霍山石斛种苗繁育技术规程(正文)
本标准规定了霍山石斛(Dendrobium huoshanense C. Z. Tang et S. J. Cheng)种苗繁育的种源、蒴果选择与处理、种苗培育、种苗质量、存放及假植、文件记录和档案管理。
本标准适用于利用霍山石斛种子,采用无菌播种技术繁育霍山石斛种苗。
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GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样
GB/T 5749 生活饮用水卫生标准
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
原球茎 protocorm
种子经过胚的膨大,种皮破裂后形成肉眼可见浅黄色呈球状或圆锥状的原胚。
3.2
丛生芽 multiple shoot
原球茎经诱导产生数量众多、簇生的芽。
4 种源
4.1 原植物
原植物应符合《中国植物志》收载的兰科植物霍山石斛(Dendrobium huoshanense C. Z. Tang et S. J. Cheng)的植物特征,经过鉴定确认。
4.2 留种要求
留种植株应选择生长健壮的植株,且在直径1Km内无其它种类石斛。在花期,进行异花授粉,母本在授粉后立即摘除唇瓣,及时挂牌标示。授粉当年10月份以后,蒴果开始转黄时,选择成熟饱满的蒴果采收。
选择成熟饱满、无病虫害、无机械损伤、无自然开裂的蒴果。
用水充分清洗蒴果表面的灰尘,所用水质执行GB/T 5749。晾干表面的水份,用洁净纸进行包裹,在4℃冰箱中保存一周。处理后的蒴果用75%酒精浸泡15min~20min后在酒精灯火焰上灼烧1S~2S,备用。
在无菌条件下,用镊子夹住消毒处理过的蒴果果柄,用解剖刀切开蒴果顶端,将蒴果置于培养瓶内轻轻的抖动,均匀撒播一层种子于MS培养基表面,立即封住瓶口。
播种的培养瓶置于温度为(25士2)℃的洁净环境中暗培养1周后,在光照强度为1500μmol·m-2·s-1~2000μmol·m-2·s-1,光照时长为10h/d~12h/d的条件下,继续培养30d~45d形成原球茎。
选取健康饱满、无污染的原球茎在改良MS培养基上,进行原球茎增殖。光照强度为1500μmol·m-2·s-1~2000μmol·m-2·s-1,光照时长为10h/d~12h/d,继代培养55d~65d。
选择健康,无污染的原球茎在改良MS培养基上,诱导丛生芽。光照强度为1500μmol·
m-2·s-1~2000μmol·m-2·s-1,光照时长为10h/d~12h/d,培养40d~55d。
选择健康,无污染的丛生芽在改良MS养基上,进行丛生芽增殖。光照强度为1500μmol·
m-2·s-1~2000μmol·m-2·s-1,光照时长为10h/d~12h/d,培养50d~70d。
选择芽体健康,无污染,芽高1.5cm~2.5cm的丛生芽在1/2MS培养基上,生根壮苗。光照强度为1500μmol·m-2·s-1~3000μmol·m-2·s-1,光照时长为10h/d~12h/d,培养65d~75d。
原球茎和丛生芽继代次数控制在4代以内。
种苗在温度15℃~35℃、光照2000μmol·m-2·s-1~20000μmol·m-2·s-1范围条件下锻炼15d~20d后,种苗叶片变深绿即可出瓶。
打开瓶口,用镊子将经过炼苗后的种苗轻轻夹出,在流动的水下进行清洗,洗净根部附着的培养基。
将清洗好的种苗用广谱性杀菌剂稀释喷雾或浸泡 5s~10s。处理后置于阴凉地方平摊存放,切忌堆放过厚。
用于栽培的种苗应无污染、无烂茎、无烂根、无黄叶、叶色深绿且正常展开。
种苗分级见表1。
表1 霍山石斛种苗分级
指 标
等 级
一级
二级
根数/条
≥3
1~2
叶片数/片
≥4
2~3
苗高/cm
>3.5
2.5~3.5
苗径/cm
>0.25
0.15~0.25
按GB/T 3543.2执行。
目测根数。
目测叶片数。
用分度值1mm直尺测量茎基部至最高叶片尖端的距离。
用游标卡尺测量茎的最粗部位值。
根数、叶片数、株高、茎粗四项指标必须同时达到本标准7.5指标要求的方可判定为一级苗或二级苗。四项指标中即使有三项指标达到一级苗标准,而另一项只达到二级苗标准,则为二级苗;四项指标中即使有三项指标达到二级苗标准,而另一项未达到二级苗标准,判定为不合格苗。
消毒后的种苗存放时应注意通风、透气,并附上标签。存放期间应保持叶片不萎蔫,不脱水,可喷水增加叶片湿度,所用水质执行GB/T 5749。消毒后的种苗在根部晾干发白后72h内栽种完毕。
出苗后3d内不能立即外运或栽植的,要进行假植。假植设施和条件要满足石斛生长的要求,冬季配备必要的防冻保温设备。
蒴果的来源,留种植株的栽培基质、施肥种类、施用量、次数,留种植株病虫防治的用药种类、施药方法、时间、次数,以及留种植株其它各种农事管理措施均应作详细的生产记录。蒴果采收批次、时间、处理方法、条件和时间等也应做详细记录。
包括蒴果用量、育苗条件、培养时间、培养管理、炼苗情况、栽植时间、栽植后成活率等记录。
所有基础资料及生产管理资料均应建立档案并由专人保管,长期保存,具备条件的应建立计算机档案管理系统。
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