两种兰科植物组织培养及有益菌根真菌的筛选
两种兰科植物组织培养及有益菌根真菌的筛选
【摘要】： 兰科植物作为一种重要的植物资源，许多品种具有极大的观赏价值和药用价值，且市场需求量大。然而，自然状态下兰科植物种子萌发困难，分株繁殖系数较低，虽然采用组培技术实现了其大量繁殖，但由于缺乏共生菌根真菌，组培苗驯化成活率低、生长发育缓慢。本研究旨在采用菌根技术与组培技术相结合的方法，促使兰花组培苗菌根化，筛选出不同兰科植物的有益菌根真菌。主要研究结果如下：1、对春兰进行组织培养的过程中发现，采用NaOH预处理，暗培养150d后进行光照培养最有利于种子的萌发，萌发率最高为79.2%；在1/2MS培养基附加2.0mg·L~(-1)NAA+1.0mg·L~(-1)6-BA时最有利于春兰根状茎的增殖；1/2MS培养基中附加0.1mg·L~(-1)NAA+1.0mg·L~(-1)6-BA时最有利于春兰根状茎芽的诱导；1/2MS培养基中附加0.5mg·L~(-1)IBA+1.0mg·L~(-1)NAA，是春兰幼苗生根壮苗的最佳激素浓度配比。培养基中添加椰乳时最有利于铁皮石斛幼苗组培苗生根壮苗。2、将铁皮石斛组培苗与8种菌根真菌进行共培养，结果表明接种FL3、FL7、FL8菌株的组培苗鲜重增长率、干物质积累、营养元素的吸收尤其是大量元素的吸收均达到了显著差异水平，同时促进了幼苗分蘖及根的分化，结合石蜡切片观察及重分离结果，认为这3菌株已与铁皮石斛组培苗形成了良好的共生体系。3、将春兰组培苗与三种真菌共培养，结果表明菌株FL2春兰鲜重增长率的提高，根的分化有极大促进作用。结合石蜡切片观察结果，认为FL2与春兰形成了良好的共生关系。4、通过对铁皮石斛菌根显微结构观察，表明铁皮石斛具有典型的兰科菌根结构，菌苗共生15d后，真菌在根内定植。菌丝通过根毛或破坏表皮细胞进入根被细胞，并定植在根被细胞内；真菌以菌丝的形式穿透细胞壁来侵染其他细胞，并再次形成菌丝结。5、春兰显微结构观察发现，春兰具有典型的兰科菌根结构：真菌通过破坏根表皮细胞侵染根部；真菌以菌丝结的形式存在，主要分布在皮层薄壁细胞内；真菌以菌丝的形式完成对周围其他细胞的侵染，并再次形成菌丝团。
【学位授予单位】：浙江农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
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