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常见植物的脱毒与快速繁殖技术.pptx

花匠小妙招
2025-08-27 11:40

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1、,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第,9,章常见植物的脱毒与快速繁殖技术,植物组织培养,大家好！,本章主要内容,(4,学时,),蔬菜的脱毒与快繁,果树的脱毒与快繁,花卉植物的脱毒与快繁,农作物的脱毒与快繁,药用植物的试管快繁,树木的脱毒与快繁,第,9,章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,本章教学目的与要求,(1),掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁殖方法；,(2),掌握苹果的脱

2、毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技术；掌握草莓的脱毒与快繁技术；,(3),掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；,(4),掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术；,(5),掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术；,(6),掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。,第,9,章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,第一节蔬菜的脱毒与快繁,第9章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,马铃薯,蕃茄,第一节蔬菜脱毒与快繁,马铃薯的组织培养,第一节蔬菜脱毒与快繁,微型薯,第一节蔬菜脱毒与快繁,马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适应性广，营养价

3、值高，耐贮藏适运输，既是一种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广的一种作物。,危害有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。,马铃薯病毒可使块茎产量减少50%80%。,第一节蔬菜脱毒与快繁,马铃薯病毒的种类,（一）、马铃薯特性和生物学习性,形态特性,根根系由出生根和匍匐根组成。,茎分地上部分和地下部分。,叶全缘，心脏形。,花为聚伞花序。,果实浆果。,第一节蔬菜脱毒与快繁,马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。,发芽适温为1218。,地上茎叶生长温度为1721。,

4、块茎形成要求昼温1424，夜温1214。,结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表面粗糙和薯形不整。,第一节蔬菜脱毒与快繁,01,02,2、生物学习性,通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒。,01,马铃薯脱毒技术,02,第一节蔬菜脱毒与快繁,全国现有马铃薯播种面积,300,多万公顷，每年需合格种薯,45,亿公斤，脱毒原种,4,亿公斤，脱毒小薯或微型薯,45,亿粒。,我国的马铃薯平均单产仅为,13.60,吨,/,公顷，是世界单产最高国这瑞士（,48.80,吨,/,公顷）的,1/4,

5、。最主要的因素就是种薯质量差，品种布局不合理。,我国马铃薯栽培现状,第一节蔬菜脱毒与快繁,01,02,微茎尖组织培养-诱导出苗-联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定-脱毒试管基础苗。,固体、液体培养基相结合-扩繁基础苗-在防虫网室栽植或封闭温室扦插-原原种（或称脱毒小薯）。原原种-原种1代-原种2代-良种1代-良种2代。,脱毒种薯生产程序,第一节蔬菜脱毒与快繁,一般在室内发芽，芽经热处理（38）2周。然后取1厘米的茎尖，水洗干净，无菌条件下先用70的酒精浸组织15-20秒，再用2次氯酸钠溶液浸泡4-5min，然后用无菌水冲洗3次。,01,茎尖培养脱毒,02,第一节蔬菜脱毒与快繁,03,（1

6、）茎尖消毒,把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.20.3毫米，随即接种于MS液体培养基上，每升加0.1mgNAA、0.2mgGA3、0.5BA，2%蔗糖，p H值5.8。,第一节蔬菜脱毒与快繁,取材和接种,01,02,温度：2125,光照度：2000-3000 lx,光照时间：12h/d,2-3周长愈伤，4-5周长绿点，3-6月长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。,第一节蔬菜脱毒与快繁,培养条件：,培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒）鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次）采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。,取试管苗单节切段扦插在

7、（或平放）固体培养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发育成510cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖58倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。,第一节蔬菜脱毒与快繁,（2）继代和生根,MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖；,20-25，3000-4000LX，14-16hr光照；,每3周继代一次，单芽茎段约1厘米；,原则试管苗用2年3年。,第一节蔬菜脱毒与快繁,马铃薯继代培养基：,第一节蔬菜脱毒与快繁,马铃薯试管苗,炼苗室温度：白天,2327,，夜间不低于,14,。,炼苗具体方法：移植前,7d,左右，将长有,35,片叶、高,23

8、cm,的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。,(3),驯化,第一节蔬菜脱毒与快繁,指示植物鉴定,在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，病毒、病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。,鉴定寄主的准备,马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。,第一节蔬菜脱毒与快繁,（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料,叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释倍作为接种物(混入目的金刚砂)。,用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右手指蘸取接种液，均匀的在叶背

