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花叶玉簪的组培方法

花匠小妙招
2024-10-31 09:24

花叶玉簪(Hosta undulata Bailey) 为百合科( Liliaceae) 宿根草本花卉，是近几年从国外引进的玉簪新品种。玉簪耐旱、耐寒且喜阴，常栽培于林下或建筑物北侧，以提升园林工程的观赏效果，是重要的观叶、观花的园林地被植物。除观赏外，其花含芳香油，可提取制作芳香浸膏。此外，花叶玉簪还有清热解毒、消毒止血、预防疾病和养生延寿等多种功效，是极具开发前景的药用、绿化配景用植物。

　　花叶玉簪的繁殖方式有种子繁殖、分株繁殖和组织培养繁殖3 种。玉簪从播种到开花至少需要3年，且种子繁殖的后代一般不能保持亲本的优良性状，因此生产中一般不用种子繁殖。分株繁殖不仅需要大片的土地栽培母株，而且繁殖系数低，周期长。采用组培方式繁殖不仅可以快速繁殖种苗，达到推广新品种的目的，还能节约耕地，在短时间内实现经济价值。笔者对花叶玉簪的组培技术进行研究，以期为花叶玉簪的种质栽培提供理论依据。

1 材料与方法

　　1． 1 材料

　　1． 1． 1 研究对象。金边玉簪和银边玉簪，由苏州农学院相城科技园组培室提供，经鉴定为百合科( Liliaceae) 宿根草本花卉。

　　1． 1． 2 主要试剂。所用试剂均为国产分析纯，市售。

　　1． 2 方法

　　1． 2． 1 花叶玉簪外植体的采集。选择健壮，无病虫害，具有繁殖品种典型性状的花叶玉簪植株，取其植株基部当年生的芽作为外植体。2、3 月份是取材的最佳季节，春季是玉簪生长开始的季节，此时体内积累了较丰富的的营养物质和内源激素，接种后启动率高，而且污染率较低。晴天上午9～ 10点是最佳取材时间。

　　1． 2． 2 外植体的处理及消毒。将外植体表面的泥土等杂质清洗干净，并去除外部多余的叶片和根系，然后添加洗衣粉振荡清洗，再用自来水冲洗2 ～ 3 遍，最后用流水冲洗1 h。将初步洗涤及切割的外植体放入烧杯，带入超净工作台进行消毒处理。具体步骤如下: 将处理过的外植体放入灭过菌的空瓶子中，然后用浓度为75%的酒精溶液浸泡1 min，再用无菌水冲洗2 次，接着用浓度为0． 1%的升汞溶液浸泡15 ～ 20min，最后用无菌水清洗3 ～ 5 次，每次5 min。注意浸泡过程中用无菌镊子不断搅动，以去除残留在外植体上的升汞。再用滤纸吸干水分，以备接种。在试验中对升汞的消毒时间对污染率的影响进行对比试验。

　　1． 2． 3 培养基的制备。试验采用的培养方式为固体培养，所用的基本培养基为MS，植物生长调节剂为6-BA 和NAA，附加琼脂粉8g/L，蔗糖30g/L。培养基采用200 ml 的小口瓶分装，每瓶分装50 ml。

　　1． 2． 4 培养条件。温度为( 26 ± 1) ℃; 光照为12 h /d; 光照强度为2 500 lx; pH 5． 8 ～ 6．0。用灭过菌的手术刀横切去除上部叶片，留约0． 5 cm 长，再将幼芽外部叶柄剥去，然后将其切成0． 25 cm 长，最后将其正向插入MS + 4． 0 mg /L 6-BA + 0． 1 ～ 0． 2 mg /L NAA诱导培养基中，每瓶接种1 ～ 2 个外植体。

　　1． 2． 5 增殖培养。将初代得到的无菌苗，分别接种到几种不同的培养基中，重点研究不同生长调节剂浓度配比对玉簪芽增殖的影响，以选择出芽增殖效果最佳培养基。计算公式为: 芽增殖系数= 培养后芽数/接种时芽数。

　　1． 2． 6 生根培养。取生长健壮的苗接种于3 种不同浓度NAA 的生根培养基中，研究不同浓度的NAA 对苗生根情况的影响。

2 结果与分析

　　2． 1 升汞的不同消毒时间对污染率的影响由表1 可知，升汞的消毒时间并不是越长越好，只有最适宜的消毒时间才能取得最佳的消毒效果。

　　2． 2 芽的增殖试验由表2 可知，随着6-BA 浓度的增加对芽的增殖有一定的促进作用，但增至5mg /L 时则会抑制芽的增殖，且苗的生长状态开始恶化。综合可得，MS + 4． 0mg /L 6-BA + 0． 1 mg /L NAA增殖效果最好，苗生长健壮。增殖培养中，接种于较低浓度6-BA 和NAA 配合使用的培养基中的幼苗，也出现了生根的现象。可见较低浓度的6-BA 对苗的生根并没有抑制作用，NAA 在生根培养中起着关键作用。

　　2． 3 生根培养由表3 可知，适应于花叶玉簪生根的最佳培养基为1 /2MS + 0． 1 mg /L NAA + 0． 3% 活性炭。20 d 后平均根长可达3 cm，且根系比较粗壮，移栽后易成活。

　　2． 4 驯化与移栽当生根幼苗长度达4 ～ 7 cm 的时候则可移栽，移栽前应先将其移至常温下适应3～ 5 d，然后打开盖子再适应2 ～ 3 d，之后用镊子或手指去除组培苗根部的基质，用消毒水漂洗干净，并去除无根，无心叶，畸形的苗，最后将洗好的苗摊放在苗床上以备移栽。

　　移栽应在3 ～ 6 月和9 ～ 11 月为宜，移栽的基质以蛭石∶珍珠岩( 5∶1，W/W) 、泥炭土∶珍珠岩∶蛭石( 3∶1∶1，W/W/W) 或腐叶土∶蛭石( 3∶1，W/W) 为好，移栽时用筷子等工具在穴盘上插孔，然后将苗的根系放入孔中覆土压实。注意要浅栽，根系舒展，心叶要露于基质之上，移栽后浇水，水量以使基质充分湿润即可。

3 结论与讨论

　　综合以上分析可知，采用组培方法繁殖花叶玉簪，虽然具有繁殖系数高，时间短等优点，但也存在着污染严重，品种退化等问题。因此，在组培过程中，既要保证接种材料、培养基的无菌，接种室和培养室环境的良好，同时在操作过程中要时刻加强操作者的“无菌”意识。

　　试验以花叶玉簪的芽为外植体进行诱导，诱导出的丛生芽几乎没有发生变异。以花序做外植体具有消毒容易，污染率低的优点，但再生出的芽会发生性状分离，不能够保持其母本的优良特性。所以，花叶玉簪组培快繁时最好采用芽作为外植体。试验结果表明，MS + 4． 0 mg /L 6-BA + 0． 1 mg /LNAA 是最适宜芽增殖的培养基; 1 /2MS + 0． 1 mg /L NAA +0． 3%活性炭是较好的生根培养基。幼苗移栽时以蛭石∶珍珠岩( 5∶1，W/W) 、泥炭土∶珍珠岩∶蛭石( 3∶1∶1，W/W/W) 或腐叶土∶蛭石( 3∶1，W/W) 的成活率较高，小苗生长健壮。