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玉露组织培养基及其制备方法与流程

花匠小妙招
2024-12-24 03:14

本发明属于植物组织培养技术领域，尤其是一种玉露组织培养基及其制备方法。

背景技术：

玉露为阿福花科十二卷属多肉植物中的软叶系品种，植株小巧玲珑，株型紧凑，层次分明，叶片肥厚饱满，叶色晶莹剔透，叶“窗”透明且有绿色纹理，抗逆性强，具有一定的空气净化功能，迎合了现代人们崇尚健康和追求美的理念,具有很高的观赏价值和经济价值。

多肉植物育性差,大多采用播种、叶插和分株等繁殖方法,但是这些传统的繁育手段均存在繁殖系数较低且繁殖周期长的问题,难以满足生产需要,因此市场上名品价格居高不下。与传统的分株繁殖方式相比,利用组织培养技术对玉露进行快速繁殖,能够大大提高繁殖系数和速度,且不受季节和气候等外界环境因素的影响,全年均可进行繁殖。因此,通过组织培养对多肉植物进行产业化生产具有较好的经济效益和市场前景。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服上述现有技术中存在的问题，提供一种玉露组织培养基及其制备方法，使用该培养基和玉露外植体叶片进行组织培养，可大大地增加繁殖系数，解决自然条件下玉露繁殖率低、生产周期长的问题。

本发明的技术方案是这样实现的：一种玉露组织培养基，它包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，其特征在于：

所述诱导培养基包括以下组分:ms基础培养基4736mg/l、柠檬酸25～35mg/l、6-苄氨基嘌呤2～4mg/l、萘乙酸0.05～0.15mg/l、6-糠氨基嘌呤0.5～1.5mg/l、糖29000～32000mg/l、卡拉胶7000～9000mg/l；

所述增殖培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸25～35mg/l、糖29000～32000mg/l、卡拉胶7000～9000mg/l；

所述壮苗培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸25～35mg/l、土豆泥16000～20000mg/l、苹果泥16000～20000mg/l、香蕉泥16000～20000mg/l、糖19000～22000mg/l、卡拉胶7000～9000mg/l；

所述生根培养基包括以下组分:1/2ms培养基粉剂2471mg/l、柠檬酸25～35mg/l、土豆泥16000～20000mg/l、苹果泥16000～20000mg/l、香蕉泥16000～20000mg/l、吲哚丁酸0.2-0.4mg/l、活性炭400～700mg/l、糖19000～22000mg/l、卡拉胶7000～9000mg/l。

本发明在上述玉露组织培养基配方的基础上，还提供了一种玉露组织培养基的制备方法，它包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的制备方法，其特征在于：

所述诱导培养基的制备方法，按配方比例称取ms培养基粉剂、柠檬酸、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；再按配方比例加入、6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、6-糠氨基嘌呤；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在20个小三角瓶中，用封口膜封紧瓶口，在高温121～126℃，高压0.1～0.14兆帕，灭菌15～20分钟，取出趁热摇匀冷却制得诱导培养基；

所述增殖培养基的制备方法，按配方比例称取1/2ms培养基粉剂、柠檬酸、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在12个组织培养瓶中，用胶塞塞紧瓶口，再用封口膜封紧瓶口，在高温121～126℃，高压0.1～0.14兆帕，灭菌15～20分钟，取出趁热摇匀冷却制得增殖培养基；

所述壮苗培养基的制备方法，按配方比例称取1/2ms培养基粉剂、柠檬酸、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；再按配方比例加入土豆泥、苹果泥、香蕉泥搅拌均匀；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在12个组织培养瓶中，用胶塞塞紧瓶口，再用封口膜封紧瓶口，在高温121～126℃，高压0.1～0.14兆帕，灭菌15～20分钟，取出趁热摇匀冷却制得壮苗培养基；

所述生根培养基的制备方法，按配方比例称取1/2ms培养基粉剂、柠檬酸、活性炭、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；再按配方加入土豆泥、苹果泥、香蕉泥、吲哚丁酸搅拌均匀；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在12个组织培养瓶中，用胶塞塞紧瓶口，再用封口膜封紧瓶口，在高温121～126℃，高压0.1～0.14兆帕，灭菌15～20分钟，取出趁热摇匀冷却制得生根培养基。

所述的土豆泥是将土豆洗净去皮煮熟，使用捣碎钵或者组织捣碎机捣碎得土豆泥。

所述的苹果泥是将苹果去皮去核，使用捣碎钵或者组织捣碎机捣碎得到苹果泥。

所述的香蕉泥是将香蕉去皮，使用捣碎钵或者组织捣碎机捣碎得到香蕉泥。

本发明和现有技术相比的优点为：

（1）本发明的培养基包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，利用外植体直接接种到诱导培养基中进行丛生芽的诱导，将丛生芽切下接种到增殖培养基中进行继代增殖培养，然后再移植到到壮苗培养基上培育壮苗，最后移植到生根培养基上继续培养促进根系生长培育出符合移栽标准的组培瓶苗。在不同的培养阶段使用不同配方的培养基，适应组织培养不同阶段的营养需求的特点，直接从丛生芽长出小苗，简化了培养步骤，降低了生产成本。

