1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810318511.6 (22)申请日 2018.04.11 (71)申请人 福建农林大学 地址 350002 福建省福州市仓山区上下店 路15号 (72)发明人 吴亮宇 郭雅玲 李永裕 刘江洪 林金科 张玥 鲁静 林东艺 (74)专利代理机构 福州元创专利商标代理有限 公司 35100 代理人 蔡学俊 (51)Int.Cl. A61K 36/82(2006.01) A61K 9/08(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P 27/02(2006
2、.01) A61P 27/12(2006.01) (54)发明名称 一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水 及其制备方法 (57)摘要 本发明属于农产品深加工领域, 具体提供一 种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水及其制 备方法。 所述的方法中以低档的茉莉花茶为原 料, 通过不同温度的浸提等工艺, 得到茉莉花茶 提取物, 该提取物不仅保留有原茉莉花茶汤的香 气和茶叶中的天然活性物质, 而且不含有任何外 源添加物, 将其与维生素E, 乙二胺四乙酸二钠, 没食子酸等物质配制成抗氧化眼药水, 用于减 轻、 预防或逆转由氧化应激诱发的眼损伤, 包括 干眼症、 白内障、 与年龄相关的视网膜膜变性等。 权利要
3、求书1页 说明书4页 附图3页 CN 108578519 A 2018.09.28 CN 108578519 A 1.一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水, 其特征在于: 所述眼药水的主要成分为: 按质量分数计: 5%-25%茉莉花茶提取物、 0.005%-1% 乙二胺四乙酸二钠、 1%-8%维生素E、 余 量为0.09wt% 氯化钠溶液。 2.一种制备如权利要求1所述的一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水的方法, 其 特征在于: 将茉莉花茶提取物、 乙二胺四乙酸二钠、 维生素E均匀混合后, 加入5倍体积的0.09wt% 氯化钠溶液, 混匀, 用0.1M的碳酸氢钠或盐酸调节pH值至6.5-7.
4、0, 121下灭菌45分钟, 得 到眼药水。 3.根据权利要求2所述的一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水的制备方法, 其特 征在于: 其中茉莉花茶提取物的制备具体步骤包括: (1) 茉莉花茶茶叶制备 作为本发明原料的茶叶来源于山茶科茶属Camellia sinensis植物, 首先将芽、 叶、 嫩 茎收获后, 通过加热钝化鲜叶中的酶活性, 再通过揉捻, 干燥技术得到的不发酵的茶叶, 然 后将向茶叶中加入盛开的茉莉花鲜花窨制, 窨制后再筛去茉莉花, 得到茉莉花茶产品; (2) 茉莉花茶茶汤提取 利用研磨机械对茉莉花干茶粉碎, 粉碎后的茶粉用40目的筛子进行过筛处理; 筛后茶 粉按照质量比1:3
5、0的比例, 加入超纯水; 先于50-70的水浴中浸提, 10-30min, 压力为 0.1MPa, 得到低温浸提液, 然后将该浸提液转移至另一容器内存储备用; 再按照质量比1:30 的比例加入超纯水, 在85-100的水浴中浸提, 10-40 min, 压力为0.1 MPa, 得到高温浸提 液; (3) 浸提液浓缩 合并两次浸提的液体, 在30-50 hPa的旋转蒸发仪中以45-55的温度进行浓缩, 待浓 缩液体积为原浸提液的10-20%时, 停止浓缩; (4) 过滤 待浓缩液冷却至室温后, 用孔径为0.22 m的过滤膜进行过滤, 除去不溶物和微生物; 获得茉莉花茶提取物。 权 利 要 求 书