9、面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水洗净，放置在的防虫室中，一般天可发病。,第一节蔬菜脱毒与快繁,.接种液制备及接种,直接块茎繁殖,扦插繁殖,组织培养切段繁殖,继代培养,低温保存,马铃薯无病毒株的繁殖,第一节蔬菜脱毒与快繁,第一节蔬菜脱毒与快繁,形态特征和生物学习性,番茄的叶片为长羽状，在叶轴上生有裂片，顶生裂片，小裂片，间裂片，这些裂片是叶的深裂，缺刻的变化。两性花，聚伞花序，浆果。,蕃茄耐低温，喜光照，对水分需求量极大，喜肥，适于微酸性或中性土壤。,二、番茄的组织培养,外植体：幼嫩叶片。,消毒：用0.1%升汞浸泡4min，再用无菌水冲洗3-4次。,愈伤组织培养

10、条件：MS+BA2mg/L+IAA1mg/L，温度25，每天光照10h，光照度2000lx。,分化培养：分化培养基MS+BA4中。,生根培养：MS+IAA2 mg/L。,炼苗栽植：将培养有根试管苗的瓶口打开。煅炼3d后取出，洗去根上带有的培养基，移栽到营养土中，浇透水，并罩上塑料薄膜，以保温保湿，4-5d后去掉薄膜，新叶长出时即定植田间。,第一节蔬菜脱毒与快繁,（二）、番茄的组织培养,外植体制备：授粉后30-40d收获果皮完整的果实，果实放入95%乙醇中表面消毒，浸在5%NaCI中5min，用无菌蒸馏水充分淋洗。果实放在无菌吸水纸上，除去种子上的胶状复被。,培养基：启动：MS+硫胺素0.3mg

11、/L+2,4-D2mg/L+椰乳100ml/L，pH6.0；继代：MS+2,4-D2mg/L；分化：MS+BA1.5mg/L；生根：MS+NAA2mg/L。,培养条件：愈伤组织启动和继代，用暗培养，27。芽再生和生根在室温20-30.16h/d 的光照，2000lx。,第一节蔬菜脱毒与快繁,（三）、番茄的胚培养,第二节果树的脱毒与快繁,葡萄,苹果,第9章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,草莓,一、苹果的脱毒与快繁,（一）、苹果的形态特性和生物学特性,苹果（Malus pumila）属落叶乔木，树木高大。果实为假果。,苹果喜凉；喜光；适合在微酸性到中性土壤中栽种。,第二节果树脱毒与快繁,01,0

12、2,病毒种类：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒等。,微尖嫁接脱毒：砧木：去顶的离体培养幼苗，接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶，移栽即可。,热处理脱毒：把植株置于38 下25-50天。,茎尖培养脱毒mm的茎尖离体培养。,脱毒苗的鉴定：抗血清法，电子显微镜法，ELISA法、指示植物法。,第二节果树脱毒与快繁,（二）、脱毒技术,材料与消毒：带芽或茎尖的茎段；常规消毒，用无菌水洗35次；切茎尖约0.10.5mm。,芽的诱导：MS或LS+BA2+300500CH或LH+3%蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。,继代增殖培养：MS+BA0.51+CH300 培养基上增殖。,生根培养：1/2

13、MS或 White，Nitsh附加IAA1、IBA0.2和GA33 等。,第二节果树脱毒与快繁,（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术,选材与预处理：选取中心花蕾吐红，周围花蕾明显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰箱中1-3预处理。,消毒：70%的酒精浸约0.5min，再在10%漂白粉上清夜中浸1520min。,胚状体诱导：接种到MS+2,4-D0.4+KT0.2+IAA4+38%蔗糖培养基上，2530下培养。,生根：同茎尖脱毒中所用方法。,第二节果树脱毒与快繁,（四）苹果花粉培养,取材消毒：取授粉3050d内的幼果，用70%酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。,启动培养：接种在BA0.25+IAA0

