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植物的组织培养技术ppt.ppt

花匠小妙招
2024-10-29 23:42

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1、一、菊花的组织培养一、菊花的组织培养1植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程 2影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素判断正误判断正误 (1)菊花组织培养，一般选择开花植株的茎上部新萌生菊花组织培养，一般选择开花植株的茎上部新萌生的侧枝。的侧枝。()(2)植物激素的浓度可影响细胞分化，但使用的先后顺植物激素的浓度可影响细胞分化，但使用的先后顺序及比例不影响组织培养的过程。序及比例不影响组织培养的过程。()(3)pH、温度和光照等也影响植物组织培养。、温度和光照等也影响植物组织培养。()3实验操作过程实验操作过程灭菌灭菌(2)外植体消毒：外植体消毒：质量分数为质量分数为0.1%无菌水

2、无菌水 (3)接种：始终在接种：始终在旁进行，对接种工具要用旁进行，对接种工具要用灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意。(4)培养与移栽：在培养与移栽：在1822的的中培养，得到中培养，得到后进行移栽。后进行移栽。二、月季的花药培养二、月季的花药培养 1被子植物的花粉发育过程被子植物的花粉发育过程酒精灯火焰酒精灯火焰火焰灼烧火焰灼烧不要倒插不要倒插无菌箱无菌箱试管苗试管苗四分体时期四分体时期单核期单核期 2产生花粉植株的两条途径产生花粉植株的两条途径 3影响花药培养的因素影响花药培养的因素 (1)主要因素：主要因素：和和。(2)月季花药培养一般选择月

3、季花药培养一般选择期，细胞核由中央移期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期。向细胞一侧的时期。材料的选择材料的选择培养基的组成培养基的组成单核单核 4实验操作实验操作判断正误判断正误 (1)在剥离花药时，不要损伤花药，否则接种后不能脱分化在剥离花药时，不要损伤花药，否则接种后不能脱分化形成愈伤组织。形成愈伤组织。()(2)与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。()(3)月季花药培养得到的都是单倍体植株。月季花药培养得到的都是单倍体植株。()知识体系构建知识体系构建脱分化脱分化再分化再分化体细胞体细胞细胞的全能性细胞的全能性细胞细胞分裂素分裂素

4、单核期花粉单核期花粉 1(2012广东卷广东卷T2A)培育草莓脱毒苗所采用的主要培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物组织培养。技术是植物组织培养。()2(2011上海卷上海卷T22A)外植体可以来自植物的任何细外植体可以来自植物的任何细胞。胞。()3(2011江苏卷江苏卷T16A)愈伤组织是一团有特定结构和愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞。功能的薄壁细胞。()植物组织培养的过程及条件植物组织培养的过程及条件 42012山东卷山东卷T34(1)改编改编由外植体经过脱分化过由外植体经过脱分化过程形成愈伤组织，由愈伤组织经过再分化过程形成胚状程形成愈伤组织，由愈伤组织经过再分化过程形成胚状体

5、。体。()52012山东卷山东卷T34(3)外植体的消毒所需酒精的体外植体的消毒所需酒精的体积分数是积分数是70%。()6(2012山东卷山东卷T34(2)培养基中的生长素和细胞分培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值高时，有利于芽的分化。裂素用量的比值高时，有利于芽的分化。()1植物细胞的全能性植物细胞的全能性 (1)细胞具有全能性的物质基础：生物体的每一个细胞都细胞具有全能性的物质基础：生物体的每一个细胞都含有本物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所含有本物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全套基因。必需的全套基因。(2)植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素作

6、用植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素作用下，经过细胞分裂形成愈伤组织，才能表现出全能性。下，经过细胞分裂形成愈伤组织，才能表现出全能性。2植物组织培养的过程中脱分化与再分化的比较植物组织培养的过程中脱分化与再分化的比较过程过程特点特点条件条件脱分化脱分化外植体成为愈外植体成为愈伤组织伤组织排列疏松、高度液排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团泡化的薄壁细胞团离体、营养物离体、营养物质、植物激素、质、植物激素、其他适宜条件其他适宜条件再分化再分化由愈伤组织成由愈伤组织成为幼苗或胚状为幼苗或胚状体结构体结构有根、芽或有生根有根、芽或有生根发芽的能力发芽的能力 3影响植物组织培养的因素影响植物组

7、织培养的因素 (1)培养材料：培养材料：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短对培同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。(2)无菌条件：无菌条件：培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中繁殖得更快，而且它们

8、会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡，因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并毒死亡，因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。且要求无菌操作。(3)植物激素：在配制好的植物激素：在配制好的MS培养基中，常常需要添加植培养基中，常常需要添加植物激素。其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和物激素。其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。用量的比例等，都会影响实验结果。按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结

9、按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果果(如下表如下表)：使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素，后使用细胞先使用生长素，后使用细胞分裂素分裂素有利于细胞分裂，但细胞有利于细胞分裂，但细胞不分化不分化先使用细胞分裂素，后使用先使用细胞分裂素，后使用生长素生长素细胞既分裂又分化细胞既分裂又分化同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。胞的发育方向。关键一点关键一点无菌技术是植物组织培养获得成功的关键，无菌技术是植物组织培养获得成功的关键，无菌技术包括培养基的灭菌、植物材

