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花药培养技术的基本操作方法

花药培养技术的基本操作方法

取新鲜未开的花蕾用自来水冲洗10分钟,用75%的酒精消毒10-15分钟,无菌水冲洗2次,再用10%漂白粉上清液浸泡20分钟,无菌水冲洗3-4次。然后将花药放到加有基本培养基的小烧杯中,用注射器的内管在烧杯的壁上挤压花药,使花粉从花药中释放出来。用尼龙筛过滤掉药壁组滤液再经低速离心(100-160r/min),上面的碎片可用吸管吸掉,再加入新鲜培养基。连续进行两次过滤,到每毫升含103-104个花粉的浓度就可以了。简单的方法是花粉从花药中挤出后,用镊子取出花粉空壳,放在培养基上培养。此法适于微室栽培,但往往有药壁等体细胞混入。......阅读全文

动物实验基本技术2

第五节 实验动物的采血法实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析,故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择,主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血:需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作

动物实验基本技术2

第五节 实验动物的采血法实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析,故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择,主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血:需血量很少时常用本法,如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作

动物实验基本技术3

第七节 实验动物的处死当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。一、蛙 类常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的

真菌基本检验技术概述

真菌检验基本上可分为培养技术和非培养技术两大类。非培养技术又分为显微镜检查技术、生化免疫检查技术和分子生物学技术。前者是直接观察真菌形态,其中组织病理学检查为侵袭性真菌感染诊断的金标准;后者是检测真菌的抗原、抗体和核酸。这些技术的综合使用可大大地提高侵袭性真菌感染诊断的准确性。图1为常见的真菌检验技

动物实验基本技术2

第三节 实验动物的麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%

原代细胞传代基本技术

1. 选用原代细胞生长状态好(90-95%),生长数量大于5×10⁵进行传代。2. 吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS(pH7.4)清洗细胞培养瓶2次。3. 3ml细胞消化液加入细胞培养瓶,轻轻摇动,使细胞消化液覆细胞培养瓶底。(建议使用赛奥斯的原代细胞消化液。)4. 细胞培养瓶置于5%CO2

FPLC技术基本实验原理

  FPLC(fast protein liquid Chromatography)为一种特殊的GX液相层析(HPLC,high pressureliquid chromatography)装置,快速分离纯化和定量测定蛋白质组分是它的主要用途。他的本原理相同于HPLC,就是在高压条件下(20—200

动物实验基本技术4

三、实验动物的准备本文主要叙述制备转基因鼠的实验程序。(一)不育雄性公鼠:结扎公鼠与母鼠交配以后产生假孕母鼠。受结扎的公鼠需8周以上,对种系无特殊要求。在正式实验前,结扎公鼠需与性成熟的雌性小鼠交配,反复交配两次或三次,经检查雌体有阴道栓,但均不怀孕产仔,则证明结扎成功。结扎公鼠使母鼠产生阴道栓的能

PCR技术基本反应步骤

PCR是Polymerase Chain Reaction(聚合酶链式反应)的首字母缩写,简单说来,PCR是由高温变性—低温退火—中温延伸三个基本反应步骤构成:01 DNA的变性成为单链模板DNA经加热至95℃左右一定时间后,使模板DNA双链解离成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应做准备;02低温

免疫标记技术的技术特点和基本类型

免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或 电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原 抗体反应。免疫标记技术不仅极大地提高了 抗原抗体反应的敏感性,以便对微量物质进 行定性或定量检测,而且结合以显微镜或电 镜技术,能对待测物进行精确的定位检测。 免疫标记技术有三种基本类型:免疫荧光 法、免疫酶技术和放

关于基因扩增技术—PCR技术的基本信息介绍

  基因扩增技术—PCR技术是由Cetus公司和加利福尼亚大学1985年联合创造的,主要贡献者为Kary B mulis和HeneryA、Erlich。该方法首先被应用于人β-珠蛋白DNA的扩增及镰刀状红细胞贫血病的产前诊断。自85年首次报道PCR方法以来,PCR被广泛应用于分子克隆、序列分析、基因

