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土壤微生物量测定方法资料

花匠小妙招
2025-01-04 12:42

1 土壤微生物量测定方法一、土壤微生物生物量碳(氯仿熏蒸- K 2 SO 4提取- 碳分析仪器法) 1、试剂(1) 去乙醇氯仿制备: 在通风橱中, 将分析纯氯仿与蒸馏水按 1?2(v:v) 加入分液漏斗中, 充分摇动 1 min , 慢慢放出底层氯仿于烧杯中, 如此洗涤 3次。得到的无乙醇氯仿中加入无水氯化钙, 以除去氯仿中的水分。纯化后的氯仿置于试剂瓶中, 在低温(4℃)、黑暗状态下保存。(2 )氢氧化钠溶液[c( NaOH )=1 mol L -1] :通常分析纯固体氢氧化钠中含有碳酸钠, 与酸作用时生成二氧化碳, 从而影响滴定终点判断和测定的准确度。配制时应先除去碳酸钠, 根据碳酸钠不溶于浓碱, 可先将氢氧化钠配成 50%(w:v) 的浓氧溶液, 密闭放置 3~4d。待碳酸钠沉降后,取 56 ml 50% 氢氧化钠上清液(约 19 mol L -1), 用新煮沸冷却的除去二氧化碳的蒸馏水释稀到 1L ,即为浓度 1 mol L -1 NaOH 溶液,用橡皮塞密闭保存。(3) 硫酸钾提取剂[c(K 2 SO 4)= mol L -1]:取17 g 分析纯硫酸钾, 用研钵磨成粉末状,倒于 25L 塑料桶中,加蒸馏水至 20L ,盖紧螺旋盖置于摇床( 150 r min -1 )上溶解 24h 即可。(4 )六偏磷酸钠溶液[ρ( Na )=5g 100 ml -1, pH ] :称取 g 分析纯六偏磷酸钠溶于 8 00 ml 高纯度去离子水中, 用分析纯浓磷酸调节至 pH , 用高纯度去离子水定容至 1 L。要注意的是六偏磷酸钠溶解速度很慢应提前配制; 由于其易粘于烧杯底部, 若加热常因受热不均使烧杯破裂。(5 )过硫酸钾溶液[ρ(K 2S 2O 8)=2g 100 ml -1] :称取 20 .0g 分析纯过硫酸钾,溶于高纯度去离子水中, 定容至 1L。值得注意过硫酸钾溶液易被氧化, 应避光存放且最多使用 7d。(6) 磷酸溶液[ρ(H 3 PO 4)= 21g 100 ml -1]: 量取 37 ml 分析纯浓磷酸( 85% ), 慢慢加入到 188 ml 高纯度去离子水中即可。(7 )邻苯二甲酸氢钾标准溶液[ρ() = 1000 mgCL -1]) :取 254g经 105 ℃烘2~3h 的分析纯邻苯二甲酸氢钾,溶于高纯度去离子水,定容至 1L。 2 、仪器设备碳–自动分析仪( Phoenix 8000 )、容量瓶( 100 ml )、振荡器( 300 r min -1)、可调加液器( 50 ml )、可调移液器(5 ml )、烧杯( 盛滤液用)( 50~100 ml)、聚乙烯提取瓶( 100 , 150 ml), 聚乙烯塑料桶( 20L ,带螺旋盖) ,三角瓶( 150 ml ) 、其它常规仪器。 3 、操作步骤(1 )土样前处理新鲜土壤应立即处理或保存于 4℃冰箱中, 测定前先仔细除去土样中可见植物残体(如根、茎和叶)及土壤动物(如蚯蚓等) ,过筛(孔径<2 mm ) ,彻底混匀。如果土壤过湿, 应在室内适当风干, 以手感湿润疏松但不结块为宜( 约为饱和持水量的 40% )。如果土壤过于干燥,用蒸馏水调节至饱和持水量的 40% 。将土壤置于密封的大塑料桶内在 25℃条件下预培养 7~ 15d

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