14、.5的1/2MS培养基上。培养条件为2530和15002000lx光照14h。,分化增殖：移植到加有BA0.51.0和CH300的1/2MS培养基上，在光下培养条件同上。,生根培养：同茎尖培养。,第二节果树脱毒与快繁,（五）胚培养,二、葡萄的脱毒与快繁,（一）、形态特征和生物学习性,葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄地上部分的茎细。节上具有卷须，可向上攀援。叶近圆型或卵型，,3,5,裂。,葡萄原产于温带地区，不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱，在,5,7,时即受冻。,第二节果树脱毒与快繁,选材接种：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取12的茎尖。消毒。分离出约2长的茎尖，接种到培养基上。,培养基：MS培养基（无机

15、盐减半为好），再添加BA12，NAA0.01，LH100，蔗糖2%，琼脂0.6%，而B5培养基愈伤组织化严重，茎尖生长不好。,苗分化：BA0.5，同时添加GA30.2，黑暗处理可促进幼茎的伸成，提高成苗率。,根分化：将苗转入MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中进行生根。,第二节果树脱毒与快繁,（二）、葡萄的组织培养,第二节果树脱毒与快繁,葡萄无病毒苗的培养,葡萄受到26种病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄的长势减弱，产量降低，果实的糖分含量减少，风味变劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病。,葡萄无性系处理：材料置于38，CO2120010-6的人工空气侯箱内。经30min处理，较易从枝条尖端或

16、休眠芽中除去扇叶病毒。,将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然后在38的环境中保持2个月，以后取出枝条和接种芽继续生长。,直接将葡萄蔓浸泡在50的温水中1020min，可以治疗皮尔斯病，但不能治疗黄点病及卷叶病。,葡萄无病毒苗的培养,1、热处理脱毒：,第二节果树脱毒与快繁,2,、组织培养脱毒技术,（,1,）、茎尖接种后变绿、增大期的培养：在,25,，相对湿度,80%,，,16h,的长日照条件下水培生成的嫩茎取,0.2,0.3mm,茎尖接种于,1/2MS,，添加,NAA0.1,，,BA1.0,，,Kt0.5,，腺嘌呤,4.0,，蔗糖,30g/L,，琼脂,6.0,，,pH5.8,培养基上。

17、,（,2,）从畸形叶和茎叶伸长期：采用,1/2MS,，添加,IAA0.2,，,BA0.1,，,KT0.5,，腺嘌呤,4.0,，蔗糖,30g/L,的培养基。,（,3,）地上部和地下部的伸长期：,Galzy,（,1964,）培养基，添加,NAA0.1,。,（三）、葡萄无病毒苗的培养,第二节果树脱毒与快繁,三、草莓的脱毒与快繁,（一）、形态特征和生物习性,草莓（,Fragaria,）属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。,草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。,第二节果树脱毒与快繁,（二）、草莓脱毒苗的培养,第二节果树

18、脱毒与快繁,将草莓植株在4041温度下处理46周。,热处理脱毒,初代培养：取草莓顶芽，用自来水流水冲洗24h，然后剥去外层叶片，消毒，切取0.2mm的茎尖。接入MS+BA0.25+NAA0.25培养基中。培养条件为2225，日照1618h光强3000lx。,微茎尖脱毒,草莓脱毒苗的培养,继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入MS培养基中，令其长大。并进行分株，扩大繁殖。,生根培养：在培养基中加入NAA1或IBA1。,第二节果树脱毒与快繁,第三节花卉植物的脱毒与快繁,第9章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,01,兰花系兰科(Orchidaceae)植物，在自然条件下主要靠分株繁殖，繁殖率一年只有几倍

19、，所以无法大量繁殖生产，而且由于长期进行无性繁殖，带病毒株增多，逐渐使种性降低，影响生长。,02,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,一、兰花的脱毒与快繁,（一）蝴蝶兰属的培养,材消毒：将芽除去叶后，用水冲洗，再用10的漂白粉表面灭菌15min。除去叶原基后，用5的漂白粉中灭菌l0min，以后用无菌水冲洗35次。切取茎尖和腋芽，约23mm，接种到培养基中。,养基：采用Vacin和Went培养基，添加15CM进行液体培养，或加9gL的琼脂进行固体培养。,件：为温度25，光照强度2000Lx，照明1624h。液体培养基用60rmin的速度进行振荡培养。培养1个月即可形成原球茎球状体，即可进行继代增殖。

