本发明涉及植物的组织培养,尤其是涉及一种紫皮石斛种子一步成苗的培养方法。
背景技术:
1、石斛是名贵的药食同源食物,既可作药用,又可用作保健品。紫皮石斛又名齿瓣石斛、紫皮兰,具有益胃生津、润肺止咳、滋阴清热等功效。云南龙陵是紫皮石斛的主要产地,已成功申报注册了“龙陵紫皮石斛”地理标志、农产品地理标志和国家地理标志保护产品。鉴于紫皮石斛的优良品质和经济价值,有学者建议将其收入《中国药典》。除此之外,紫皮石斛具有较高观赏价值,既可作切花,也可盆栽观赏;而且花姿优雅,花色鲜艳,茎叶体形独特,花朵、茎叶都可用作艺术插花供人们欣赏。
2、由于紫皮石斛的经济价值和观赏价值较高,生境破坏与植树造林、繁殖特性缺陷等原因,致使紫皮石斛野生资源受到了严重破坏,已成为濒危植物。在其主要产区云南龙陵县,集体林区内已较难找到野生紫皮石斛。目前龙陵县石斛产业已由过去的粗放仿野生栽培、零星种植、分散经营发展到如今的集约化栽培、规模规范化种植和行业组织化经营。目前,工厂化石斛种苗培育主要流程为种子萌发及原球茎培养、原球茎增殖和分化、生根壮苗培养,但此方法在种苗生产过程中需要频繁更换培养基、多次的换瓶转接,在转接过程中不仅浪费人力、财力、物力,而且转接过程增加了组培苗的污染率,会导致紫皮石斛组培苗出瓶率降低,种苗生产成本居高。
3、石斛一步成苗方法在铁皮石斛和金钗石斛中已有报道,但是以铁皮石斛的一步成苗培养基培养紫皮石斛时小苗黄化,长势较弱且生长速度较慢,且培养基硬度稍高,不适合紫皮石斛根生长;以金钗石斛的一步成苗培养基培养紫皮石斛时,紫皮石斛苗根的生长较为健壮,但是苗的分化率较低,幼芽诱导率较低,同时较高的湿度会导致紫皮石斛叶片基部腐烂褐化。有鉴于此,急需提供一种流程简便、可操作性强且成功率高的紫皮石斛种子一步成苗的培养方法。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,可以减少组织培养过程中的转接次数,简化紫皮石斛种苗生产的工艺流程,降低种苗生产成本,为工厂化育苗提供技术支撑。
2、根据本发明的一个目的,本发明提供一种紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,包括如下步骤:
3、s1,紫皮石斛蒴果采集和消毒
4、采集紫皮石斛成熟蒴果,对蒴果消毒;
5、s2,种子播种及培养
6、种子萌发培养基为ms+0.1mg/l 6-ba+0.2mg/lnaa+60g/l马铃薯汁+70g/l香蕉汁(带皮)+25g/l蔗糖+6.8g/l琼脂,ph=5.9,种子在培养瓶内培养195天以后,不经任何转接长成7~9cm的带根茎叶的完整植株。
7、进一步地,s1中,采集无病虫害、成熟的紫皮石斛蒴果,蒴果消毒先用流动自来水冲洗2min,然后采用体积分数为75%的酒精消毒1min,无菌水冲洗3遍后再用质量分数为3%的次氯酸钠溶液进行表面消毒3min,不断震荡后用无菌水清洗4遍。
8、进一步地,s2中,将消毒好的蒴果置于消毒后的滤纸上吸干水分,用手术刀划开果荚外种皮,将嫩黄色粉末状种子以20粒为单位分别置于1ml无菌水中制成密度为20粒/ml的无菌种子悬浮液,后用移液枪将种子均匀铺平接种在种子萌发培养基。
9、进一步地,s2中,种子萌发及培养的温度为22-25℃,湿度70%-80%。
10、进一步地,s2中,种子萌发及培养光照强度1400-1500lx,光照周期为10-12h/d。
11、进一步地,s2中,种子萌发及培养是直接在培养瓶内培养195天以后,不经任何转接长成7~9cm的带根茎叶的完整植株。
12、有益效果
13、本发明从种子播种到成苗无需转接,节约了培养基原料和人力、物力,相比传统三步培养法缩短了近25天的时间提早出苗。本发明种子培养基中添加带皮的香蕉汁,是由于香蕉皮中富含丰富的钾元素,可以补充紫皮石斛生长所需的钾元素等必需元素。
技术特征:
1.一种紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,其特征在于,s1中,采集无病虫害、成熟的紫皮石斛蒴果,蒴果消毒先用流动自来水冲洗2min,然后采用体积分数为75%的酒精消毒1min,无菌水冲洗3遍后再用质量分数为3%的次氯酸钠溶液进行表面消毒3min,不断震荡后用无菌水清洗4遍。
3.根据权利要求2所述的紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,其特征在于,s2中,将消毒好的蒴果置于消毒后的滤纸上吸干水分,用手术刀划开果荚外种皮,将嫩黄色粉末状种子以20粒为单位分别置于1ml无菌水中制成密度为20粒/ml的无菌种子悬浮液,后用移液枪将种子均匀铺平接种在种子萌发培养基中。
4.根据权利要求3所述的紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,其特征在于,s2中,种子萌发及培养的温度为22-25℃,湿度70%-80%。
5.根据权利要求4所述的紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,其特征在于,s2中,种子萌发及培养光照强度1400-1500lx,光照周期为10-12h/d。
6.根据权利要求5所述的紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,其特征在于,s2中,种子萌发及培养是直接在培养瓶内培养195天以后,不经任何转接长成7~9cm的带根茎叶的完整植株。
技术总结
本发明提供了一种紫皮石斛种子一步成苗的培养方法,包括采集紫皮石斛成熟蒴果,对蒴果消毒;种子萌发培养基为MS+0.1mg/L6‑BA+0.2mg/LNAA+60g/L马铃薯汁+70g/L香蕉汁(带皮)+25g/L蔗糖+6.8g/L琼脂,pH=5.9,种子在培养瓶内培养195天以后,不经任何转接长成7~9cm的带根茎叶的完整植株。本发明从种子播种到成苗无需转接,节约了培养基原料和人力、物力,相比传统三步培养法缩短了近25天的时间提早出苗。本发明种子培养基中添加带皮的香蕉汁,是由于香蕉皮中富含丰富的钾元素,可以补充紫皮石斛生长所需的钾元素等必需元素。
技术研发人员:张敬丽,熊文艳,吴雅文,白天,陈军文,杨生超,董燕,普冉,高照生,李雪娇
受保护的技术使用者:云南农业大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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