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大花蕙兰繁殖关键技术

大花蕙兰繁殖技术——组织培养繁殖
-4-10 03:36:22  文章来源:《大花蕙兰》  
本文简介了大花蕙兰组织培养繁殖技术,涉及组培操作、培养和增殖、培养基配制等三个方面内容。

    一、组培操作
  在春季2~4月大花蕙兰新芽萌发期,选长8厘米左右新芽从基部与老假鳞茎相连接处切断。尽量采用露在外面,不被栽培材料埋起芽。采芽前数日减少叶面喷水,可减少菌类污染。采下芽先用肥皂和流动自来水冲洗10~15分钟,然后在无菌条件下切去芽上半段,并剥除最外面1~2枚叶片,在95%酒精中蘸一下(1~2秒),及时浸泡在10%次氯酸钠水溶液中。10分钟,稍加摇动。取出后及时用无菌水冲洗,再剥去2~3片叶,放入5%次氯酸钠水溶液中,5分钟后用无菌水冲洗,剥至留下最后一枚叶片。以生长点为中心,~,浸泡在1%次氯酸钠1分钟后取出,用无菌水冲洗多次,用解剖刀切成数块,分别放入已准备好培养基上。每瓶最佳只接种一块外植体,以免互相感染。
  切取生长点大小依培养目不同而异。在大花蕙兰茎尖培养中,再分裂增殖部位不但在生长点某些,生长点与叶原基中间也有较强分生能力。切取茎尖时带有两个左右叶原基,即较大组织块效果较好。
  二、培养和增殖
  接种好培养瓶放在室温20~25℃,有明亮散射光或日光灯下15~20厘米,光照强度在勒克斯左右,不可阳光直射,每天光照时间12小时左右。4~6周后可在外植体周边形成许多球状物,即类原球茎。若把类原球茎分割或用棒压碎,再接种到培养基上,便会形成更多类原球茎。每30~40天分割一次,大花蕙兰每切一种芽可繁殖1万苗左右。把类原球茎接种到长苗培养基上,可以长芽生根,形成完整幼苗。
  三、培养基配制
  MS培养基为基本培养基,~,增进分殖和叶片生长,不生根。~,即可形成类原球茎。也可以生根。此外,在培养基中不加NAA,添加一定数量椰乳,对增进类原球茎增殖、幼芽分化和生长健壮十分有益。
  据记载,改良Morel培养基用于大花蕙兰类茎尖培养,有较好效果。配方如下:
  硝酸钾(KN03)         1000毫克
  硝酸铵(NH4NO3)       650毫克
  氯化钙(CaCl2•2H2O)  440毫克
  硫酸镁(MgSO4•7H2O)  370毫克
  磷酸二氢钾(KH2PO4)   170毫克
  乙二胺四醋酸二钠(Na2-EDTA)
  硫酸锰(MnSO4•4H2O) 
  硼酸(H3BO3)         
  氯化锌(ZnCl2)       
  碘化钾(KI)          
  钼酸钠(Na2MoO4•2H2O)
  硫酸铜CuSO4•5H2O)  
  氯化钴(CoCl2•5H2O) 
  萘乙酸(NAA)          1毫克
  维生素B1             1毫克
  维生素B6            
  椰子水               200毫升
  葡萄糖              
10克
  蔗糖                 10克
  蒸馏水               加至1000毫升
  注:本配方氢离子浓度为6309纳摩/升()
  改良VW培养基适合于大花蕙兰类和卡特兰茎尖培养,其构成成分如下:
  硝酸钾(KNO3)        525毫克
  硝酸铵(NH4NO3)      500毫克
  磷酸二氢钾(KH2PO4)  250毫克
  硫酸镁(MgSO4•7H2O) 250毫克
  酒石酸铁[Fe(C4H4O6)3•2H2O]28毫克
  硫酸锰(MnSO4•4H2O)
  硼酸(H3BO3)         2毫克
  萘乙酸(NAA)        
  苯腺嘌呤           
  烟酸                1毫克
  椰子水              250毫升
  蔗糖               
20克
  蒸馏水              加至1000毫升

    注:本配方氢离子浓度为6309纳摩/升()。
  京都培养基(狩野1968)
  花宝(Hyponex )1号  3克
  蔗糖                    35克

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