第八章 基因工程育种课件
第八章基因工程育种第一节基因工程育种概述第二节重要的工具酶第三节常用的载体第四节基因工程育种基本过程第五节基因工程育种的应用主要内容第一节基因工程育种概述 Cohen 和 Boyver l973 年首次成功完成了 DNA 分子的体外重组实验,宣告基因工程(gene engineering) 的诞生,也为微生物育种带来了一场革命。基因工程育种广义的基因工程育种包括所有利用 DNA 重组技术将外源基因导入到微生物细胞,使后者获得前者的某些优良性状或者利用后者作为表达场所来生产目的产物。基因工程育种的优势与传统育种方法不同的是,基因工程育种可以突破物种间的障碍, 实现真正意义上的远缘杂交。而且这种远缘既可跨越微生物之间的种属障碍,还可实现动物、植物、微生物之间的杂交。同时,利用基因工程方法, 人们可以“随心所欲”地进行自然演化过程中不可能发生的新的遗传组合,创造全新的物种。这是一种自觉的、能像工程一样事先进行设计和控制的育种技术,是最新、最有前途的育种方法。第二节重要的工具酶工具酶基因工程中的工具酶主要是指用于DNA 和RNA 分子的切割、连接、聚合、修饰、反转录等有关的各种酶系统。一、限制性核酸内切酶(RE) 是一类由细菌产生的能专一识别双链 DNA 中的特定碱基序列、并水解该点磷酸二酯键的核酸内切酶, 简称限制酶或切割酶。根据限制酶的作用特性,一般分为三类: ——Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型, 其中常用的是Ⅱ型限制酶。限制酶( Ⅱ型)识别及切割位点特异识别及切割 4?8个bp长度且具有回文序列的 DNA 片断,主要产生 3种缺口: 5ˊ-粘性末端 3ˊ-粘性末端平头末端回文序列是指该部位的核苷酸序列呈 180 O旋转对称; 粘性末端是指经内切酶特异切割后产生的 5ˊ-末端突出或 3ˊ-末端突出的碱基序列,相互具有互补性。
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