杜鹃花是一个多样化的常绿和落叶物种属,因其迷人的花朵和叶子而生长在世界各地的花园中。2023 年夏季,从俄亥俄州一家批发苗圃购买的 12 株盆栽杜鹃花 'Nova Zembla' 植物中有 9 株出现枯萎、叶子和茎变色,根系严重变黑和软化,最终发展为枯萎和植物死亡。根部使用 Phytophthora Immunostrip® (Agdia, Inc.) 检测呈阳性,这是一种常见的卵菌根腐病血清学测试。通过在 10% 漂白剂中浸泡 30 秒来去除根部,用无菌水冲洗 3 次冲洗,然后切成小块并接种在卵菌选择性 PARP-CMA 培养基上(Ivors,2015)。通过将菌丝尖端转移到马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA) 上并在 23 ± 2 °C 下在荧光下(12 小时)孵育一周来获得纯培养物。PDA 上显示的菌落放射至花瓣状放射状生长,具有最小的气生隔膜菌丝体。通过用无菌的 10% V8 肉汤淹没菌丝体栓并在 23 ± 2 °C 下在黑暗中孵育 48 小时来诱导孢子囊的产生。 所得菌丝垫用无菌水冲洗 3 次,然后安装在载玻片上。孢子囊为末端、球形,很少呈卵形、状或非状,长度为 22.24-46.38 μm,宽度为 19.80-33.70 μm (n=35)。在室温下孵育 1 周后,在培养物中未观察到卵孢子。使用 QIAGEN DNEasy Plant Mini Kit 从马铃薯葡萄糖肉汤中生长的菌丝垫中提取 DNA,在 26°C 下以 70 rpm 振荡 7 天,然后过滤。使用引物 OomCOILevup/FM85mod (mtDNA COX1 区域;Robideau 2011 年)和 NL1/NL4(rDNA D1-D2 大亚基;O'Donnell 1993 年)。 LSU 和 COX1 共有序列的 NCBI BLAST 搜索有 100% (637/637 bp;PQ381277) 和 98.33% (708/720 bp;PQ383368) 分别与 Phytopythium helicoides PF-he2 (OM337587.1, GCA_024867545.1) 的类型菌株匹配。9 株植物中有 5 株产生了通过测序鉴定为 P. helicoides 的分离株。选择分离株 FPH2023-33 进行深入表征。使用年轻的 (<6“ 高和直径) 杜鹃花 'PJM Elite Star' (n=6) 进行了一次致病性测试,一次使用'樱桃和梅洛' (n=6) 植物。通过将从 3 天龄的 V8 琼脂培养物或无菌 V8 琼脂平板(对照)中提取的 5 个 5 mm 琼脂塞放入每株植物的根部区域来接种植物。植物在饱和土壤条件下在温室中以平均 24°C 和 70% RH 的温室养护 30 天。未接种的植物保存在单独的托盘中,以防止交叉污染。在30 DPI时,75%接种的'PJM Elite Star'植物显示出严重的叶子卷曲和枯萎,100%的根系变暗和变弱,而50%接种的'樱桃和梅洛'植物表现出发育迟缓,75%的根和冠部出现轻微变色。两个品种的对照植物均无症状。从所有接种的植物中重新分离 Phytopythium helicoides,并使用上述相同的方法确认与原始分离物相同。没有从对照植物中回收 Phytopythium。这是这种病原体在美国杜鹃花上引起根腐病的首次报道。由于这种最近描述的病原体的化学和文化控制做法尚未得到充分研究,它的存在可能会对苗圃生产和景观环境产生重大影响。
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网址: Phytopythium helicoides 在俄亥俄州和美国的杜鹃花上引起根腐病和冠腐病的首次报道。,Plant Disease https://m.huajiangbk.com/newsview2383845.html
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