血脂仪的操作方法

  第一步:打开电源,直接按电源开关start  第二步:显示请插入校准卡。插入memochip校准卡,屏幕会显示校准卡相应的检测项目名称和测试条生产批号。  第三步:显示插入测试条,正面朝上插入测试条进样槽(位于仪器上部)  第四步:显示放置样本。准备血液样本,用加样器吸取15ul的血液样本一次性

液氮罐的操作方法

 液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐两种。贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存,不宜在工作状态下作远距离运输使用;液氮运输罐为了满足运输的条件,作了专门的防震设计。其除可静置贮存外,还可在充装液氮状态下,作运输使用,但也应避免剧烈的碰撞和震动。一、使用前的检查: 液氮罐在充填液氮之前,首先要检查外壳

吲哚实验的操作方法

  将菌接种至蛋白胨水培养基中,37℃下  在培养液中加入乙醚1~2ml,静置片刻后乙醚层浮于培养液的上面,此时沿管壁缓慢加入5~10滴吲哚试剂(加入吲哚试剂后切勿摇动试管,以防破坏乙醚层影响结果观察),如有吲哚存在,乙醚层呈现玫瑰红色,此为吲哚试验阳性反应,否则为阴性反应,阳性用“+”、阴性用“-

烘箱的使用操作方法

  1.使用前,必须注意电源电压是否兼容。使用时,电源插座的地线必须按照规定接地。  2.在通电操作期间,不要用手触摸包装盒顶部空间的电气部分,或用湿布擦拭并用水冲洗。检查期间应切断电源。  3.电源线缠绕在金属物体上,不可以放置在低温或垂直的中心,以免橡胶因老化而泄漏。  4.不要使包装箱中的物品

移液器移液器的操作方法

移液器的使用方法一个完整的移液循环:1、枪头安装正确的安装方法叫旋转安装法把移液器顶端插入枪头(无论是散装枪头还是盒装枪头都一样),在轻轻用力下压的同时,左右微微转动,上紧即可。2、移液体积设定粗调:通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值;细调:当体积值接近自己的预想值之后,应将移液器横置,

移液器的正确操作方法

移液器的使用方法一个完整的移液循环:1、枪头安装正确的安装方法叫旋转安装法把移液器顶端插入枪头(无论是散装枪头还是盒装枪头都一样),在轻轻用力下压的同时,左右微微转动,上紧即可。2、移液体积设定粗调:通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值;细调:当体积值接近自己的预想值之后,应将移液器横置,

尿比重的操作方法

  充分混匀尿液后,沿管壁缓缓倒入小量筒中,如有泡沫时,用滴管或滤纸吸去。然后放入比重计,勿使比重计触及玻璃筒壁或底部,待比重计稳定后读取与尿液凹面相切的刻度并报告之。

冷冻蚀刻的操作方法

冷冻蚀刻的操作方法按以下步骤进行。1.预处理取新鲜组织块,大小为15~3~5mm,用25%戊二醛固定1~3小时。为防止冰晶形成,用30%甘油生理盐水浸泡8~12小时。2.冷冻断裂是在冷冻条件下使样品变得又硬又脆,用刀劈裂样品,暴露观察面。因为是用刀劈裂的样品,断裂往往发生在细胞被冻结后较脆弱的部

变应原检测的操作方法

  1.斑贴试验  (1)受试部位一般取上背部脊柱两侧的正常皮肤。若皮脂过多,可用75%乙醇轻轻擦拭,然后用生理盐水清洗待干。  (2)去除斑试器的保护纸,将变应原按顺序置于惰性聚乙烯塑料或铝制斑试器内。排列顺  序为自上至下,自左至右,并做标记。  (3)将加有变应原的斑试器胶带自上至下贴敷在受试

燃烧炉的操作方法

  将电弧炉电源线、进气、出气导管分别与规定的电源、低压氧气及测试设备连接好后,确认氧气源安全可靠、坩锅座和电弧炉壳体不带电的情况下,即可按下列步骤操作。  1、将已称好的试样及添加剂倒入铜坩埚内、用坩埚夹夹住坩埚上部移置于坩埚座内。  2、将"手把"向下扳转,使坩埚座托坩埚上升,坩埚法兰沿面与炉体