（2）本发明的壮苗培养基和生根培养基中添加的有机物土豆泥、苹果泥和香蕉泥，可促使长出的小苗整齐、健壮。

（3）应用本发明的培养基进行玉露组织培养，成活率为94～98%，污染率为2～3%，繁殖系数为8～10倍。

（4）本发明用于玉露组培具有激素用量少、繁殖快、数量大、出苗齐、品种纯、成本低、适应性广等优点，可提高市场竞争力，促进玉露产业发展。优化后的玉露组织培养条件，适用于玉露大规模工厂化生产。

具体实施方式

为使本发明的技术方案更加清楚，下面通过具体实施例对本发明实施方式作进一步地详细描述。

实施例1：一种玉露组织培养基，它包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，其特征在于：

所述诱导培养基包括以下组分:ms基础培养基4736mg/l、柠檬酸30mg/l、6-苄氨基嘌呤3mg/l、萘乙酸0.1mg/l、6-糠氨基嘌呤1mg/l、糖30500mg/l、卡拉胶8000mg/l；

所述增殖培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸30mg/l、糖30500mg/l、卡拉胶8000mg/l；

所述壮苗培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸30mg/l、土豆泥18000mg/l、苹果泥18000mg/l、香蕉泥18000mg/l、糖20500mg/l、卡拉胶8000mg/l；

所述生根培养基包括以下组分:1/2ms培养基粉剂2471mg/l、柠檬酸30mg/l、土豆泥18000mg/l、苹果泥18000mg/l、香蕉泥18000mg/l、吲哚丁酸0.3mg/l、活性炭550mg/l、糖20500mg/l、卡拉胶8000mg/l。

实施例2：一种玉露组织培养基，它包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，其特征在于：

所述诱导培养基包括以下组分:ms基础培养基4736mg/l、柠檬酸25mg/l、6-苄氨基嘌呤4mg/l、萘乙酸0.05mg/l、6-糠氨基嘌呤1.5mg/l、糖29000mg/l、卡拉胶9000mg/l；

所述增殖培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸25mg/l、糖32000mg/l、卡拉胶7000mg/l；

所述壮苗培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸35mg/l、土豆泥16000mg/l、苹果泥20000mg/l、香蕉泥16000mg/l、糖19000mg/l、卡拉胶9000mg/l；

所述生根培养基包括以下组分:1/2ms培养基粉剂2471mg/l、柠檬酸35mg/l、土豆泥20000mg/l、苹果泥16000mg/l、香蕉泥20000mg/l、吲哚丁酸0.2mg/l、活性炭700mg/l、糖19000mg/l、卡拉胶9000mg/l。

实施例3：一种玉露组织培养基，它包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，其特征在于：

所述诱导培养基包括以下组分:ms基础培养基4736mg/l、柠檬酸35mg/l、6-苄氨基嘌呤2mg/l、萘乙酸0.15mg/l、6-糠氨基嘌呤0.5mg/l、糖32000mg/l、卡拉胶7000mg/l；

所述增殖培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸35mg/l、糖29000mg/l、卡拉胶9000mg/l；

所述壮苗培养基包括以下组分:1/2ms基础培养基2471mg/l、柠檬酸25mg/l、土豆泥20000mg/l、苹果泥16000mg/l、香蕉泥20000mg/l、糖22000mg/l、卡拉胶7000mg/l；

所述生根培养基包括以下组分:1/2ms培养基粉剂2471mg/l、柠檬酸25mg/l、土豆泥16000mg/l、苹果泥20000mg/l、香蕉泥16000mg/l、吲哚丁酸0.4mg/l、活性炭400mg/l、糖22000mg/l、卡拉胶7000mg/l。

实施例4：一种玉露组织培养基的制备方法，采用实施例1的配方比例，分别按如下步骤和方法制备诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基；

所述诱导培养基的制备方法，按配方比例称取ms培养基粉剂、柠檬酸、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；再按配方比例加入、6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、6-糠氨基嘌呤；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在20个小三角瓶中，用封口膜封紧瓶口，在高温124℃，高压0.12兆帕，灭菌18分钟，取出趁热摇匀冷却制得诱导培养基；

所述增殖培养基的制备方法，按配方比例称取1/2ms培养基粉剂、柠檬酸、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在12个组织培养瓶中，用胶塞塞紧瓶口，再用封口膜封紧瓶口，在高温124℃，高压0.12兆帕，灭菌18分钟，取出趁热摇匀冷却制得增殖培养基；

所述壮苗培养基的制备方法，按配方比例称取1/2ms培养基粉剂、柠檬酸、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；再按配方比例加入土豆泥、苹果泥、香蕉泥搅拌均匀；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在12个组织培养瓶中，用胶塞塞紧瓶口，再用封口膜封紧瓶口，在高温121～126℃，高压0.12兆帕，灭菌18分钟，取出趁热摇匀冷却制得壮苗培养基；

所述生根培养基的制备方法，按配方比例称取1/2ms培养基粉剂、柠檬酸、活性炭、糖、卡拉胶于容器中，加蒸馏水，加热溶解；再按配方加入土豆泥、苹果泥、香蕉泥、吲哚丁酸搅拌均匀；加蒸馏水定容至1l；然后调ph值6；最后分装在12个组织培养瓶中，用胶塞塞紧瓶口，再用封口膜封紧瓶口，在高温124℃，高压0.12兆帕，灭菌18分钟，取出趁热摇匀冷却制得生根培养基。