蚕豆赤斑病病原菌的鉴定及抗性资源筛选
蚕豆赤斑病病原菌的鉴定及抗性资源筛选
作 者: 黄燕导 师: 东方阳; 朱振东
学 校: 河北科技师范学院
专 业: 作物遗传育种
关键词: 蚕豆赤斑病 葡萄孢 鉴定 遗传多样性 抗性筛选
分类号: S436.43
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 42次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
蚕豆赤斑病（broad bean chocolate spot）是由葡萄孢属真菌（Botrytis spp.）引起的蚕豆生产中最重要的病害之一。主要由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、蚕豆葡萄孢（Botrytis fabae）、拟蚕豆葡萄孢（Botrytis fabiopsis）三种病原菌引起。在我国乃至世界地区均有发生，气候适宜时，病害发生相当严重。本研究通过形态学观察和分子生物学技术，对采自甘肃、青海、江苏、安徽、四川、湖北、河北、重庆8个省市的蚕豆病样进行分离鉴定并做产孢实验及遗传多样性分析，另外对161份蚕豆品种进行抗性资源的筛选，具体结果如下：1.2010～2011年间对8个省市采集的赤斑病标样进行单孢分离，通过形态学观察及分子生物学技术将其鉴定为3种病原菌分离物。共鉴定出314个分离物，其中灰葡萄孢分离物110个，蚕豆葡萄孢分离物84个，拟蚕豆葡萄孢分离物120个。对314个葡萄孢分离物做致病力测定，所有分离物对蚕豆品种均致病，3d后产生不同大小病斑。2.本研究采用形态学观察、Bc-hch基因序列扩增、转座子检测、酶切多态性分析技术、简单重复序列扩增多态性（SSR）技术，对8个省市的110个灰葡萄孢分离物多样性进行了分析，结果110个灰葡萄孢分离物在形态上分为菌丝、菌核、分生孢子三种类型，转座子组成方面分为vacuums和transposa两种类型，transposa型为主。在相似系数0.702时，110个分离物被划分为3个类群，说明分组结果与地理区域来源有关。3.选取灰葡萄孢、蚕豆葡萄孢、拟蚕豆葡萄孢代表分离物各50个，对其做遗传多样性分析，利用筛选的10个ISSR引物共扩增出123条扩增清晰且重复性高的条带，基因多样性指数为0.3777～0.5632，Shannon’s多样性指数为0.5740～0.9110，说明等位基因数与多样性指数的增大与各群体内样本数量增加有关。4.选取灰葡萄孢、蚕豆葡萄孢、拟蚕豆葡萄孢代表分离物做产孢实验，摸索出葡萄孢产孢的新方法，161份蚕豆品种中鉴定出31份抗性品种。
全文目录
中文摘要 4-5
ABSTRACT 5-7
英文缩写英文全称中文全称 7-13
第一章 绪论 13-22
1.1 蚕豆简介 13-14
1.1.1 蚕豆的分类地位及分布 13
1.1.2 蚕豆的生长习性 13-14
1.1.3 蚕豆生产、用途及其影响因素 14
1.2 蚕豆赤斑病的发生特点及流行规律 14-15
1.3 蚕豆赤斑病病原菌 15
1.4 蚕豆赤斑病的侵染症状 15-16
1.5 蚕豆赤斑病的发病因子及防治措施 16
1.6 抗性资源筛选 16-17
1.6.1 分生孢子接种法 17
1.6.2 高压喷雾接种法 17
1.7 SSR 标记在植物病原菌中的应用 17-19
1.7.1 植物病原菌种群变异及进化研究 17-18
1.7.2 用于病原菌的鉴定、交配型和种内型的区分 18
1.7.3 SSR 标记应用的前景 18-19
1.8 植物病原菌遗传多样性研究 19-21
1.8.1 遗传多样性 19
1.8.2 遗传多样性的检测方法 19-20
1.8.3 遗传多样性研究意义 20-21
1.9 本研究的目的及内容 21-22
1.9.1 研究目的及意义 21
1.9.2 研究内容 21-22
第二章 蚕豆赤斑病病原菌的鉴定 22-39
2.1 材料 22
2.2 方法 22-30
2.2.1 菌株的采集、分离、鉴定与保存 22-26
2.2.2.1 菌株的采集 22-23
2.2.2.2 菌株的分离与鉴定 23
2.2.2.3 分离物的保存 23-26
2.2.2 菌落形态观察 26
2.2.3 菌丝 DNA 的提取 26-27
2.2.4 PCR 扩增和检测 27-28
2.2.5 葡萄孢分离物产孢实验 28
2.2.6 致病力测定 28-29
2.2.6.1 接种体的制备 28-29
2.2.6.2 蚕豆植株培养 29
2.2.6.3 接种 29
2.2.7 葡萄孢分离物克隆和测序 29-30
2.3 结果与分析 30-38
2.3.1 葡萄孢分离物培养特性 30-32
2.3.2 基因组 DNA 的扩增及检测结果 32-33
2.3.3 葡萄孢分离物产孢结果 33-35
2.3.4 致病力测定结果 35-37
2.3.4.1 葡萄孢分离物的致病力类型 35-37
2.3.5 不同省份葡萄孢分离物的种类及数量 37
2.3.6 三种葡萄孢分离物测序结果 37-38
2.4 讨论 38-39
第三章 灰葡萄孢蚕豆分离物的遗传多样性 39-53
3.1 材料 39
