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定31菊花的组织培养.ppt

花匠小妙招
2024-10-29 23:40

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1、3.1菊花的组织培养,(一)、植物组织培养的基本过程1理论基础：_。2细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在_、结构、生理功能上出现_的过程。,细胞的全能性,形态,稳定性差异,一、基础知识,3过程：_的植物组织或细胞脱分化,愈伤组织再分化,根、芽完整植株。,离体,离体的植物器官、组织、细胞,脱分化,愈伤组织,再分化,根、芽,植物体,植物组织培养的基本过程,移栽,(1)愈伤组织的特点：细胞排列疏松而无规则，是高度_的呈无定形状态的_细胞。(2)脱（去）分化：由高度分化的植物组织或细胞产生_的过程。(3)再分化：_继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 (4)如何控制细胞的脱分化与去分化？,液泡

2、化,薄壁,愈伤组织,愈伤组织,阅读32页解决下列问题：,通过激素控制,1外植体的选取,不同植物的组织培养难度 _,差别很大,如烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导比较难,如菊花的组织培养，一般选择_植株茎_。,对于同一种植物材料，材料的_、 _等也会影响实验结果。,年龄,保存时间的长短,（二）影响植物组织培养的因素,未开花,上部新萌生的侧枝,外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。,思考,？,在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？,2.培养基的配制,常用的一种培养基为_,其主要成分包括：,_元素：C、H

3、、O、N、P、K、Ca、Mg、S_元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co_ ：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等_ ：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,MS培养基,大量,微量,有机物,植物激素,思考,？,各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？,微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养。,在植物组织培养的过程中，为什么需要无菌操作？,思考,

4、？,植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长。,细胞分裂,细胞不分化,分化频率,3.植物激素,植物激素中_和_是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。_、_以及_等，都会影响实验结果。,生长素,细胞分裂素,植物激素的浓度,使用的先后顺序,用量的比例,根分化,芽形成,芽分化,根形成,促进愈伤组织生长,4.环境因素 (pH、温度、光照),不同的植物对各种条件的要求往往_。,如进行菊花的组织培养，一般将pH控制在_左右；温度控制在_ ；并且每天用日光灯照射_ 。,不同,5.8,1822 ,12h,5.无菌环境,在培养的

5、整个过程中，都需要是一个无菌环境。,无菌技术包括对_和_ 的消毒灭菌,培养基,外植体,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,培养,栽培,移栽,二、实验操作,（一）制备MS固体培养基,实验室一般使用_保存的配制好的培养基母液来制备,1.配制各种母液,配制母液时，大量元素浓缩_ ，微量元素浓缩_ ，常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照_的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。,1mg/ml,4,10倍,100倍,二、实验操作,2.配制培养基。,植物激素,在菊花组织培养中，可以不添加_ ，原因是菊花茎段组织培养_ 。,比较容易,配制培养

6、液,调PH,培养基的分装,3.灭菌,将分装好的培养基连同其他器械一起进行_。,高压蒸汽灭菌,（二）外植体消毒,将菊花嫩枝茎段用流水冲洗后，用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，先用70%的酒精消毒67 s，再用_清洗，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒12 min，最后再用无菌水至少清洗3次。,流水冲洗,酒精,无菌水,氯化汞,无菌水,浓度_摇动_次时间_s,浓度_时间_min,至少清洗_次漂净_,无菌水,70%,23,67,0.1%,12,3,消毒液,不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受能力。,在外植体消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？,思考,？,（三）接种,

7、接种操作都必须在_旁进行。将菊花茎段插入_时应注意方向，不要倒插。,酒精灯,培养基,（四）培养,接种后的锥形瓶最好放在_中培养。培养期间定期进行_，温度控制在_，并且每天用日光灯光照_h。,无菌箱,消毒,1822,12,（五）移栽和栽培：,移栽前用流水清洗根部的_，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗生长情况，适时烧水，施肥，直至开花。,培养基,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,在整个操作过

8、程中，是如何来实现无菌环境的？,思考,？,你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？,每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。,思考,？,植物组织培养过程:,离体组织或细胞,植物体,细胞分裂素生长素,愈伤组织,芽,根,细胞分裂素生长素,细胞分裂素生长素,植物细胞培养,不需要光,需要光,(1)分离出来的胡萝卜根细胞成为细胞团是通过_分裂方式来完成的。(2)细胞团中相同的细胞在发育成胚状体和植株的过程中，形态结构和生理功能逐渐向不同的方向发生了变化，这种现象叫做细胞的_。(3

9、)本实验说明了植物细胞具有_。(4)图示培育新的胡萝卜植株的技术在生物学上属于何种生殖方式？_。,1.美国科学家将分离得到的成熟胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养，由单个细胞发育成完整的新植株，如图所示，开花的胡萝卜，胡萝卜根的切片，从根的切片分离的细胞，由单个细胞分裂后形成的细胞团，胚状体，试管植物。请分析：,无性生殖,有丝,分化,全能性,A,3.回答下列有关植物组织培养的问题。(1)用于植物组织培养的植物材料称为_.(2)组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为 _。(3)在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的

10、变化情况如图所示，据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：,脱分化,外植体,当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，_；_。(4)若植物激素Y是生长素，在植物组织培养中其主要作用是_；则植物激素X的名称是_。(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状，其原因是_。,未分化细胞群经分裂形成愈伤组织,当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽,当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根,促进细胞的生长、分裂和分化,细胞分裂素,组织培养形成试管苗的过程属于无性繁殖，后代不发生性状分离,【解析】本题主要考查植物组织培养的相关知识。(1)用于植

11、物组织培养的材料叫外植体。(2)植物组织培养的核心过程是脱分化与再分化，脱分化指由分化状态变为未分化状态，再分化指由未分化状态变为分化状态。(3)仔细分析所给示意图，可知植物激素X与植物激素Y浓度比为l时，利于愈伤组织的形成，大于l时利于细胞群分化出芽，小于1时利于细胞群分化出根。(4)生长素在植物组织培养中主要作用是促进细胞生长、分裂和分化，植物组织培养过程中除需要生长素外还需细胞分裂素，二者共同起作用。(5)植物组织培养是一种无性繁殖技术，利于保持亲本的优良性状。,4.下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是()A不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素C植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的DpH、温度、光照等条件对植物组织培养也特别重要,D,