DNA指纹的操作方法

从生物样品中提取DNA(DNA一般都有部分的降解),可运用PCR技术扩增出高可变位点(如VNTR系统,串联重复的小卫星DNA等)或者完整的基因组DNA,然后将扩增出的用DNA酶切成DNA片断,经琼脂糖凝胶电泳,按分子量大小分离后,转移至尼龙滤膜上,然后将已标记的小卫星DNA探针与膜上具有互补碱基序列

真菌鉴定的操作方法

  1.常见标本主要有各种分泌物,皮肤的角质性物质,如毛发、指(趾)甲、鳞屑,及脓汁液、穿刺液等,粪便和尿液,组织块,环境中的各种标本材料等。  2.采集标本应新鲜,最多不超过2h,如不立即送检则必须放入冰箱保存,尽速送检;应在用药前采集标本;标本采集量应充足,血液和脑脊液不少于5ml,胸腔积液不少

纸电泳的操作方法

(1) 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0) 取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g,加水4000ml,使溶解。(2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜,次日取出,用水漂洗至洗液的pH值不低于4,置60℃烘箱烘干,备用。

DNA指纹的操作方法

  从生物样品中提取DNA(DNA一般都有部分的降解),可运用PCR技术扩增出高可变位点(如VNTR系统,串联重复的小卫星DNA等)或者完整的基因组DNA,然后将扩增出的用DNA酶切成DNA片断,经琼脂糖凝胶电泳,按分子量大小分离后,转移至尼龙滤膜上,然后将已标记的小卫星DNA探针与膜上具有互补碱基

恒温摇床的操作方法

       1、开启电源,约一分钟自检结束。若显示“000”则说明传感器开路或输入信号超过测量范围。   2、按SET键可设定温度,按SET键至敛码管下排数据闪动,表示仪表进入温度设定状态,按△键设定值增加,按▽键设定值减小,再按一下SET键仪表回到正常工作状态温度设定完毕。   3、在确认仪表显

显微注射的操作方法

以细胞内微注射和微灌注技术为基础的玻璃针头(GlassNeedle,精细的玻璃微量毛细移液管)的使用,已经在越来越多的实验生物学研究领域中成为一项非常普遍的操作方法,比如在体外受精、转基因中等等。描述这些技术最恰当的话应当称其为---显微操作,因为这些操作是通过单个的或多个的筒状玻璃微量移液管、精确

质量控制监测在细胞检测技术中的具体操作方法

质量控制监测在细胞检测技术中的具体操作方法包括以下几个方面:实验环境监测:定期清洁和消毒实验室,包括工作台面、仪器设备表面。监测实验室的温度、湿度和通风情况,确保在适宜的范围内。使用空气过滤器减少空气中的微粒和微生物污染。仪器设备校准和维护:按照制造商的建议,定期对仪器(如显微镜、流式细胞仪、PCR

细胞破碎技术的基本概念及其基本方法3

(6)冻结-融化法将细胞放在低温(-150C),然后在室温中融化,反复多次,细胞壁破裂。(7)干燥法经干燥后的菌体,其细胞膜的渗透性发生变化,同时部分菌体会产生自溶,然后用丙酮、丁醇或缓冲液等溶剂处理时,胞内物质就会被抽提出来。破碎率定义为被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比数,即: Y(%)=[

细胞破碎技术的基本概念及其基本方法2

(3)胶体磨胶体磨的基本原理是流体或半流体物料在离心力的作用下,强制通过高速相对运动的定齿与动齿之间,使物料受到强大的剪切力,磨擦力、高频振动和高速旋涡等复杂力等作用,有效地被粉碎、乳化、均质、混合,从而达到精细超微的效果。定转子间的高速相对运动是使胶体磨工作获得物理微细度的主要条件,只有提高磨盘的

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