20、,茎尖的培养,01,脱毒与快繁,第三节花卉植物的,02,（一）蝴蝶兰属的培养,采芽：将带腋芽的花梗进行冲洗，用10的漂白粉溶液表面灭菌20min，除去腋芽的苞叶，再在5的漂白粉溶液中表面灭菌3min，无菌水冲洗净。仅取腋芽，接种到培养基上。,培养基和培养条件：用德兰属1号培养基培养原球状体，育苗用卡德兰属1号加10香蕉汁；培养条件是光照强度2000Lx，光照时间每天13h，保持恒温25。,继代培养：用原球茎球状体繁殖。,育苗：不切块继续培养即可分化产生叶片，移到育苗的培养基，36个月可得到能栽植的苗。,2.花梗腋芽的培养,01,脱毒与快繁,第三节花卉植物的,02,取材：叶片是从试管内培养的

21、材料上切取。取展开叶最上部先端、中央或基部约68mm2。,培养基和培养条件：用 Kyoto改良培养基，加复合肥料3.5gL、肌醇1000、烟酸1、维生素B11、NAAl、腺嘌呤10、BAl0、蔗糖2、琼脂1.0。25恒温，光照500Lx,日照16h。,继代培养：用改良的Kyoto培养基进行继代培养，或在Vacin和Went培养基中去掉蔗糖和琼脂，加20的CM的液体培养基进行振荡培养。,育苗：原球茎球状体23个月即可萌芽，形成细苗，以后转移到Kyoto培养基，加10的香蕉汁，经数月后可得到能移f栽的大苗。,3.叶片的培养：,01,脱毒与快繁,第三节花卉植物的,02,（一）蝴蝶兰属的培养,第三节

22、花卉植物的,（二）、卡特兰的培养,脱毒与快繁,取材和消毒：选择510cm长的嫩茎，从基部采芽。先用流水冲洗，切去叶片酒精，漂白粉等消毒。,培养基和培养条件：MS基本培养基，附加维生素，氨基酸，NAA0.186mgL，Kt0.02mgL，GA30.173mgL，蔗糖30gL，琼脂6gL，不加CM。启动培养温度1520，成活以后，则保持在25。光照强度500-2000Lx，照明1622h。,防止培养材料变褐方法：(1)采芽后，用无菌水冲洗再接种(2)在培养基中加(50100)10-6芸香甙。(2)开始培养到成活，保持温度1520。(4)调pH值至5.5，减轻褐化，提高成活率。(5)避免68月采芽

23、（由于多酚类物质的积累，褐化较严重）。,二、香石竹的组织培养,香石竹为石竹科石竹属草本植物，原产南欧地中海北岸。须根系，茎直立，多分枝，株高,70,100cm,，茎部半木质化。叶线状披针形，全缘，叶质较厚，上半部向外弯曲，对生，基部抱茎。花通常单生或,2,3,朵聚伞状排列。,石竹是一种中日性花卉。喜干燥、通风，喜冷凉，最适宜的生长温度为,19,21,，忌高温多湿。喜保肥、通气、排水良好的腐殖质或砂质壤土，最适宜的土壤,pH,值为,6,6.5,。,（一）形态特性和生物学习性,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,脱毒与快繁,取材灭菌mm的茎尖。,培养基：选用MS或White培养基。附加BA或KT 05

24、2mgL(单位下同)；NAA、IAA浓度为022，2,4-D为0.11。,分化增殖：于MS附加BA2，IAA0.5进行分化；于MS附加BA0.52、IAA0.5进行丛生芽诱导。,生根：于1/2MS上，温度2025，光照强度20001x光照1012h/d。,第三节花卉植物的,（二）、组织培养育苗,三、菊花的组织培养,菊花系多年生植物，株高,60-180cm,，茎直立粗壮，多分枝。叶形大，互生，叶片有深缺刻。花序单生或聚生，边缘为舌状花，中部为筒状花，也有全为舌状或筒状花的，形状各异，种子为细小的瘦果，中间膨大，两端突出。,适宜的生育温度为,15-25,，喜阳光充足，通风良好，在光照条件下生长健

25、壮。比较耐旱，不耐潮湿，忌低洼积水。秋菊、冬菊为典型的短日照植物，只有光照长度在,12h,以下时才能开花,（一）形态特性和生物学习性,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,（二）、菊花的组织培养快速繁殖,1,、取材：外植体很多，如茎段、侧芽、叶、花序梗、花序轴等，但最好采用茎尖或侧芽，其次是花序轴。经一般灭菌过程后即可接种。,2,、培养基与培养条件：,MS,、,B5,、,N6,、,White,均可，多用,MS,。附加,BA2,3mg,L,，,NAA0,02,0,2mg,L,。于,22,28,（,24,26,最佳）。光照,12,16h/d,，光强,1000,4000Lx,。,第三节花卉植物的,脱毒

