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转GmMAPKKK基因大豆花叶病毒抗性研究

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1 文献综述

1.1 大豆花叶病毒研究进展

1.1.1 病毒属性

1.1.2 分布与传播

1.1.3 发病症状与危害

1.1.4 防治措施

1.2 大豆基因工程技术研究进展

1.2.1 在抗病育种上的应用

1.2.2 在抗病育种上的优势

1.3 MAPK级联途径研究进展

1.3.1 MAPK级联途径反应机制

1.3.2 MAPK级联途径基本成员

1.3.3 MAPK级联途径生物学功能

1.4 本研究的目的与意义

2 转GmMAPKKK基因植株的鉴定

2.1 实验材料

2.1.1 供试植株

2.1.2 实验试剂

2.2 实验方法

2.2.1 草丁膦涂抹检测法

2.2.2 Bar试纸条检测法

2.2.3 PCR检测法

2.3 结果与分析

2.3.1 草丁膦检测法鉴定T2代转GmMAPKKK基因植株结果

2.3.2 bar试纸条检测法鉴定T2代转GmMAPKKK基因植株结果

2.3.3 PCR检测法鉴定T2代转GmMAPKKK基因植株结果

2.4 讨论

2.4.1 转基因植株筛选标记比较

2.4.2 转基因植株鉴定方法比较

3 转GmMAPKKK植株基因分析

3.1 实验材料

3.1.1 供试植株

3.1.2 实验试剂

3.2 实验方法

3.2.1 GmMAPKKK基因系统进化树和同源性比对

3.2.2 T2代转基因植株GmMAPKKK基因表达量测定

3.2.3 T2代转GmMAPKKK基因植株MAPK激酶活性测定

3.3 结果与分析

3.3.1 GmMAPKKK基因系统进化树和同源性比对结果

3.3.2 T2代不同独立转基因GmMAPKKK株系基因表达量分析

3.3.3 MAPK激酶活性测定结果

3.4 讨论

3.4.1 不同株系间超表达GmMAPKKK基因情况分析

3.4.2 超表达GmMAPKKK与MAPK激酶活性分析

4 GmMAPKKK基因功能研究

4.1 实验材料

4.1.1 供试植株

4.1.2 实验试剂

4.2 实验方法

4.2.1 T2代转GmMAPKKK基因植株大豆花叶病毒接种和抗性测定

4.2.2 SMV接种后转基因植株GmMAPKKK基因相对表达量检测

4.2.3 SMV接种后转基因植株防御基因相对表达量检测

4.2.4 SMV接种后转基因植株ROS相关基因表达量分析及生理测定

4.3 结果与分析

4.3.1 SMV接种后感病情况及DAS-ELISA检测结果

4.3.2 SMV接种后转基因植株GmMAPKKK基因半定量及荧光定量结果

4.3.3 SMV接种后转基因植株防御基因半定量及荧光定量结果

4.3.4 SMV接种后转基因植株ROS测定结果

4.4 讨论

4.4.1 超表达GmMAPKKK与SMV抗性分析

4.4.2 超表达GmMAPKKK与防御基因表达分析

4.4.3 超表达GmMAPKKK与ROS系统互作分析

5 结论与展望

参考文献

相关知识

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所属分类:花卉
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