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叶绿素提取的主要步骤

1、叶绿体色素的提取

•将奇怪菠菜叶片洗净擦干,去叶柄及中脉,称取10g去中脉的叶片,剪碎置研钵内,参加少量固体碳酸钠或者碳酸钙以及10cm3丙酮,敏捷研磨成匀浆,再加15cm3丙酮充实研磨提取叶绿素。

•在玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉,将匀浆通过脱脂棉过滤到已经装有15cm3石油醚的分液漏斗中,再用少许丙酮冲刷叶片残渣以及研钵,归并滤液。

•沿分液漏斗的壁警惕参加30cm3蒸馏水,轻轻滚动参加4-8cm3饱和NaCL水溶液,静止几分钟待分层清晰后,弃去下面的丙酮一水层。再参加30cm3蒸馏水,轻轻摆荡分液漏斗,以洗去石油醚中残留的丙酮,弃去水层。共洗两次。将色素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中,置暗处或用黑纸包好备用。

2、叶绿素理化性子的视察

•光对叶绿素的损坏作用,在2支具塞试管中各放入2cm3上述色素石油醚提取液,盖好塞子。一支试管置暗处,一支试管置强光(如太阳光)下,经2—3h后,掏出2支试管视察溶液颜色有没有变革,或者在分光光度计上测定663nm处吸光度值后举行对比。

•叶绿素的荧光,取2cm3上述色素的石油醚提取液放入一支小试管中,可在窗口与入射光相垂直的偏向视察叶绿素暗红色的荧光。

•叶绿素的皂化反映,取1-2cm3上述色素的石油醚提取液一试管中,逐渐参加2-5cm3新配制的30%3KOH-甲醇溶液,使劲振动试管后静止分层,视察上基层溶液的变革。

•去镁叶绿素的形成,取1-2cm3上述石油醚提取液放入试管中,警惕参加3cm36moldm3HCL,动摇后静止分层视察溶液颜色变革。

•铜的代替作用,取1-2cm3色素的丙酮提取液于试管中,参加3cm36moldm3HCL,动摇试管,再逐渐参加醋酸铜结晶(把试管放进水浴中微微加热),可视察到溶液的颜色由褐色酿成鲜亮绿色,阐明铜代替了氢占领在镁在叶绿素中的位置。

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