26、与快繁,（二）、菊花的组织培养快速繁殖,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,继代培养：可通过茎尖直接分化出新芽，或经愈伤组织分化出新芽；也可用茎切段作微型扦插繁殖（MS或MS+NAA0.1）。,生根和移栽：将无根幼苗转入12 MS+NAA(或IBA)0.1的培养基中，经两周即可生根（培养条件同上）。,（三）、菊花花瓣的培养,1,、取材：在菊花开花前,2,3d,将整个花蕾剪下，冲洗十几分钟，用,75,的酒精浸泡,10,15min,进行表面灭菌，后用无菌水冲洗两次，再用,10,的漂白粉澄清液浸泡,20min,后。切取舌状花约,5mm,见方大小。,2,、培养基与培养条件：,MS,培养基，添加,BAl,3

27、mg/L,，,NAA0.5,2mg,L,。置于温度,25,左右，光照强度,2000Lx,，每天照光,12h,的条件下培养，或获得愈伤组织。,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,第三节花卉植物的,（四）、菊花的脱毒,脱毒与快繁,危害菊花的病毒有：菊花斑纹病毒；菊花矮缩类病毒；菊花轻斑驳病毒；番茄不孕病毒。此外还有畸花病毒、绿花病毒、褪绿斑驳病毒、花叶病毒等。,茎尖培养脱毒：取顶芽或腋芽经表面消毒后，切取0.5mm以下茎尖进行培养脱毒。,热处理脱毒：在3536的条件下栽培2个月，可以达到脱毒的效果（但是热处理只能除去菊花矮缩类病毒和番茄不孕病毒）。,脱毒与快繁,第三节花卉植物的,非洲菊(Gerbe

28、ra hybrida)属菊科大丁草属，多年生宿根草本花卉。全株具细毛，叶片基生，椭圆至长椭圆形。花序顶生，舌状花较大，排列成一轮或数轮。,非洲菊性喜冬季温和，夏季凉爽的气候条件。最适生长温度为2025。45月和810月为盛花期。喜阳光充足的环境。土壤要求有机质丰富、排水良好、pH值为66.5的微酸性壤土。,（一）、形态特性和生物学习性,四、非洲菊的组织培养,（二）、非洲菊组织培养育苗,1,、取材消毒：常用花托作为外植体，用,0.1,的吐温浸泡,10,15min,，取出洗净后再放入,0.1,氯化汞中消毒,20min,。将花托切成,2-3mm,见方的小块。,2,、培养基与培养条件：初代培养基为,M

29、S+BA2mg,L(,单位下同,),十,NAA0.2+IAA0.2,。培养条件为,24,土,2,，光照强度为,2000,30001x,，每天光照,12,16h,。,3,、分化生根：转入,MS+Kt5+IAA0.2,培养基进行分化培养。待苗高,2cm,时，转移到,I,2 MS,十,NAA0.1,生根培养基中生根。,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,脱毒与快繁,第三节花卉植物的,矮牵牛(Petunia bybrida)，又名碧冬茄，茄科，矮牵牛属。多年生草本植物，株高4060cm，茎直立或卧倒，全身被短毛。上部叶片对生，中下部叶片互生，卵圆形。花单生于枝顶或叶腋间，花冠喇叭状，花色丰富，朔果卵形。

30、,矮牵牛原产南美洲。喜温暖，向阳和通风良好的环境条件，不耐寒，耐暑热，在炎热的夏季仍能正常开花，要求排水良好疏松的酸性沙质土地。,（一）、形态特性和生物学习性,五、矮牵牛的组织培养,（二）、矮牵牛组织培养育苗,1,、叶片培养：选择嫩叶作为外植体，进行常规消毒后将其切成,5mm,见方，接种到,MS+BA0.5,的培养基上诱导愈伤组织及丛生芽。所得芽丛接种于,MS+BA0.05,的继代培养基上。,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,2,、茎尖茎段接种：选择茎尖、带芽的茎段作为外植体。消毒后，切取茎尖,0.5cm,或带腋芽茎段,lcm,接种到,MS+BA1+IBA0.02,的诱导培养基上。,1,周后，芽

