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罗勒等4种唇形科香花植物离体培养与离体保存研究

  唇形科(Labiatae)植物具有重要的经济价值和药用价值,罗勒、百里香、香蜂花和迷迭香等都富含多种芳香油,均是很好地药用作物。本试验主要以罗勒、百里香、香蜂花和迷迭香等4种唇形科香花植物为试验材料,对其离体培养与离体保存等方面进行了研究,主要有:以罗勒种子和带腋芽的茎段为试验材料,对罗勒试管苗离体再生体系的建立、试管苗的离体保存及试管苗离体保存过程中SOD、CAT、POD酶活性变化的测定进行了研究;以百里香带腋芽的茎段为试验材料,对百里香试管苗离体再生体系的建立、试管苗的离体保存及试管苗离体保存过程中SOD、CAT、POD酶活性变化的测定进行了研究;以香蜂花试管苗为试验材料,对香蜂花试管苗的离体保存及离体保存过程中SOD、CAT、POD酶活性变化的测定进行了研究;以迷迭香叶片为试验材料,对迷迭香愈伤组织的诱导、增殖、细胞悬浮培养及离体保存进行了研究。主要研究结果如下:1罗勒等唇形科香花植物的离体繁殖1.1罗勒离体繁殖以罗勒种子和带腋芽的茎段为试验材料,对罗勒试管苗无菌系的建立、增殖、生根及炼苗移栽等方面进行了研究。试验结果表明:罗勒茎段在75%酒精(30s)+0.1%的HgCl_2(5min)的消毒方式中消毒效果最好,罗勒种子在75%酒精(30s)+0.1%的HgCl_2(8min)的消毒方式中消毒效果最好;罗勒试管苗在MS+0.1mg·L~(-1)6-BA+0.3mg·L~(-1)NAA+0.3mg·L~(-1)KT的培养基中增殖效果最好,增殖系数达5.68;在1/4MS+0.3mg·L~(-1)NAA+0.3mg·L~(-1)IBA的培养基中生根效果最好,生根率高达100%;最适宜于罗勒试管苗移栽的基质为泥炭土,成活率可达96.0%。1.2百里香离体繁殖以百里香带腋芽的茎段为试验材料,对百里香试管苗无菌系的建立、增殖、生根及炼苗移栽等方面进行了研究。试验结果表明:百里香茎段在75%酒精(30s)+0.1%的HgCl_2(4min)的消毒方式中消毒效果最好;百里香试管苗在MS+1.7mg·L~(-1)6-BA+0.1mg·L~(-1)NAA的培养基中增殖效果最好,增殖系数达12.01;在1/4MS+0.1mg·L~(-1)NAA+0.1mg·L~(-1)IBA的培养基中生根效果最好,生根率高达100%;最适宜于百里香试管苗移栽的基质为泥炭土,成活率可达92.0%。2迷迭香的愈伤组织培养与细胞悬浮培养以迷迭香叶片为试验材料,对迷迭香愈伤组织的诱导、增殖、继代、保持及细胞悬浮培养等方面进行了研究。试验结果表明:迷迭香叶片在MS+4.0mg·L~(-1)6-BA+0.5mg·L~(-1)NAA的培养基中诱导愈伤组织的效果最好,诱导率高达88.9%;愈伤组织在MS+1.0mg·L~(-1)2,4-D与MS+1.0mg·L~(-1)2,4-D+0.3mg·L~(-1)KT+5mg·L~(-1)AgNO_3的交替培养中增殖、继代与保持的效果最好;迷迭香悬浮细胞培养的最适宜接种密度为0.08g·mL~(-1),最佳继代周期为7d,最佳碳源为蔗糖。3罗勒等唇形科香花植物离体保存3.1罗勒试管苗离体保存以罗勒试管苗为试验材料,研究了不同浓度PP_(333)、不同浓度ABA及不同因素(白糖、琼脂、甘露醇、PP_(333))的L_(16)(4~5)正交试验对罗勒试管苗离体保存的影响。试验结果表明:罗勒试管苗在MS+20g·L~(-1)白糖+9g·L~(-1)琼脂+10g·L~(-1)甘露醇+7mg·L~(-1)PP_(333)的培养基中保存效果最好,保存4个月时,存活率为73.7%,适宜的继代周期是3个月;添加9mg·L~(-1)PP_(333)的MS培养基和添加0.3mg·L~(-1)ABA的MS培养基也都有利于罗勒试管苗的离体保存。3.2百里香试管苗离体保存以百里香试管苗为试验材料,研究了添加不同浓度PP_(333)的MS培养基及培养基MS+20g·L~(-1)白糖+9g·L~(-1)琼脂+10g·L~(-1)甘露醇+7mg·L~(-1)PP_(333)对百里香试管苗离体保存的影响。试验结果表明:百里香试管苗在MS+20g·L~(-1)白糖+9g·L~(-1)琼脂+10g·L~(-1)甘露醇+7mg·L~(-1)PP_(333)的培养基中保存效果最好,保存6个月时,存活率为36.7%,适宜的继代周期是4个月;添加11mg·L~(-1)PP_(333)的MS培养基也有利于百里香试管苗的离体保存。3.3香蜂花试管苗离体保存以香蜂花试管苗为试验材料,研究了不同浓度ABA及不同因素(白糖、琼脂、甘露醇、PP_(333))的L_(16)(4~5)正交试验对香蜂花试管苗离体保存的影响。试验结果表明:香蜂花试管苗在MS+20g·L~(-1)白糖+9g·L~(-1)琼脂+10g·L~(-1)甘露醇+7mg·L~(-1)PP_(333)的培养基中保存效果最好,保存5个月时,存活率为44.4%,适宜的继代周期是3个月;添加0.3mg·L~(-1)ABA的MS培养基也有利于香蜂花试管苗的离体保存。3.4迷迭香愈伤组织离体保存以迷迭香愈伤组织为试验材料,研究了不同因素(蔗糖、PP_(333)、甘露醇、甜菜碱)的L_(16)(4~5)正交试验对迷迭香愈伤组织离体保存的影响。试验结果表明:迷迭香愈伤组织在MS+1.0mg·L~(-1)2,4-D+5g·L~(-1)甘露醇+12mg·L~(-1)PP_(333)+0.10g·L~(-1)甜菜碱+30g·L~(-1)蔗糖的培养基中保存效果最好,可使迷迭香愈伤组织的继代周期延长至40d。4罗勒等唇形科香花植物试管苗离体保存过程中的SOD、CAT、POD酶活性的变化以培养基处理13:MS+20g·L~(-1)白糖+9g·L~(-1)琼脂+10g·L~(-1)甘露醇+7mg·L~(-1)PP_(333)及MS培养基中保存的罗勒试管苗、百里香试管苗、香蜂花试管苗为试验材料,分别对其保存过程中的SOD、CAT、POD酶活性的变化进行了测定。测定结果表明:在整个保存过程中,罗勒、百里香、香蜂花试管苗的SOD、CAT、POD酶活性的变化趋势都是先上升后下降;与MS对照比较,处理13培养基上保存的试管苗的SOD、CAT、POD酶活性总是高于MS培养基上保存的试管苗的SOD、CAT、POD酶活性,且明显推迟了SOD、CAT、POD酶活性最高峰出现的时间。   

[关键词]:

罗勒;百里香;香蜂花;迷迭香;离体繁殖;离体保存;酶活性

[文献类型]: 硕士论文
[文献出处]:

福建农林大学2012年


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