6、 1/1 页 2 CN 108578519 A 2 一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水及其制备方法 技术领域 0001 本发明属于农产品深加工领域, 具体提供一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药 水及其制备方法。 背景技术 0002 茉莉花茶是福州地区特有的一种再加工类茶产品, 其包含有茶叶的口感和滋味, 也具有茉莉花特殊的芬芳, 通过饮用茉莉花茶可以达到提神醒脑, 疏肝解郁, 缓解眼部疲劳 的功效。 而目前消费者只能通过沸水冲泡的方式达到享用茉莉花茶产品的目的, 缺乏对茉 莉花茶在深加工方面的利用。 基于此, 本发明通过一系列工艺方法, 制备出一种浓缩型的茉 莉花茶汤提取物, 利用该提取物为
7、原料, 与其它成分按照一定比例混合, 制造出具有茉莉花 茶芬芳和茶叶天然活性物质的抗氧化眼药水, 该除臭剂具有安全、 对人体无伤害的特点, 具 有良好的缓解眼部疲劳, 预防眼部疾病的功能。 发明内容 0003 本发明的目的在于提供一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水的制备方法。 本 发明方法可以制备出不含有害物, 方便携带和保存的除臭剂, 保留有原来茉莉花茶香气和 茶叶天然产物, 并且其对人体无害且具有良好的预防眼部疾病效果。 0004 为实现上述目的, 本发明采用如下技术方案: (1) 茉莉花茶茶叶制备 作为本发明原料的茶叶来源于山茶科茶属 (Camellia sinensis) 植物, 首
8、先将芽、 叶、 嫩茎收获后, 通过加热钝化鲜叶中的酶活性, 再通过揉捻, 干燥技术得到的不发酵的茶叶, 然后将向茶叶中加入盛开的茉莉花鲜花窨制, 窨制后再筛去茉莉花, 得到茉莉花茶产品。 茉 莉花茶的等级、 来源、 产地等不受限制, 理论上可以使用任何茶叶与茉莉花进行窨制。 0005 (2) 茉莉花茶茶汤提取 利用研磨机械对茉莉花干茶粉碎, 粉碎后的茶粉用40目的筛子进行过筛处理。 筛后茶 粉按照1:30 (w/w) 的比例, 加入超纯水。 先于50-70的水浴中浸提, 10-30min, 压力为 0.1MPa, 得到低温浸提液, 然后将该浸提液转移至另一容器内存储备用。 再按照1:30 (w
9、/w) 的比例加入超纯水, 在85-100的水浴中浸提, 10-40 min, 压力为0.1 MPa, 得到高温浸提 液。 0006 (3) 浸提液浓缩 合并两次浸提的液体, 在30-50 hPa的旋转蒸发仪中以45-55的温度进行浓缩, 待浓 缩液体积为原浸提液的10-20%时, 停止浓缩。 0007 (4) 过滤 待浓缩液冷却至室温后, 用孔径为0.22 m的过滤膜进行过滤, 除去不溶物和微生物。 对过滤后制得的提取液进行高效液相色谱分析; (5) 将提取得到的茉莉花茶提取物用于抗氧化眼药水制备, 所述眼药水的主要成分为: 说 明 书 1/4 页 3 CN 108578519 A 3 按质
10、量分数计: 5%-25%茉莉花茶提取物、 0.005%-1% 乙二胺四乙酸二钠、 1%-8%维生素E、 余 量为0.09wt% 氯化钠溶液。 0008 (6) 具体制备方法为将茉莉花茶提取物、 乙二胺四乙酸二钠、 维生素E均匀混合后, 加入5倍体积的0.09wt%氯化钠溶液, 混匀, 用0.1M的碳酸氢钠或盐酸调节pH值至6.5-7.0, 121下灭菌45分钟, 得到眼药水。 0009 本发明的优点在于: 本发明针对性地利用低温和高温提取能够保留茉莉花香气和茶叶天然活性物质的浸 提液, 用于减轻、 预防或逆转由氧化应激诱发的眼损伤, 包括干眼症、 白内障、 与年龄相关的 视网膜膜变性等。 从成
