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植物花色素苷合成酶(ANS)ELISA试剂盒品牌:雅吉生物上海

花匠小妙招
2025-01-08 06:15

产品名称：植物花色素苷合成酶(ANS)ELISA试剂盒
产品规格：96T

产品用途：科研实验

产品存储：2-8℃，有效期六个月

使用方法

植物花色素苷合成酶(ANS)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗体，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱
产品相册

组成

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

终止液

6ml×1瓶

酶标试剂

6ml×1瓶

标准品

0.5ml×1瓶

酶标包被板

12孔×8条

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

样品稀释液

6ml×1瓶

说明书

1份

显色剂A液

6ml×1瓶

封板膜

2张

显色剂B液

6ml×1/瓶

密封袋

1个

植物花色素苷合成酶(ANS)ELISA试剂盒如果不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融标本要求

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

使用方法

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

植物花色素苷合成酶(ANS)ELISA试剂盒操作程序总结：

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

订购说明

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

欢迎新老客户咨询订购：植物花色素苷合成酶(ANS)ELISA试剂盒

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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，提供科研类试剂、耗材、仪器、技术服务的生物企业。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学等。旗下拥有 “雅吉生物”、“晶风生物”、“彩佑实业”、“GTX” 品牌。通过公司各部门员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以优良的技术、优质的产品、良好的信誉为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持，物流售后服务等多部门联动服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户，雅吉生物的试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员好评，先后在权威杂志文章中被引用。本公司郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到。