一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法与流程
本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法。
背景技术：
猕猴桃营养丰富，含有多种维生素、脂肪和蛋白质等成分，其中维生素c含量为100mg-400mg/100g，远远高于柑橘、梨和苹果，素有“vc之王”之称。猕猴桃除了食用价值外，其花美丽芳香，兼具有较高的观赏价值。我国是猕猴桃资源分布的中心，种质资源丰富、分布广泛，但长期处于野生或半野生状态，由于生态环境的恶化，有的种已处于濒危境地，因此亟需收集和保存。
常用的保存方法有收集种子、枝条和苗木建立资源圃。建立资源圃具有占用空间大、用工大、维持费高等缺点。植物组织培养技术的出现、发展和完善，为植物种质资源的离体保存提供了可能。离体保存以无菌培养、占用空间小、用工和维持费低、便于各地区种质交流及濒危物种的抢救和快速繁殖等优点，在多种植物（桃、梨、荔枝等）中已得到应用。因此，利用植物组织培养技术对猕猴桃种质资源进行保存，显得十分必要和迫切。
在植物离体保存种质的过程中，培养基营养成分、水分逐步消耗殆尽，每隔一段时间，就要将培养物接种到新的培养基上，以保证正常生长。猕猴桃组培苗一般1个月继代一次，最长可保存2个月左右，频繁继代需要花费大量的人力、物力和时间；同时，随着继代次数的增加，培养材料的变异机率也增加，不利于原始种质的保存。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法，为利用植物组织培养技术进行猕猴桃种质资源的离体保存提供技术支撑。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法，其包括以下步骤：
（1）将无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于专用继代培养基中；
（2）于培养温度25±1℃，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx的培养室中进行保存；
（3）待发现组培苗叶片出现干枯时，更换新的专用继代培养基。
所述专用继代培养基为ms+6-ba1.0-2.0mg/l+naa0.5-1.0mg/l+ga30.1mg/l+琼脂7g/l+蔗糖15-20g/l。
本发明的有益效果在于：
（1）本发明通过限定培养基中蔗糖的浓度，有效减缓了组培苗的生长，减少了营养消耗，将猕猴桃组培苗的继代间隔时间由2个月延长至4-5个月，大大减少了继代接种的工作量，且组培苗成活率可达80%以上，同时也降低了变异机率。
（2）本发明具有简单易操作、安全可靠的特点，不会对培养材料产生副作用，方法简单有效，具有操作性强，应用价值高等优点。
表1不同蔗糖浓度对猕猴桃组培苗保存期的影响
由表1结果可见，采用本发明可使猕猴桃组培苗的保存期延长一倍，且节约组培成本。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法，包括以下步骤：
（1）按ms+6-ba1.0mg/l+naa0.5mg/l+ga30.1mg/l+琼脂7g/l+蔗糖15g/l配制专用继代培养基；培养基灭菌前调整ph至6.0；
（2）选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中；
（3）接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1℃，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx的培养室中进行保存；
（4）延缓生长的组培苗可保持5个月，期间发现组培苗叶片出现干枯时，及时更换新的培养基。培养后的组培苗的成活率达86%。
实施例2
一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法，包括以下步骤：
（1）按ms+6-ba1.0mg/l+naa1.0mg/l+ga30.1mg/l+琼脂7g/l+蔗糖20g/l配制专用继代培养基；培养基灭菌前调整ph至6.0；
（2）选择无污染、生长健壮的猕猴桃组培苗接种于上述培养基中；
（3）接种后的猕猴桃组培苗放置于培养温度25±1℃，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx的培养室中进行保存；
（4）延缓生长的组培苗可保持4.5个月，期间发现组培苗叶片出现干枯时，及时更换新的培养基。培养后的组培苗的成活率达83%。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
技术特征：
技术总结
本发明公开了一种延长猕猴桃组培苗保存期的培养方法，其是在猕猴桃组培苗传统继代培养基的基础上加入一定量的蔗糖，以有效延长组培苗的保存时间，解决目前猕猴桃组培苗保存期短的问题。按本发明方法进行猕猴桃组培苗的保存，一般可将组培苗的生长延缓4‑5个月，且组培苗成活率可达80%以上。
技术研发人员：高敏霞;陈义挺;冯新;赖瑞联;陈文光
受保护的技术使用者：福建省农业科学院果树研究所
技术研发日：2018.12.26
技术公布日：2019.03.08
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