31、开始萌动，逐渐长大成新梢。继代可用切割茎段法进行。,六、百合的组织培养,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,形态特性和生物学习性,百合是百合科(Liliaceae)百合属植物的统称，为多年生的草本植物。鳞茎无皮，广卵形，白色或黄白色，茎高3090cm，直立，上叶多而散生，披针形。花单生或数花横向着生茎顶，花朵呈喇叭状、筒状，有清香。,百合属于球根花卉，要求肥沃、疏松和排水良好的沙壤土，以利于鳞茎发育。百合喜微酸性土壤，土壤pH值在5.56.5最为适宜。,（二）、繁殖方法,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,分球：使用百合老鳞茎(母球)生长过程中于茎轴上逐渐形成小鳞茎进行繁殖。,鳞片扦插：使用成熟鳞叶

32、进行扦插。,叶插及分珠芽：使用地上茎进行扦插，或使用腋生珠芽进行繁殖。,播种。,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,1、花器的组织培养,1,取材和灭菌：采取开花前数日的花蕾。花蕾的表面用酒精灭菌，再在酒精灯上灼烧数秒钟，在无菌培养皿内剥开花蕾，花丝，子房，花柱等分别切取35mm长，接种到培养基上。也可用花瓣和萼片培养。,2,培养基及培养条件：采用MS，KC等培养基，蔗糖浓度以7.0为适，发芽和子球形成率可达90左右。光照度2000Lx，每天照用15h，保温20。,3,百合组织培养育苗,2,、鳞片组织培养,初代培养：切取,0.5cm,见方鳞片小块接人,MS+2,4-D1+IAAI+Kt0.5,培养基

33、中，置于,20,土,2,，照光,9-10h,d,，光强,1200Lx,条件下培养。诱导愈伤组织及不定芽。,（三）、百合组织培养育苗,第三节花卉植物的,脱毒与快繁,继代培养：将愈伤组织转移到分化培养基（,MS+NAA2+IBAO.4+Kt0.05,）上，,10,周后，可分化出许多大小不等的鳞茎，并在小鳞茎的基部长出许多粗壮的根。,第四节农作物的脱毒与快繁,第9章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,第四节农作物的,一、甘薯的脱毒与快繁,脱毒与快繁,甘薯（Ipomoea batatas L.Lam）属于旋花科，是一年生植物。我国近年来甘薯种植面积达到666.7万公顷，占世界的80%以上。病毒病成为

34、我国甘薯生产的最大障碍之一。,如：甘薯花椰菜花叶病毒（SPCLV），甘薯羽状斑驳病毒（SPFMV），甘薯潜隐病毒（SPLV），甘薯脉花叶病毒（SPVMV），甘薯轻斑驳病毒（SPMMV），甘薯黄矮病毒（SPYDV），烟草花叶病毒（TMV），烟草条纹病毒（TSV），黄瓜花叶病毒（CMV）等。,（一）、甘薯脱毒,1,、取材：取枝条，去叶切成数段。每段带一个腋芽。,2,、消毒：常规消毒。,3,、剥离茎尖：剥去顶芽和腋芽上较大的幼叶，切取,0.3-0.5,毫米含,1-2,个叶原基的茎尖组织，接种在培养基上。,4,、茎尖培养培养基与培养条件：培养基为,MS+0.1-0.2mg/L IAA+0.1-0.2m

35、g/L BA,；培养于温度,25-28,，光照度,1500-2000lx,，光照,14h/d,的条件下。,5,、茎尖苗的初级快繁：将小植株切段进行短枝扦插。切段直插于,MS,培养基中，培养条件同茎尖培养。,6,、脱毒鉴定：病毒病症状学诊断法、指示植物检定法、电子显微镜检定法、血清学检测法,第四节农作物的,脱毒与快繁,（二）、甘薯的快繁,1,、脱毒苗的快繁：可使用,1/2,或,1/4MS,（大量元素）培养基进行增殖。,2,、原原种的繁育：在无病毒土壤上种脱毒苗，让其结薯，即为原原种薯。,3,、原种的繁育：以原原种为种植材料在无病毒土壤中栽种，结薯即为原种。,4,、种薯的繁育：种薯可分为不同的等

