( 3 )珠心组织培养脱毒法 病毒是通过维管组织传播,而珠心组织和 维管束系统无直接联系,故可以通过珠心组织 离体培养获得无病毒植株。 目前已用该方法去除了柑橘银屑病、叶脉 突出病、柑橘裂皮病、速衰病等病毒。 缺点: 会有 20%~30% 左右的变异率,同时无毒苗 苗期较长。柑橘要 6~8 年才能结果。 31 32 3. 微体嫁接离体培养脱毒法 应用微体嫁接的原因 : 木本植物茎尖培养难以生根形成植株。 具体做法: 将极小的茎尖( 0.14mm~1.0mm )作为接穗嫁接到 不带病毒的种子实生苗砧木上,然后将砧木、接穗一 起在培养基上培养。 优点: 接穗在砧木上易成活,故可用很小的茎尖来培 养,去除病毒几率大,获得无病毒 苗的可能性大。 微嫁接要求的 剥离技术高 , 嫁接成活率与接穗大小 呈正相关 ,而脱毒率与接穗大小呈负相关 33 微体嫁接法 (micrografting) 脱除病毒的关键: ①要求剥离技术很高 ②需要考虑砧木和接穗对营养 组成的不同要求; ③与接穗的取材季节有密切关 系(苹果 4~6 月取材嫁接成 活率较高。) 34 四、植物脱毒苗的鉴定 1 、视觉观察法 ( 直接检测法 ) 看植株的茎叶是否有该病毒所有可见症状。 番 茄 无 菌 小 苗 厚 叶 莲 花 掌 35 植物病毒的症状 ? 植物病毒引起植株的症状是各异的,在观赏植物 上由病毒引起外部症状主要有以下几种: ? ( 1 )变色 :褪绿、黄化、花叶、斑驳、红叶等,常见病毒有;香石 竹斑驳病毒、黄瓜花叶病毒、芋花叶病毒等。 ? ( 2 )坏死 :常见的坏死是病斑或斑点。有轮斑、环斑、条斑‘条纹 等。如香石竹坏死斑点病毒、,凤仙花坏死斑点病毒草等。 ? ( 3 )畸形: 植株可出现矮缩、矮化或叶片皱缩、卷叶、蕨叶等病状。 ? ( 4 )萎蔫 :主要是指植物根或茎的维管束组织受到破坏而发生供水 不足所出现的凋萎现象。 36 2 、生物鉴定法 ( 指示植物 indicating Plant 法 ) 由于采用汁液接种法比较困难,所以通常采用 嫁接接种的方法 , 利用嫁接法接种,把待测的植物 接种在敏感植物上,然后视其有无病斑,来判断是否 脱除了病毒。 指 示 植 物 接 穗 嫁接后 的植物 37 植物组织培养 Good Morning 第八章 植物脱毒技术 1 一 . 病毒在植物体内的分布及危害; 二 . 植物脱毒的意义 三 . 植物脱毒的原理和方法; 四 . 植物脱毒苗的鉴定; 五 . 植物脱毒苗保存、应用与繁殖 教学内容 2 目的与要求: ? 了解: 1 、病毒在植物体内的分布及危害。 ? 理解 : 1 、脱毒苗的意义; ? 2 、植物脱毒苗的鉴定、保存、应用与繁殖。 ? 掌握 : 1 、无病毒苗概念; ? 2 、植物脱毒的原理和方法。 。 3 ? 病毒对寄主植物可造成毁灭性危害,导致大幅 度减产,甚至全株死亡。 ? 潜隐性病毒 侵染植物造成症状不明显的慢性危 害,不易被发现,尤其危险。 ? 国内外解决作物病虫害的有效途径是 培育无病 毒苗 ,实施农作物无病毒化栽培。 4 无病毒苗 是指不含该种植物的主要 危害病毒,即经检测主要病毒 在植物内的存在表现阴性反应 的苗木。 脱毒后的马铃薯苗 5 一 . 病毒在植物体内的危害及分布 1. 危害 : 绝大多数植物都可以无性繁殖的 , 容易受到多种病原 菌的侵染 , 体内积累浓度相当高的病毒。 ? 在无 性繁殖的种类中 ,由于病毒通过营养体进行传 递,在母株内逐代积累,危害日趋严重。 ? 病原菌的侵染不一定会造成植物的死亡 , 却会大大降 低植物的生长发育及产量和质量 , 从而影响其栽培的 经济效益。 ? 因此 , 脱除病毒及其他病原菌对植物栽培生产是非常 必要的。 6 一 . 病毒在植物体内的危害及分布 ? 2. 分布 ? 在植物体内的分布具有不均匀性,随植株不同部位 和年龄而异 。 – 老叶和成熟组织及器官中病毒含量较高 – 根尖、茎尖生长点约 0.1 ~ 1mm 区域内,几乎不含 病毒。(原因?) ( 原因: 分生组织细胞分裂和生长速度快,而病毒 在植物体细胞内繁殖速度相对较慢;另外,病毒 是通过筛管组织或胞间联丝传播至其他组织细胞 的,而茎尖分生组织无分化,没有维管组织 。 ) 7 二、植物脱毒的意义 任何一种优良品种均需有一个稳 定地保存其遗传性状的繁殖方法。 离体无性繁殖可以很好地保持品 种的优良特性,是无性繁殖品种繁 育的理想途径。 1 、能够有效地保持优良品种的特性 8 2 、快速繁殖品种,使优良品种迅速应用 ◆ 离体繁殖周期短 ◆ 不受季节限制 ◆ 繁殖系数高 ◆ 繁殖速度是任何其 他方法所不能比的 又称之为快繁 9 3 、生产无病毒种苗,防止品种退化 受病毒危害严重的作物: 大田作物
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