燥后置于0℃冷藏。
育种基地田间早、晚各浇一次水，半个月施一次肥。
实施例3
一种秋葵组合杂交方法，包括以下步骤：
(1)育种基地选择：选择东、西、南三面无遮蔽物，地基坚实、平坦，避风向阳，土壤疏松肥沃、无盐和其他污染，水质干净之地；
(2)浸种：用40～55℃的温水浸种让水温在空气自然下降，催芽温度25～28℃，露白节气后播种；
(3)土壤准备：对土壤进行深耕30～40cm，同时施入有机肥，清除硬物；
(4)播种：父本选用华宝红秋葵，母本选用绿星黄秋葵组合进行栽培，苗具有2叶一心移植，行距60cm，株距90cm；
(5)父、母本田间配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本种在两行母本之间；
(6)去杂去劣：在苗期和开始杂交前，根据父、母本的典型性，严格拔除制种田内的杂株、劣株、变异株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔离：在去雄前一天，将母本植物上所有已经开放的花和已经结的果摘除，同时对未开放及将要开放的父、母本进行套袋，并在去雄的当天上午摘除当天母本所有新开放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼饱满，微露出黄色花冠或红色花冠的花苞为去雄对象，在天气晴朗的下午两点后进行去雄工作，用75％的酒精对双手和去雄工具镊子进行消毒，然后用手把花萼花瓣掰开并用尖头15cm或弯头15cm的镊子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸纸进行套袋；去雄要彻底，花柱上不残留农药，不得损伤子房和花柱，保持子房外白膜与苞叶的完整；
(9)授粉：在去雄步骤后的第二天上午8:30～9:30进行授粉，先进行花粉活力测定，测定及格后，用毛刷轻轻沾同一品种的多朵花粉收集于硫酸纸袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱头上使其均匀分布在花柱上，授粉量充足均匀，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸纸袋，标记挂牌；
(10)去除无效花荚：授粉结束后，彻底去除母本株上的所有无效花荚，并在此后12天内每隔3天检查一次，严格去除新出的花荚；
(11)采摘：当秋葵荚全部变褐开裂，种子颜色较深时，进行采摘，采摘前对母本田逐棵逐荚进行拉网式检查，严格去除自交荚，采摘圆溜饱满果实，将采收的果实放在太阳下曝晒致果实自然开裂，用机械进行渣、种分离，把收集的秋葵种子份若干次在早上8～11点进行晒干至适合贮存含水率条件，之后进行密闭干燥后置于0℃冷藏。
育种基地田间早、晚各浇一次水，半个月施一次肥。
实施例4
一种秋葵组合杂交方法，包括以下步骤：
(1)育种基地选择：选择东、西、南三面无遮蔽物，地基坚实、平坦，避风向阳，土壤疏松肥沃、无盐和其他污染，水质干净之地；
(2)浸种：用40～55℃的温水浸种让水温在空气自然下降，催芽温度25～28℃，露白节气后播种；
(3)土壤准备：对土壤进行深耕30～40cm，同时施入有机肥，清除硬物；
(4)播种：父本选用红星红秋葵，母本选用绿星黄秋葵组合进行栽培，苗具有2叶一心移植，行距70cm，株距100cm；
(5)父、母本田间配置：父、母本比例按1:2配置，一行父本种在两行母本之间；
(6)去杂去劣：在苗期和开始杂交前，根据父、母本的典型性，严格拔除制种田内的杂株、劣株、变异株和病株；
(7)母本植株整理以及父、母本隔离：在去雄前一天，将母本植物上所有已经开放的花和已经结的果摘除，同时对未开放及将要开放的父、母本进行套袋，并在去雄的当天上午摘除当天母本所有新开放的花；
(8)去除雄蕊：以母本植株上花萼饱满，微露出黄色花冠或红色花冠的花苞为去雄对象，在天气晴朗的下午两点后进行去雄工作，用75％的酒精对双手和去雄工具镊子进行消毒，然后用手把花萼花瓣掰开并用尖头15cm或弯头15cm的镊子把雄蕊去除，去雄后用透光的硫酸纸进行套袋；去雄要彻底，花柱上不残留农药，不得损伤子房和花柱，保持子房外白膜与苞叶的完整；
(9)授粉：在去雄步骤后的第二天上午8:30～9:30进行授粉，先进行花粉活力测定，测定及格后，用毛刷轻轻沾同一品种的多朵花粉收集于硫酸纸袋中，并用同一支毛刷沾花粉于已去雄的柱头上使其均匀分布在花柱上，授粉量充足均匀，避免漏授粉，之后再套上透光的硫酸纸袋，标记挂牌；
(10)去除无效花荚：授粉结束后，彻底去除母本株上的所有无效花荚，并在此后12天内每隔3天检查一次，严格去除新出的花荚；
(11)采摘：当秋葵荚全部变褐开裂，种子颜色较深时，进行采摘，采摘前对母本田逐棵逐荚进行拉网式检查，严格去除自交荚，采摘圆溜饱满果实，将采收的果实放在太阳下曝晒致果实自然开裂，用机械进行渣、种分离，把收集的秋葵种子份若干次在早上8～11点进行晒干至适合贮存含水率条件，之后进行密闭干燥后置于0℃冷藏。
育种基地田间早、晚各浇一次水，半个月施一次肥。
以上对本发明的较佳实施方式进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
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