36、级，一级种薯的生产要求：在隔离地块上栽培原种，地块四周,500,米以内的范围内不栽甘薯，种薯每种一年降一级。,第四节农作物的,脱毒与快繁,（三）、脱毒试管苗的大规模移栽技术及管理方法,培育壮苗,适当炼苗,精心移栽,控制湿、温、光等条件,适时定植,严防病虫害,第四节农作物的,脱毒与快繁,第五节药用植物的试管快繁,第9章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,一、芦荟的试管快繁,百合科芦荟属植物共有,300,多种，,为多年生常绿植物，分布于热带和来,热带地区。由于芦荟具有多种药用功效,和保健美容作用，近年来，芦荟产业已经在国内外成为新的开发热点。,芦荟植株生长数年后才开花结实，种子一般也很少，而且种

37、子细小，又不耐保存，存放一年后发芽率就很低。,生产上常用的扦插和分株法都不能在短时间内提供大量种苗。因此，只有通过组织培养快繁方法，才能生产出大小一致、性状稳定的优良种苗。,第五节药用植物的,试管快繁,一、芦荟的试管快繁,1,初代培养物的建立：采用茎段和腋芽作为外植体，以,MS,为基本培养基，,NAA,为,0.2mg/L,，,BA3-5mg/L,2,取材与消毒：截取上端嫩芽或侧芽，将生长点切成,1-2cm,的小块，冲洗干净，然后用,2%,洗洁精或饱和洗衣粉摇动,5,分钟。然后用,70%,的酒精灭菌,1,分钟，立即用,0.15%,升汞溶液再灭菌,10,分钟。最后用无菌水冲洗,4-5,次。,3,

38、培养条件：温度,26,3,，光照,10-12h/d,，照度为,1000-1500lx,，空气湿度大，有利芦荟生长。,第五节药用植物的,试管快繁,桔梗的组织培养,试管快繁,第五节药用植物的,01,桔梗为桔梗科属多年生草本植物。株高3090cm。根肥大肉质，圆锥形，茎直立，叶片卵状至卵状披针形，先端尖，基部楔形或近圆形，边缘有不规则锯齿，花单生或数朵成疏生的总状花序；花冠呈状，蓝紫色或白色，大型，直径35cm。蒴果倒卵圆形，成熟时先端裂开。,桔梗喜欢生长在阳光充足，温暖湿润，雨量充沛的丘陵地区。,（一）、形态特性和生物学习性,02,（二）、桔梗的快繁,、播种：用种量,0.5-1,公斤,/,亩，

39、播后畦面盖稻草保湿。播后半月左右即可发芽出苗。,、组织培养：一般用茎尖和茎段作为外植体，接种和培养方法参照其他作物的方法。,、移栽：桔梗喜肥，生长期间宜多施追肥，一般结合中耕除草时追肥。第一次亩施稀淡人畜粪废水,1000,1500,公斤，第二次亩施猪烘水,1500,2000,公斤，促进根部生长肥大，注意雨季排水。,第五节药用植物的,试管快繁,第六节树木的脱毒与快繁,第9章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,毛白杨的快繁,无菌苗的建立采用休眠芽作外植体，经消毒后，削取2mm长，带有23个幼叶的茎尖，接种于MS+0.5mg/LBA+水解乳蛋白100mg/L的预培养基上，经56d后，选择未污染的茎

40、尖转MS+0.5mg/LBA+0.02mg/LNAA+赖氨酸100mg/L上。,培养室温度2527,日光灯连续照光，光照度为1000lx左右。经23个月培养，部分茎尖即可分化出芽。,第六节树木的脱毒与快繁,第六节树木的脱毒与快繁,一、毛白杨的快繁,2,、扩大繁殖,（,1,）茎切段生芽扩大繁殖法：取诱导出的幼芽，从基部切下，转接到新的生根培养基上。（,MS+0.25mg/L IBA+,盐酸硫胺素,10mg/L+,蔗糖浓度为,1.5%,）。,（,2,）叶切块生芽扩大繁殖法：从叶基部中脉处切取,11.5cm,并带有约,0.5cm,长叶柄的叶切块，转接到诱导培养基上（,MS+0.25mg/L IA