11、本控制的角度出发, 本发明所用的茉莉花茶原料可采用中低档的茉 莉花茶, 其来源广泛, 价格低廉, 茉莉花茶叶加工中的碎叶和老叶等均可以作为茉莉花茶提 取物原料, 可以实现资源的最大限度利用。 附图说明 0010 图1 为茉莉花茶提取物中各组分的高效液相图谱; 图2为经过中波紫外线辐射后视网膜色素上皮细胞的存活率; 图3为激光共聚焦显微镜下对不同处理细胞内部过氧化物观察图; 图4为荧光酶标仪对不同处理细胞过氧化物含量进行定量检测统计图。 0011 具体实施方式 0012 为进一步公开而不是限制本发明, 以下结合实例对本发明作进一步的详细说明。 0013 实施例1: (1) 茉莉花茶茶叶制备 作为
12、本发明原料的茶叶来源于山茶科茶属Camellia sinensis植物, 将芽、 叶、 嫩茎收 获后, 将收集到的茶叶首先进行干燥处理, 将茶胚置于100-110加热设备中加热, 将茶胚 含水量降至4-4.5%, 通过摊凉、 冷却, 待茶叶堆温梢高室温1-3时进行窨制。 0014 将收集到的茉莉花鲜花按级分堆, 摊凉, 使鲜花开放率在60%70%时, 筛花, 分花大 小, 剔除青蕾花蒂。 0015 先把茶胚总量1/3-1/4, 平摊在窨花场上, 厚度为小于20 cm, 然后根据茶、 花配比 用量的鲜花, 同样分出1/3-1/4均匀的撒铺在茶胚面上, 一层茶, 一层花相间3-5层, 再用铁 耙从
13、横断面由上至下扒开拌和。 茶胚和鲜花边拌边按箱窨、 屯窨、 块窨方法进行“窨花“。 将 拼合后的茶、 花投放在木箱中, (木箱规格464343cm即二号标准茶箱), 进行箱窨, 每箱 窨茶量5kg, 厚度25-30cm。 0016 通花散热: 将在窨的茶堆扒开摊凉, 从堆高30-40cm, 扒开薄摊堆高10cm, 每隔15分 钟, 再翻拌一次, 让茶堆充分散热, 1小时后堆温达到要求时, 就收堆复窨, 堆高30cm, 再经5- 6小时, 茶堆温度又上升到40, 花已成萎调状, 色泽由白转微黄, 嗅不到鲜香, 起花。 0017 在窨时间达10-12小时, 花将失去生机, 茶胚吸收水份和香气到达一
14、定状态时, 必 须立即进行起花, 用起花机把茶和花分开, 即叫起花。 0018 将窨制后的茶进行烘焙, 制得茉莉花花茶。 说 明 书 2/4 页 4 CN 108578519 A 4 0019 (2) 茉莉花茶茶汤提取 利用研磨机械对茉莉花干茶粉碎, 粉碎后的茶粉用40目的筛子进行过筛处理。 筛后茶 粉按照1:30 (w/w) 的比例, 加入超纯水。 先于50-70的水浴中浸提, 10-30min, 压力为 0.1MPa, 得到低温浸提液, 然后将该浸提液转移至另一容器内存储备用。 再按照1:30 (w/w) 的比例加入超纯水, 在85-100的水浴中浸提, 10-40 min, 压力为0.1
15、 MPa, 得到高温浸提 液。 0020 (3) 浸提液浓缩 合并两次浸提的液体, 在30-50 hPa的旋转蒸发仪中以45-55的温度进行浓缩, 待浓 缩液体积为原浸提液的10-20%时, 停止浓缩。 0021 (4) 过滤 待浓缩液冷却至室温后, 用孔径为0.22 m的过滤膜进行过滤, 除去不溶物和微生物。 对过滤后制得的提取液进行高效液相色谱分析 (图1) , 方法参考GB/T 8313-2008。 得到过滤 液中咖啡碱和各儿茶素组分含量如表1所示: 表1 过滤液中所含咖啡碱和儿茶素 ( g/mL) GA: 没食子酸; EGC: 表模式子儿茶素; CAF: 咖啡碱; C: 儿茶素; EC
