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旋毛虫镜检法

花匠小妙招
2025-10-20 23:28

猪旋毛虫病临床检疫方法探析CHINESEJOURNALOFANIMALQUARANTINE2004,21(11)—.34—. 文章编号:1005—944X(2004)011—0034—02方友平郭玉风杨勇敏魏德先(湖北省十堰市动物检疫站442000)旋毛虫病是由毛首目,毛形科于肠管,幼虫寄生于横纹肌.人,猪,可致人死亡,感染源为摄食生的或旋毛虫检验的方法主要有目检和镜检法,集样消化法,酶联免疫吸附试验,间接血凝试验和免疫荧光抗体技术等,我们在实践中要不断地改进,以寻求一种简便,快速而又准确性高的旋毛虫临床检验方法.1镜检法目前对旋毛虫病的检疫主要还是采用宰后压片镜检法,即目检和镜检相结合的方法.脚部各采样一块,记为一份肉样,其重量不少于30～50g,与胴体编成相同号码.1-2目检和镜检.撕去膈肌肌膜,仔细检查表面有无半透明露珠状,乳白色或灰白色针尖大小点状物,然后用剪刀顺肌纤维方向,剪取l2 粒米粒大肉样均匀的放于夹压玻片的一端向另一端逐个视野检视,仔细观察.2集样消化法集样消化法也是旋毛虫宰后检疫的一种方法.序,以5～l0头猪为一组,每头采取膈肌数克分别放在序号相同的采样盘或取样袋内.2.2捣碎肉样.每头随机取2g,每组共取l0～20g,加入约100～200 ml0.1～0.4%胃蛋白酶溶液,捣碎至肉样成絮状并混悬于溶液为止.形瓶中,再用等量胃蛋白酶溶液冲洗容器,洗液注入锥形瓶中,于200 rnl消化液中加入5%盐酸溶液7rnl后用粗筛过滤后再用细筛过滤,滤液收集于另一大烧杯中.沉降数分钟后取上清液再过滤振放于底部划分为若干个方格的培养皿内.用低倍镜按皿底划分的方格, 分区逐个检查有无旋毛虫.3酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验是当前应用是将抗原或抗体吸附固相载体,在载体上进行免疫酶染色,底物显色后用肉眼或分光光度计判断结果.3.1采样.按常规采血分离血清.明书稀释后,加入微量反应板的各3次,每次3min.血清作l:80稀释,每份作两孔,每孔滴加100L,同时设阳性,阴性对洗涤液洗涤3次,每次3min.加入按说明书稀释的酶标记抗体100L,37cc湿盒作用30min,然后L,37cc湿盒避光作用15min.先用肉眼判定.读取各孔于490Illa吸收波长的吸光度,凡被检血清的吸光度高于标准阴性血清平均吸光度二倍以上, 即判阳性反应.4间接血凝试验在间接血凝试验中,以动物的红细胞作为载体颗粒,这不仅因红细胞表面几乎能吸附任何抗原并且用致敏红细胞检测抗体时,其敏感性高,能测出极微量的抗体.4.1常规方法采血并分离血清.4.2测定抗原滴度,并稀释抗原.50L稀释抗原,最后二孔可作阳检血清50L,用微量移液器作倍比稀释,最后一滴弃去,阳性对照加阳性血清,空白对照不加血清,之后待其反应30rain后再滴加致敏红细胞, 将反应板置微型振荡器上振荡混合l min.