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紫锥菊黄芪对鸡传染性法氏囊的影响.ppt

花匠小妙招
2024-09-17 02:12

紫锥菊黄芪对鸡传染性法氏囊的影响

紫锥菊、黄芪对鸡传染性法氏囊病免疫调控及相关性研究河北农业大学倪耀娣 5 研究中药具有重要意义目前金刚烷胺、病毒唑禁用于病毒性疾病，血清治疗也有一定危险，有可能带来了其他的疾病发生。由于中药的成分较复杂，使得病原对某一单一成分不产生耐药性，作用广泛，相对安全，因此中药的应用具有重要意义。 6 国内研究抗鸡传染性法氏囊病中药方剂黄生大白汤(张秋玲) 黄芪、黄连、黄芩、生地、大青叶、白头翁、白术、甘草(煎饮) 囊病灵(吴杰)党参、黄芪、银花、冰片等(散剂) 等其他复方制剂 Echinacea 国外紫锥菊属原产于美洲的一类菊科野生花卉，是多年生草本，头状花序单生于茎或枝顶，花朵很大，色彩艳丽。 ?在欧洲，以紫锥菊为原料的产品已连续数年占据年销量第一的位置。紫锥菊的免疫活性受到国内外的普遍重视，尤其在?德国和法国，紫锥菊及其制剂已成为家庭常备药。目前在欧美广泛应用于药品、营养补充剂和保健食品。 7 本实验研究的目的意义 7.1、目前国内研究中药治疗病毒性疾病虽然不少，但对中药作用机理研究不多，而且方剂多半都是很多中药配合组方，实际操作很麻烦。引种紫锥菊及其成分能否作为免疫调节剂原料使用畜禽，还缺乏相关的实验研究作支持。 7.2 本试验从国内选中具有免疫增强作用黄芪作做配伍，以引种紫锥菊为研究对象，并与中药方剂作对比，对其免疫调节作用的机理及物质基础进行了深入的研究，以期为开发利用引种紫锥菊资源提供翔实的实验依据。二、研究目标、研究内容及拟解决的关键性问题 1 研究目标本试验通过人工感染IBDV的方法，对试验鸡口服紫锥菊、黄芪合剂前后生理生化及免疫指标进行探讨，从而确定紫锥菊、黄芪提取物治疗鸡法氏囊病的确切预防治疗效果，进一步为开发新型免疫增强剂以及中药广泛应用于禽病毒性传染病提供一定的理论依据。 2 研究内容紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡预防治疗的最佳剂量紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡免疫器官的影响紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡的生理生化指标的影响紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡的血液中免疫球蛋白的影响紫锥菊、黄芪提取物对法氏囊病鸡的组织间CD4+、CD8+T淋巴细胞的影响 3 拟解决的关键性问题（1）病理模型的建立（2）法氏囊病毒RNA的提取及确定（3）紫锥菊、黄芪提取物对鸡法氏囊病的治疗效果及测定指标的综合分析三、拟采取的研究方法、技术路线、试验方案及其可行性分析 1 研究方法 1.1 病毒的传代 1.2 建立病理模型 1.2.1 IBDV的EID50（鸡胚半数致死量）的测定 1.2.2 人工感染病理模型的建立 1.2.3 发病标准判断 1.3 实验动物分组及处理 1.4 紫锥菊、黄芪提取物对人工感染IBDV雏鸡发病率和死亡率的影响 1.5 用物理方法测定免疫器官发育指数 1,6 用相应试剂盒及全自动分析仪测定血液生理生化指标 1.7 用比浊法测定血清免疫球蛋白含量 1.8 采用免疫组化的方法测定组织器官内CD4+、CD8+T淋巴细胞的含量 2 技术路线 3 试验方案 3.1病毒的传代 3.2 建立病理模型 (1) IBDV的EID50（鸡胚半数致死量）的测定（2）人工感染病理模型建立（3）发病标准判断（4）RT-PCR检测病料组织中IBDV 3.3 试验动物分组及处理（1）将试验用雏鸡210只随机分为Ⅻ组：紫锥菊、黄芪合剂高、中、低剂量组、中药方剂对照组、阳性对照组、攻毒对照组、正常对照组，每组30只，隔离饲养。前Ⅳ组在10日龄分别灌服相应的药物到17日龄，前Ⅺ组于20日龄点眼IBDV悬液（除正常对照组）进行攻毒。分组情况详见表1．表1 (2) 攻毒组与正常组对照组隔离饲养。试验结束时，记录雏鸡死亡情况，计算死亡率及成活率。然后分别采血，分离血清，比浊法检测血清免疫球蛋白含量。处死雏鸡，取胸腺，脾脏，法式囊，称其湿重，计算胸腺指数，脾脏指数。 3.4 紫锥菊、黄芪对人工感染IBDV雏鸡发病率和死亡率的影响 3.5 免疫器官指数测定取其胸腺、脾脏、法氏囊，称重并计算其免疫器官指数。胸腺指数（mg/g）＝胸腺湿重（mg）/体重（g）脾腺指数（mg/g）＝脾脏湿重（mg）/体重（g）法氏囊指数（mg/g）＝法氏囊湿重（mg）/体重（g） 3.6 生理生化指标的测定 3.7 血清免疫球蛋白含量测定抗体Ig G、lg A、Ig M试剂盒，按试剂盒操作进行。 3.8 组织器官中CD4+、CD8+的测定 3.9 外周血液中CD4+、CD8+的测定