16、: 表儿茶素; EGCG: 表没 食子儿茶素没食子酸酯; GCG: 没食子儿茶素没食子酸酯; ECG: 表儿茶素没食子酸酯; CG: 儿 茶素没食子酸酯。 0022 (5) 一种含有茉莉花茶提取物的抗氧化眼药水, 由以下含量的物质组成: 按质量分数计: 9%茉莉花茶提取物、 0.005% 乙二胺四乙酸二钠、 5%维生素E、 余量为 0.09wt% 氯化钠溶液。 0023 (6) 具体制备方法为将茉莉花茶提取物、 乙二胺四乙酸二钠、 维生素E均匀混合后, 加入5倍体积的0.09wt%氯化钠溶液, 混匀, 用0.1M的碳酸氢钠或盐酸调节pH值至6.5-7.0, 121下灭菌45分钟, 得到眼药水。
17、 0024 图2 展示了经过中波紫外线辐射后, 视网膜色素上皮细胞的存活率。 0025 具体细胞存活率检测为: 向不同处理的细胞中加入5 mg/mL的MTT溶液, 放置于37 培养箱中, 经过4 h孵育, 然后弃去培养液, 再加入200 L的二甲基亚砜, 震荡混匀, 在490 nm 波长上进行吸光度检测。 以同时期下正常细胞为对照 (100%) , 各处理样品进行细胞存活 率换算。 0026 经过辐射后, 未经使用本发明眼药水的细胞 (对照) 存活率随着时间的延长而降 低。 而经过使用本发明眼药水的细胞, 在经过辐射后与对照细胞培养相同时间, 其存活率显 著高于对照 (p 0.05) 。 00
18、27 图3 为激光共聚焦显微镜下细胞内过氧化物的观察。 荧光亮点为被DCF-DA染色后 的过氧化物。 图3中, 第一列是普通光学视场 (a1,b1,c1,d1,e1) , 第二列是荧光视场 (a2,b2, 说 明 书 3/4 页 5 CN 108578519 A 5 c2,d2,e2) , 第三列是合并后图像 (a3,b3,c3,d3,e3) 。 a1a3: 未经紫外线辐射的正常细胞。 b1b3: 经过紫外线辐射后, 30min的细胞; c1c3: 经过紫外线辐射, 并且经过本发明处理后, 30min的细胞。 d1d3: 经过紫外线辐射后, 120 min的细胞; e1e3: 经过紫外线辐射,
19、 并且经 过本发明处理后, 120 min的细胞。 0028 图4为荧光酶标仪对不同处理细胞过氧化物含量进行定量检测统计图。 各处理组 中, 细胞内部过氧化物的荧光强度, 荧光强度越高, 表面细胞内部的过氧化物越多; 图4中横 坐标从左至右分别为: Ccontrol为从左到右分别是未经紫外线辐射的正常细胞; UVB1为经 过紫外线辐射后, 30min的细胞; UVB2为经过紫外线辐射, 并且经过本发明处理后, 30min的 细胞; UVB3为经过紫外线辐射后, 120 min的细胞; UVB4为经过紫外线辐射, 并且经过本发明 处理后, 120 min的细胞; 纵坐标为荧光强度值。 0029
20、将辐射相同剂量中波紫外线的人视网膜色素上皮细胞进行荧光染色 (DCF-DA染 色) , 在激光共聚焦显微镜观察及荧光强度检测, 发现: 正常视网膜色素上皮细胞中含有少 量的自由基, 因此在荧光激发下显示出绿色。 而在中波紫外线辐射后的细胞, 其自由基含量 大幅度上升, 荧光点的数量和荧光强度都有所提升。 而经过本发明处理后的细胞, 其荧光点 数量和强度都接近正常细胞的范围, 说明本发明对中波紫外线引发的过氧化损伤有一定的 抑制作用。 0030 以上所述仅为本发明的较佳实施例, 凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与 修饰, 皆应属本发明的涵盖范围。 说 明 书 4/4 页 6 CN 108578519 A 6 图1 图2 说 明 书 附 图 1/3 页 7 CN 108578519 A 7 图3 说 明 书 附 图 2/3 页 8 CN 108578519 A 8 图4 说 明 书 附 图 3/3 页 9 CN 108578519 A 9
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