使老年神经干细胞恢复活力,Nature Aging
首先，研究人员从组成型表达 Cas9 的年轻（3-4 个月大）或老年小鼠（18-21 个月大）中分离和培养 qNSC，然后将细胞暴露于全基因组单向导 RNA 文库。正如该研究的通讯作者 Anne Brunet 所描述的那样，这种方法使研究人员能够“根据在培养物中观察到的增殖细胞的比例，测试基因组中的所有基因 （23,000） 在敲除时改善旧 NSC 激活的能力”。最终，作者确定了 301 个基因敲除，这些基因敲除选择性地改善了老年（相对于年轻）小鼠 qNSC 的激活，包括与纤毛组织和葡萄糖转运相关的基因。
接下来，作者对他们是否可以将这种筛选的结果转化为改善老年小鼠的 qNSC 激活感兴趣。Brunet 解释说，“Tyson [Ruetz] 的想法是利用神经源性生态位的空间性质（NSC 与它们产生的新神经元位于不同的位置）”。例如，脑室下区生态位中的 qNSC 激活导致这些细胞迁移到嗅球。在单独敲除从体外筛选中鉴定出的 301 个基因中的 30 个后，作者报告了 7 个基因敲除，这些基因敲除可重复地改善了老年小鼠的 qNSC 激活;其中包括 Slc2a4，它编码 GLUT4 胰岛素依赖性葡萄糖转运蛋白。作者观察到，老年小鼠的 qNSCs 的 GLUT4 水平和葡萄糖摄取高于年轻小鼠。此外，他们报告说，敲除 Slc2a4 或暂时缺乏葡萄糖的 qNSC 可以提高老年但未年轻 qNSC 的激活率。这些结果表明，老年 NSC 可能处于高葡萄糖摄取状态，这可能源于衰老过程中 GLUT4 表达增加。用 Brunet 的话来说，Slc2a4 可能是“敲除后会促进老年 NSC 激活并改善老年小鼠神经发生”的基因之一。
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