41、A+3%,蔗糖,+7%,琼脂）。约经,10d,培养，即可从叶柄的切口处观察到有芽出现，之后逐渐增多成簇。,第六节树木的脱毒与快繁,3、移栽与管理：打开瓶口炼苗，逐渐降低湿度，并逐渐增强光度，进行驯化，使新叶逐渐形成蜡质，产生表皮毛，逐渐恢复气孔功能，减少水分散失。初始光照应为日光的1/10,每3d增加10%，经过1030d炼苗即可移入大田，避免中午强光。湿度，开始3d饱和湿度，其后每23d降低5%8%，直到与大气相同。,一、毛白杨的快繁,第六节树木的脱毒与快繁,二、河北杨的快繁,1,、无菌苗的建立,（,1,）取材以春季萌发的新梢或由根部萌发的新枝条作为外植体来源。截取嫩枝上部,45cm,

42、作为接种材料。,（,2,）消毒、接种及培养条件以,70%,的酒精消毒数秒，再用,0.1%0.2%,的氯化汞消毒,510min,，然后用无菌水冲洗,34,次。材料接种后置于,25,2,培养室内进行培养，每天用日光灯照明,13h,，光照度为,20003000lx,。,（,3,）芽的分化培养基是,1/2MS,大量元素,+MS,微量元素,+0.3mg/L BA+0.05mg/L NAA+2.5%,蔗糖,+0.5%,琼脂，,pH5.8,。,扩大繁殖采用分割带芽愈伤组织进行继代培养，培养基为1/2MS大量元素+MS微量元素+MS有机成分+0.3mg/L BA+2%蔗糖+0.6%琼脂。,01,根的诱导

43、当不定芽长至23cm高时，将其转接到生根培养基上（1/2MS大量元素+MS微量元素+MS有机物+0.02mg/L NAA+1.5%蔗糖+0.06%琼脂）。,02,移栽管理,03,二、河北杨的快繁,第六节树木的脱毒与快繁,本章小结：,(1),马铃薯茎尖培养脱毒程序：,取材；,消毒；,接种；,培养基；,病毒鉴定。病毒鉴定方法主要有指示植物法、症状鉴定法。,(2),苹果花粉培养阶段组成：,选取适期花蕾；,花蕾预处理和消毒；,诱导胚状体形成；,诱导生根；,移栽。,(3),苹果的栽培管理要注意几个问题：,育苗技术；,土壤改良；,施肥方法；,灌溉时期；,整形和修剪技术。,(4),葡萄茎尖培养经过下列变

44、化：茎尖接种后变绿，增大期；形成畸形叶期；芽形成和伸长期；形成小叶和叶伸长期；生根期；地上部和地下部伸长期；上盆期,.,(5),在葡萄栽培棚架是应用最广泛的类型。,第,9,章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,本章小结：,(6),草莓脱毒苗的培养主要有微茎尖培养和花粉培养两种。一般用嫁接法进行病毒鉴定。无毒苗的繁殖程序分为五步：鉴定出无毒苗、原种种苗培养、原种种苗繁殖、良种种苗繁殖和生产用苗繁殖。,(7),蝴蝶兰脱毒：茎尖培养,原球茎,继代培养,增殖,生根炼苗。通过原球茎增殖的方法，可大大提高繁殖速度，实现蝴蝶兰生产的工厂化育苗。,(8),香石竹的茎尖脱毒培养一般结合热处理：将带毒植株进行盆栽，

45、放入人工控制箱内，采用,38-40,高温处理,6-8,周，再切,1mm,大小的茎尖培养。,第,9,章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,本章小结：,(9),菊花的继代增殖，多数是诱导愈伤组织产生丛生芽而获得大量的试管苗。菊花生根有两种方法：嫩茎试管生根；无根嫩茎的扦插。,(10),百合经茎尖培养脱毒、鉴定合格后，可通过两种增殖方式：,经愈伤组织增殖；,是诱导分化不定芽。,(11),侵染甘薯的病毒有十几种，甘薯脱毒快繁工艺流程：,脱毒；,快繁。脱毒试管苗栽培管理注意：培育壮苗；适当炼苗；精心移栽；控制湿、温、光等条件；适时定植；严防病虫害。,(12),桔梗的栽培管理注意：,播种,;,移栽,;,桔梗喜肥，生长期间宜多施追肥。,第,9,章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,谢谢!,第,9,章常见植物的脱毒,与快速繁殖技术,