本发明专利技术提供一种百香果茎切面愈伤组织诱导分化成苗方法,以成熟植株百香果茎为外植体,建立无菌体系、经过诱导培养和继代培养。此方法体系克服百香果其根状茎发达,节上生根,根茎多具浓密根毛,木质茎含有较丰富的内生菌,对杀菌剂反应敏感,容易变色,无菌体系建立困难等问题,解决了百香果愈伤组织不易分化成芽、阻碍了快速繁殖这道技术的瓶颈。
【技术实现步骤摘要】
一种百香果茎切面愈伤组织诱导分化成苗方法
本专利技术属于植物栽培领域,具体涉及一种百香果茎切面愈伤组织诱导分化成苗方法。
技术介绍
百香果:西番莲科Passionfruit又称西番莲、巴西果、鸡蛋果。百香果富含人体所需的氨基酸、多种维生素、类胡萝卜素、超氧化物岐化酶(SOD)、硒以及各种微量元素。百香果被称为水果中的VC之王。常食用百香果具有提神醒脑、养颜美容、生津止渴、帮助消化、化痰止咳、缓解便秘、活血强身、提高人体免疫功效。目前百香果种苗质量参差不齐、苗木带病(主要病毒病)、品种不纯正等问题,制约了百香果产业进一步发展壮大。为确保品种纯正、质量优良的无病种苗供应,建立标准化的百香果现代生物技术繁育中心作为百香果产业发展的重点工作。研究表明利用愈伤组织诱导分化成苗是获得无病毒植株有效方法。百香果其根状茎发达,节上生根,根茎多具浓密根毛。木质茎含有较丰富的内生菌,对杀菌剂反应敏感,容易变色。愈伤组织不易分化成芽成为百香果克隆技术的一道瓶颈,组织培养没有较权威的成熟技术可以参考,现未查到有关无芽茎切面分化成苗百香果组织培养的报道。本专利技术以成熟植株百香果无芽茎切面为外植体分化成无病种苗,从而更好地发展壮大百香果产业。目前,国内围绕百香果开展的科学研究主要涉及栽培技术、食品加工、化学成分、生理活性等方面,经检索,代表着本行业的生物技术发展水平和方向的百香果专利文献量仍较少,且对百香果无芽茎切面愈伤组织诱导分化成苗技术的分析研究尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种百香果茎切...
【技术保护点】
1.一种百香果茎切面愈伤组织诱导分化成苗方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:/n(1)外植体采集与消毒;以成熟植株百香果茎为外植体,选择生长旺盛无病植株的新枝条,经自来水表面冲洗后,放在 1wt.% 次氯酸钠溶液浸泡 15 min,用自来水冲洗干净,放人体积分数75%酒精中灭菌 10 秒,再以0.1wt.%升汞灭菌5 ~ 6min,用无菌水冲洗 4 ~5 次;/n(2)诱导培养;在无菌条件下将消毒过的枝条切成1.2 ~1.3cm的茎段直立插到诱导培养基中,每天连续光照8 h ,光照强度1000 ~1500 lx,培养温度21 ~27 ℃,培养130天;/n(3)继代培养;诱导培养基上形成的小苗在无菌条件下切成带芽的茎段移接到生长培养基中,每天连续光照 12 h ,光照强度2 000 ~ 2500 lx,培养温度25±1 ℃,培养80天;/n(4)瓶苗移植;继代培养的种苗生长到13cm,形成完整的根、茎、叶,用自来水把基部培养基冲洗干净,移植到土壤疏松基质中,浇透水盖上塑料膜保湿,在23-28℃条件下培养10天揭膜,苗圃阶段防止强光照,继续培养30-35天后待叶片长至6-7片,定植到...
【技术特征摘要】
1.一种百香果茎切面愈伤组织诱导分化成苗方法,其特征在于:所述方法包括以下步骤:
(1)外植体采集与消毒;以成熟植株百香果茎为外植体,选择生长旺盛无病植株的新枝条,经自来水表面冲洗后,放在1wt.%次氯酸钠溶液浸泡15min,用自来水冲洗干净,放人体积分数75%酒精中灭菌10秒,再以0.1wt.%升汞灭菌5~6min,用无菌水冲洗4~5次;
(2)诱导培养;在无菌条件下将消毒过的枝条切成1.2~1.3cm的茎段直立插到诱导培养基中,每天连续光照8h,光照强度1000~1500lx,培养温度21~27℃,培养130天;
(3)继代培养;诱导培养基上形成的小苗在无菌条件下切成带芽的茎段移接到生长培养基中,每天连续光照12h,光照强度2000~2500lx,培养温度25±1℃,培养80天;
(4)瓶苗移植;继代培养的种苗生长到13cm,形成完整的根、茎、叶,用自来水把基部培养基冲洗干净,移植到土壤疏松基质中...
【专利技术属性】
技术研发人员:林成辉,艾洪木,钟海洋,
申请(专利权)人:福建得心生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:福建;35
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