相信各位经常接触荧光染料的专家们对于Cy系列的染料一定不陌生,经常有小伙伴咨询我们:您家有Cy3和Cy5染料吗?Cy7了?但许多品牌都只有Cy系列中的一种或者几种,经常没办法满足客户的需求,本期我们就给大家带来了全套的Cy系列染料,你想要的Cy我全都有,满满的安全感。
Cy是花青(Cyanine)的缩写,“花青”(Cyanine)这个名词是来自于聚次甲基组合成染料家族中的,它是一个非系统名称,cyanine一词源自英语单词“ cyan”,通常表示蓝绿色。 花青染料的摩尔消光系数(约150,000至300,000 M-1cm-1)非常大,结合适度的量子产率,使它可以产生极其明亮的荧光信号。
例如,吸光度和荧光波长可通过选择聚次甲基桥长来控制:更长的花青素具有较高的吸光度和发射波长,直至近红外区域。
虽然许多花青类染料已用于生命科学应用中,例如一系列噻唑和恶唑染料已被用作结合DNA和蛋白质的染料(如TOTO,YOYO,Stains All等)。但最受欢迎的花青染料是在1990年代初期,通过卡内基·梅隆大学的艾伦·瓦格纳(Alan Wagoner)及其同事才应用到生命科学研究中的。花青染料是自1970年代以来用于血管造影的花青染料吲哚菁绿(ICG)的变体。
花青染料有两种:非磺化花青和磺化花青。对于绝大多数应用,它们是可互换的,因为它们的光谱特性几乎完全相同。磺化和非磺化染料均可用于标记生物分子,例如DNA和蛋白质。他们之间的主要区别在于它们的溶解度:磺化染料是水溶性的,它们在水性环境中不需要使用有机助溶剂即可进行标记。
1. 非磺化花青染料
可用的非磺化染料包括Cy3,Cy3.5,Cy5,Cy5.5,Cy7和Cy7.5。CY ®代表“Cyanine”,第一位数字标识假吲哚基团之间的碳原子数。Cy2是恶唑衍生物而不是吲哚洛宁,是该规则的例外。添加后缀“.5”表示苯并融合的花青。结构的变化使得染料的荧光性质发生变化,花青系列的荧光基团可覆盖可见光和近红外光谱的最重要部分。
大多数非磺化花青的衍生物(酰肼和胺的盐酸盐除外)的水溶性都很低,当这些分子用于生物分子标记时,为了能够有效的发生反应,必须使用有机助溶剂(DMF或DMSO的5-20%)。首先将花青染料溶解在有机溶剂中,然后在适当的极性缓冲液中稀释再使用。
非磺化花青的荧光性质对溶剂和周围环境的依赖性很小,非磺化花青染料的吸光度和荧光光谱绘制如下:
2. 磺化花青染料
磺化花青包括磺酸基,能有效增加其在水中的溶解度,带电的磺酸根基团减少了染料分子和重标记物间的聚集。
当前可用的磺化花青包括磺基-Cy3,磺基-Cy5和磺基-Cy7。
磺化花青高度水溶性,用这些试剂进行标记不需要有机溶剂祝融。
磺化与非磺化花青标记时的区别:
磺化和非磺化花青显示出非常相似的荧光性质,但是应注意标记步骤中的一些差异。
1.非磺化花青必须在使用前溶解在有机溶剂(DMF或DMSO)中,并添加到含有目标分子的溶液中。
2.纯化方面也有区别:当使用水或水性缓冲液进行纯化时,必须使用磺基花菁来有效去除未反应的染料。当通过凝胶过滤,色谱法(HPLC,FPLC,离子交换层析)或电泳进行纯化时,磺基化和非磺基化的花青都是可以反应的。
磺化和非磺化花青可互换用于标记多种目标分子,包括:
可溶性蛋白质,可耐受添加有机助溶剂 抗体(使用DMSO / DMF的5-10%) DNA和寡核苷酸 肽 许多小分子用类似的磺化和非磺化试剂(例如,磺基-Cy5和Cy5)生产的共轭物的荧光性质非常相似,可与各种荧光仪器兼容。
必须用磺化花青的目的情况:
DMF或DMSO变性的敏感蛋白 蛋白质-染料缀合物通过透析进行纯化时 水溶液中的纳米颗粒 不溶或疏水蛋白必须用非磺化花青的情况:
标记反应在有机介质(二氯甲烷,乙腈)中进行在这里,艾美捷科技为您推荐著名荧光染料品牌Lumiprobe开发的磺化/非磺化的花青染料及各种活性衍生物,如用于Click化学的NHS酯、马来酰亚胺、azides和其他衍生物。
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网址: 全系列花青(Cyanine)染料 https://m.huajiangbk.com/newsview1439613.html
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