10、料无菌技术包括培养基的灭菌、植物材料(外植体外植体)的消毒和接种的消毒和接种时的无菌操作。时的无菌操作。典例典例1如下图所示为胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌如下图所示为胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作，接入试管后，在一定的条件下，形成试管苗的培育操作，接入试管后，在一定的条件下，形成试管苗的培育过程，请据图回答下列问题：过程，请据图回答下列问题：(1)要促进细胞分裂生长，培养基中应含有营养物质和要促进细胞分裂生长，培养基中应含有营养物质和激素，营养物质包括激素，营养物质包括_和小分子有机物；激素包括和小分子有机物；激素包括细胞分裂素和细胞分裂素和_两类植物激素。两类植物激素。(2)此过程依据的原理是

11、此过程依据的原理是_。A和和B阶段主要进阶段主要进行的分裂方式是行的分裂方式是_，B阶段除了细胞分裂外，还进阶段除了细胞分裂外，还进行细胞行细胞_等。等。(3)此过程要无菌操作，主要是指对此过程要无菌操作，主要是指对_进行灭菌消进行灭菌消毒。毒。B阶段需要光照，原因是阶段需要光照，原因是_。(4)试管苗的根细胞没有叶绿素，而叶的叶肉细胞具有叶试管苗的根细胞没有叶绿素，而叶的叶肉细胞具有叶绿素，这是基因绿素，这是基因_的结果。的结果。(5)将胡萝卜组织块接种到培养基上时，为防止细胞污染将胡萝卜组织块接种到培养基上时，为防止细胞污染应如何操作？应如何操作？_。答案答案(1)无机盐生长素无机盐生长素

12、(2)植物细胞的全能性植物细胞的全能性有丝分裂分化有丝分裂分化(3)培养基芽发育成叶，叶肉细胞中叶培养基芽发育成叶，叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件绿素的合成需要光照条件(4)选择性表达选择性表达(5)接种要在酒接种要在酒精灯火焰旁进行精灯火焰旁进行月季的花药培养月季的花药培养 1(2011上海卷上海卷T22BC)在无菌条件下以花粉作在无菌条件下以花粉作为外植体可得到单倍体植株。为外植体可得到单倍体植株。()2(2012江苏卷江苏卷T16B)二倍体植株的花粉经脱分二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株。化与再分化后得到稳定遗传的植株。()3(2013湖南湖南32校校3月联考月联

13、考T42(2)确定花粉发育时期确定花粉发育时期最常用的方法有醋酸洋红法，某些植物的花粉不易着色，需最常用的方法有醋酸洋红法，某些植物的花粉不易着色，需采用焙花青一铬矾法。采用焙花青一铬矾法。()42013临沂一模临沂一模T34(4)若用花药进行离体培养则应若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至单核期的花药培养成功率最高。选择花粉发育至单核期的花药培养成功率最高。()1植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同植物组织培养技术植物组织培养技术花药离体培养技术花药离体培养技术相同相同点点理论依据理论依据植物细胞的全能性植物细胞的全能性基本过程基本过程影响因素影

14、响因素选材、营养、激素、选材、营养、激素、pH、温度、光照等、温度、光照等不同不同点点选材选材体细胞体细胞生殖细胞生殖细胞(花粉花粉)生殖方式生殖方式无性生殖无性生殖有性生殖有性生殖 2注意事项注意事项材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，该部分不仅分生能力强，而且无病株的茎上部新萌生的侧枝，该部分不仅分生能力强，而且无病毒侵染。月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单毒侵染。月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养，且在花蕾期，因为此时质地幼嫩，核靠边期的花药进行培养，且在花

15、蕾期，因为此时质地幼嫩，花瓣未开，微生物不易侵入，容易消毒。花瓣未开，微生物不易侵入，容易消毒。剥离花药时，尽量不要损伤花药，同时还要彻底去除花剥离花药时，尽量不要损伤花药，同时还要彻底去除花丝，防止对实验产生干扰。丝，防止对实验产生干扰。外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质的酒精和质量分数为量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照，而在后期两者均需光照。药培养不需光照，而在后期两者均需

16、光照。典例典例3某二倍体植物是杂合体，下图为其花药中未某二倍体植物是杂合体，下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。请成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。请据图回答：据图回答：(1)图中图中表示的是该花粉培养过程中的表示的是该花粉培养过程中的_过程，过程，表示的是表示的是_过程，过程，X代表的是代表的是_，表示的表示的是是_过程，过程，表示的是诱导表示的是诱导_过程。过程。(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中过哪一条途径主要取决于培养基成分中_的种类及其的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为_植株植株(甲甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有明未成熟花粉具有_。(3)对植株甲进行对植株甲进行_，才能使其结实产生后代，才能使其结实产生后代(乙乙)，否则植株甲只有通过，否则植株甲只有通过_的方式才能产生后代的方式才能产生后代(丙丙)