取出置室温中约l～2h,待对照孔红细胞完全沉降后判定结果.5对比试验集样消化法比较繁琐,荧光抗在屠宰线上不可能推广,因此我们在十堰市某定点屠宰场只做了间接血凝试验,酶联免疫吸咐试验,做法是,对当天进场猪编号采血,经间接血凝试验和酶联免疫吸咐试验为阳性的做上标记,弱阳性的另作一种标记(阳性为感染旋毛虫强度高,弱阳性为感染旋毛虫强度低或炎性反应轻微),宰后再针对性地对阳性和弱阳性者用目检和镜检法进行检验,对比其结果是否一致(阳性:间接血凝试验抗体为4个滴度以上,酶联免疫吸咐试验肉眼观察颜色比阴性对照颜色明一显深并且接近m性对照或更深;弱阳性:间接血凝试验抗体滴度为2～4之间,酶联免疫吸咐试验肉眼观察颜色比阴性对照略深).三种方法检测结果列于表1.从对比检测结果可以得出,用目检,镜检法检验,对于旋毛虫感染强度低的病肉漏检率高达78%,而用间接血凝法或酶联免疫吸咐试验法即使炎性反应轻微也不会漏检. 6分析与讨论用传统的目检和镜检法费工,费时,漏检的可能性比较大,虽然这种方法对所检验的肉样能广泛观察,受检面积广,但对感染强度低或炎性反应轻微的病肉漏检率很高,并且此法只能用于宰后检高,但是操作较繁琐,应用于屠宰的准确性高,也不需要复杂精密的仪器,成本低,并且它可应用于宰前检疫,一旦我们检出有旋毛虫寄生,则可以采用一些治疗措施,使家表12004年4月份在十堰市某屠宰场所做的对比试验种类间接血凝试验酶联免疫吸咐试验目检,镜检检出头数数量(头) 日期阳性弱阳性阳性弱阳性阳性弱阳性6日23220212f113日25(1323々3l一20日24513131(125日2680101【】130日27533333『1合计127()9q9l()q2试验也是一种快速,简便的宰前检疫方法,它同间接血凝试验一样,敏感性高,且操作也不复杂,稳定可靠,所需的抗原可以从一些生物制品厂购买也可以自己制备,这两种方法弥补了'镜检法的许多不足之较先进的技术,它的敏感性高,但是它的制备程序复杂,目前用于寄生虫病诊断的荧光抗体研究得不多,因此,只有间接血凝试验,酶联免疫吸附试验在寄生虫病的诊断上具有广泛的利用推广价值,将来会逐渐代替传统的镜检法而应用于临床中,我们认为应推行间接血凝试验或酶联免疫吸附试验与目检和镜基础上的试纸法,快速诊断试剂盒等快速检验方法也值得基层动物检疫人员研究和应用.灞嗣一价格/桶箱价使用品名规格备注(全国统一)6桶/箱方法(真空浓缩型)塑料桶车间湿度用加开水大,印迹食品兰防伪33.5元201元2.Ok上下不干,可(真空浓缩型)塑料桶每桶加摇匀即可防伪28.5元171元(真空浓缩型)塑料桶使用1kg水专囊建议:检验猪肉用红色检验牛肉用兰色不合格肉品用■色多年来,检疫部门一直用紫药水溶液做为肉≯t类及食品的检验专用液由于科学家发现I甲紫溶液会残留在肉的可食用的组织中,有致癌作用,因此西方的一些国家已禁止使用该产品作为检验专用液,我国一些省,市,地区也开始禁止使用产器瀚甩滚?0||0为寻拽紫药水的替代产品使群众吃上放心肉.我厂在科研部门的指导下,选用离际认可的不在可食组织中残留的食品红和食晶兰为原料, 配以甘油VC,酒精,锌盐制成了食品红检验专用液和食品兰检验专用液,该产品具有无毒无害,印迹清晰明快使用方便不易仿造等优台秘垒l龌赢摄祷连遵摄量0本厂还生产屠宰点所用的消毒火碱,来苏,去污消毒粉,高效生物灭鼠药一次性捡疫手套,瘦内精试纸,旋毛虫检测试纸,乳房炎诊断试剂,动物发情诊鸯}试剂盒,乳房炎疫苗,性别控制液,各种宠物用疫苗等产品.食用色素,食用甘油,食用酒精等.。