什么叫基因工程?
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。
(一)基因工程的概念
基因工程的别名
操作环境
操作对象
操作水平
基本过程
结果
基因拼接技术或DNA重组技术
生物体外
基因
DNA分子水平
人类需要的基因产物
剪切
→拼接
→导入
→表达
(二)DNA重组技术的基本工具
分子手术刀—限制性内切酶
分子缝合针—DNA连接酶
分子运输车—运载体
识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。
4000种。
1、来源:
2、种类:
3、作用:
4、结果:
形成两种末端
一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶
粘性末端
平末端
什么叫黏性末端?
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
什么叫平末端?
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。
限制性内切酶
特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,在特定的切点切割。
举例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端,SmaⅠGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端。
拓展
(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端,在切开后的序列正着读和反着读碱基序列都一样称之为回文序列
回文对:
乾隆客上天然居,居然天上客;
纪晓岚人过大佛寺,寺佛大过人。
二、“分子缝合针”——DNA连接酶
1、 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,是把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子才能形成。
②DNA连接酶——分子缝合针:
:只能连黏性末端。
T4DNA连接酶:还能连平末端,但效率较低。
来源:前者源于大肠杆菌;后者源于T4噬菌体。
大肠杆菌
T4噬菌体
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