蘸花法在植物遗传转化上应用研究进展
蘸花法在植物遗传转化上应用研究进展 摘要 植物遗传转化是基础理论研究和农作物性状改良的必要手段。随着蘸花法在十字花科植物中的成功应用被越来越多的学者关注,并用于许多模式植物及农作物的遗传转化。蘸花法简便、高效、稳定性好,转化后可直接获得转基因种子。该文介绍了蘸花法的原理,分析影响转化效率的因素,并总结了目前已成功应用蘸花法的研究情况及筛选转基因后代的优化方法。 关键词 遗传转化;蘸花;转化效率;筛选 中图分类号 Q-33 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2014)24-0009-02 遗传转化是植物转基因操作的关键环节。早期的转化技术如叶盘法、共培养法均涉及到植物组织培养和再生,体细胞易变异产生不利影响[1]。Feldmann于1987年首次提出原位渗透转化法,用农杆菌浸染刚萌发的拟南芥种子并筛选出转化阳性植株,避免了组织培养[2]。随后,Bechtold在原位渗透转化基础上建立了真空渗透法(vacuum infiltration),用处于花期的植株取代种子,倒置于农杆菌菌液,同时抽真空处理,转基因效率明显提高[3]。1998年,Clough和Bent在菌液中加入表面活性剂Silwet L-77,取消抽真空,建立了蘸花法(floral dip),其转化效率与真空渗透法相近[4]。Chung等发现喷雾(floral spray)处理可代替浸蘸花
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