丹参SmMYB36与SmbHLH128蛋白的泛素化修饰特征

• 花匠小妙招
• 2025-03-06 21:25

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第一章 文献综述

1.1 丹参及其药用活性成分国内外研究进展

1.2 bHLH及R2R3-MYB转录因子对丹参酮类及酚酸类物质的调控研究进展

1.2.1 bHLH转录因子对丹参酮类及酚酸类物质的调控研究进展

1.2.2 R2R3-MYB转录因子对丹参酮类及酚酸类物质的调控研究进展

1.3 bHLH及 R2R3-MYB转录因子泛素化修饰研究进展

1.3.1 bHLH转录因子泛素化修饰研究进展

1.3.2 R2R3-MYB转录因子泛素化修饰研究进展

1.3.3 E3 泛素连接酶COP1/SPA研究进展

1.4 研究目的及意义

1.5.1 研究内容

1.5.2 技术路线

第二章 材料与方法

2.1.1 植物材料

2.1.2 菌种信息

2.1.3载体信息

2.1.4 试剂和工具酶

2.2 引物设计

2.3 试验方法

2.3.1 植物材料培养

2.3.2 植物材料DNA、RNA的提取

2.3.3 植物材料总蛋白的提取

2.3.4 COP1/SPA 家族基因克隆

2.3.5 载体构建

2.3.6 纯化原核表达蛋白方法

2.3.6 农杆菌介导的拟南芥蘸花侵染法

2.3.7 农杆菌介导的烟草瞬时表达体系

2.3.8 Cell free 体外降解实验方案

2.3.9 Western blot免疫印迹检测

第三章 结果

3.1 烟草瞬时表达体系分析SmMYB36和SmbHLH128稳定性及降解途径

3.1.1 SmMYB36 和SmbHLH128 降解途径分析

3.1.2 SmMYB36 和SmbHLH128 稳定性分析

3.2 过表达 SmbHLH128转基因拟南芥的鉴定及 SmbHLH128降解途径验证

3.2.1 过表达拟南芥DNA 水平鉴定结果分析

3.2.2 转基因拟南芥分析SmbHLH128稳定性及降解途径验证

3.3 Cell free体系验证 SmMYB36和 SmbHLH128 稳定性及降解途径

3.4 E3 连接酶 SmCOP1/SPA的序列分析及互作分析

3.4.1 SmCOP1/SPA基因预测及序列分析

3.4.2 SmCOP1/SPA蛋白的系统进化树构建

3.4.2 SmCOP1/SPA基因克隆及载体构建

3.4.3 SmbHLH128与SmCOP1a的酵母双杂交互作分析

第四章 讨论

4.1 SmMYB36 和 SmbHLH128 蛋白不稳定

4.2 SmMYB36 和 SmbHLH128 蛋白通过 26S 蛋白酶体途径降解

4.3 E3 泛素连接酶 SmCOP1/SPA基因的生物信息学特征

4.4 E3 泛素连接酶 SmCOP1a与 SmbHLH128蛋白不互作

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 创新点

5.3 展望

参考文献

附录

致谢

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