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第23章病毒感染的实验诊断.doc

花匠小妙招
2025-07-09 19:06

第23章病毒感染的实验诊断

一、教学大纲要求

（1）标本的采集、处理与运送注意事项

（2）病毒形态学检查方法

（3）病毒的分离与鉴定程序及方法

（4）病毒感染的快速诊断方法

二、教材内容精要

（一）标本的采集、处理与运送

根据临床诊断及病期采集不同的标本，用于病毒学分离和鉴定的标本应在病程初期或急性期采集，要进行预处理才能用于接种和其他方法的检测。病毒的抵抗力通常较弱，在室温下很快灭活，标本采集后应立即送到病毒实验室，暂时不能检查或分离培养时，应将标本放入冻存液并加入甘油或二甲基亚砜（DMSO）以防止反复冻溶使病毒灭活，存放在-70℃低温冰箱内保存。

（二）病毒形态学检查

1.光学显微镜

仅用于大病毒颗粒（如痘类病毒）和病毒包涵体的检查。

2.电子显微镜检查法

（1）电镜直接检查法

某些病毒感染的早期，临床标本中就可出现病毒颗粒。标本经粗提浓缩后用磷钨酸盐负染，电镜下直接观察，可发现病毒颗粒，获得诊断。

（2）免疫电镜检查法

将病毒标本制成悬液，加入特异性抗体、混匀，使标本中的病毒颗粒凝集成团，再用电镜观察，可提高病毒的检测率。本法比电镜直接检查法更特异，更敏感。

3.超过滤法

用不同孔径的火棉胶滤膜过滤病毒悬液，将获得的滤液接种于组织细胞、实验动物或鸡胚，或用血凝试验来测定病毒是否通过滤膜，从而估计病毒的大小。

4.超速离心法

根据病毒大小的不同，其沉降速度也不同。可用超速离心法测得病毒的沉降系数（S），借以计算病毒的大小。