3.2 方法 39-44
3.2.1 菌株的采集、分离、鉴定与保存 39-43
3.2.2 菌落培养特性观察 43
3.2.3 基因组 DNA 的提取 43
3.2.4 Flipper 和 Boty 转座子检测 43
3.2.5 Bc-hch 序列扩增和酶切 43-44
3.2.6 SSR 分析 44
3.2.7 数据统计与分析 44
3.3 结果与分析 44-50
3.3.1 菌落培养特性 44-45
3.3.2 转座子基因型 45-46
3.3.3 Bc-hch 序列特征 46-47
3.3.4 灰葡萄孢遗传多样性 47-49
3.3.5 不同地理来源灰葡萄孢的遗传关系 49-50
3.3.6 SSR 标记的灰葡萄孢遗传多样性分析 50
3.4 讨论 50-53
第四章 利用 ISSR 技术分析蚕豆赤斑病病原菌分离物群体遗传多样性 53-65
4.1 材料 53
4.2 方法 53-59
4.2.1 菌株的采集、分离、鉴定与保存 53-58
4.2.2 基因组 DNA 的提取 58
4.2.3 ISSR 引物筛选与 PCR 扩增 58-59
4.2.4 数据统计与分析 59
4.3 结果与分析 59-61
4.3.1 遗传变异分析 59-60
4.3.2 不同地理来源葡萄孢菌株的遗传相似性及遗传距离 60-61
4.3.3 基于 ISSR 标记的葡萄孢菌株遗传多样性分析 61
4.4 讨论 61-65
第五章 蚕豆赤斑病抗性资源筛选 65-71
5.1 材料 65
5.1.1 供试分离物及蚕豆资源 65
5.2 方法 65-66
5.2.1 孢子悬浮液接种方法 65-66
5.2.1.1 13 份蚕豆材料接种方法 65-66
5.2.1.2 150 份蚕豆材料接种方法 66
5.2.2 高压喷雾接种方法 66
5.2.2.1 13 份蚕豆材料接种方法 66
5.2.2.2 150 份蚕豆材料接种方法 66
5.3 结果与分析 66-71
5.3.1 13 份蚕豆材料接种结果 66-68
5.3.1.1 孢子悬浮液接种结果 66-67
5.3.1.2 高压喷雾接种结果 67-68
5.3.2 150 份蚕豆材料接种结果 68-71
5.3.2.1 高压喷雾接种结果 68-69
5.3.2.2 离体叶片种结果 69-71
第六章 全文结论 71-72
参考文献 72-80
发表论文及科研情况 80-81
附录 81-95
致谢 95-96
相似论文
夏季湖光岩玛珥湖浮游细菌和浮游活性菌遗传多样性的比较,Q938 抑制植物病原菌的植物提取物筛选,S482.2 玉米凝集素性质及其在PGPR筛选中的应用,S513 利用AFLP标记对四个多鳞鱚群体的遗传结构分析,S917.4 湛江北部湾深水海域马氏珠母贝四种壳色选育系F5的生长速度、生长模型及其遗传多样性的SSR分析,S968.31 藏药三果汤散抗氧化有效成分研究,R29 河南省小麦纹枯病菌致病力分化及遗传多样性研究,S435.121 南京地区西花蓟马Frankliniella occidentalis （Pergande）的发生调查及其线粒体基因组研究,S433 21个荷花品种遗传多样性的ISSR分析,S682.32 rd29A驱动RdreBlBI基因转化‘红颊’草莓的研究,S668.4 河南省小麦根腐线虫病原鉴定和RAPD分析,S435.121 中国玉米南方锈菌的分子遗传多样性和超微结构研究,S435.131.4 海洋放线菌GY-4的鉴定及其抗菌物质研究,Q936 嗜酸乳杆菌NX2-6抑菌物质的分离与结构鉴定,TS201.3 我国四省区梨主要病害的病原鉴定、分子检测与药剂筛选研究,S436.612 枯草芽孢杆菌fmbJ抗菌物质分离纯化及结构鉴定,TQ920.6 拮抗酵母菌抑菌机理及对草莓采后冷藏品质影响的研究,S668.4 12个STR基因座在四个品种犬中的遗传多样性分析及其在个体识别中的应用,S829.2 高山龙胆群体遗传与表观遗传结构研究,Q943 豫西、豫北及冀南地区4个禾谷孢囊线虫群体种类和致病型鉴定及品种抗性研究,S435.121 以普通财物为目标盗窃未遂的数额认定,D924.3中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 蔬菜病虫害 > 豆荚类病虫害
© 2012 www.xueweilunwen.com
相关知识
菊花菌核病病原菌鉴定、抗性筛选与防治
马铃薯种质资源晚疫病抗性评价及分子标记辅助筛选
哈密瓜种质资源苗期细菌性果斑病抗性鉴定
龙船花赤枯病病原菌鉴定及其生物学特性测定
花生果腐病致病真菌的分离及抗性种质资源鉴定
杧果细菌性疮痂病病原菌分离鉴定及室内药剂筛选
大豆花叶病毒抗性鉴定及抗病种质筛选资源
唐山地区柴胡根腐病病原菌分离鉴定及生物学特性研究
贡柑黑腐病病原菌的分子鉴定
蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法与流程
网址: 蚕豆赤斑病病原菌的鉴定及抗性资源筛选 https://m.huajiangbk.com/newsview2592820.html
| 上一篇: 怎么消除植物病虫害抗性？安全有效 |
下一篇: 贾彦霞 |
